SPAG9蛋白在不同类型子宫肌肉瘤中免疫组化检测结果分析

程光卉(平顶山市第一人民医院 河南 平顶山 467000)

SPAG9蛋白在不同类型子宫肌肉瘤中免疫组化检测结果分析

程光卉
(平顶山市第一人民医院 河南 平顶山 467000)

目的 探讨分析SPAG9蛋白在不同类型子宫肌肉瘤中免疫组化检测结果。方法 选取平顶山市第一人民医院2014年2月至2015年10月收治的24例子宫平滑肌肉瘤患者、25例富于细胞性子宫平滑肌瘤患者、26例子宫平滑肌瘤患者分别作为A、B、C组，3组患者均采用免疫组织化学技术进行SPAG9蛋白检测，分析对比检测结果。结果 A、B组SPAG9蛋白表达阳性率均高于C组，A组SPAG9蛋白表达水平高于B组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SPAG9蛋白参与了子宫肌肉瘤的发生、发展过程，因此可作为子宫平滑肌肉瘤、富于细胞性子宫平滑肌瘤的鉴别指标，值得临床推广。

SPAG9蛋白；子宫肌肉瘤；免疫组化

子宫平滑肌肉瘤是子宫肉瘤的一种，发生率约占子宫肉瘤的45%，主要是指来源于子宫肌壁、肌壁间血管壁平滑组织的恶性肿瘤，或者是良性平滑肌瘤的恶性病变，但是少数患者平滑肌瘤难以区别良、恶性，临床鉴别难度大[1-2]。手术是子宫平滑肌肉瘤治疗的常用手段，但是为了降低并发症需要明确确定手术范围，探寻一种能够鉴别子宫平滑肌肉瘤的分子标记物，本研究主要探讨SPAG9蛋白在不同类型子宫肌肉瘤中的表达水平，旨在为临床针对性治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取平顶山市第一人民医院2014年2月至2015年10月收治的24例子宫平滑肌肉瘤患者、25例富于细胞性子宫平滑肌瘤患者、26例子宫平滑肌瘤患者分别作为A、B、C组，A组年龄42～65岁，平均(53.2±6.1)岁；B组年龄43～65岁，平均(53.6±5.5)岁；C组年龄41～65岁，平均(52.9±6.0)岁。3组患者年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 测定方法 试剂：由美国Abcam公司生产提供的山羊抗兔二抗试剂盒、兔抗人SPAG9一抗试剂盒、DAB。将标本采用甲醛固定并进行石蜡包埋，制成蜡块后进行连续切片，厚度约为5 μm，将其置于预先进行脱水处理的载玻片上并保持平整，分批进行染色。染色具体步骤：所有切片首先进行松节油脱蜡，利用蒸馏水进行3次水洗并将温度调高至98℃，采用枸橼酸缓冲液(PBS)进行抗原热修复15 min，然后待室温冷却后采用PBS冲洗3次，在标本中添加血清于37℃中进行孵育30 min，去除血清后滴入一抗，将其稀释为1∶550，放置于4℃冰箱中储存过夜，早晨取出于37℃中孵育30 min，再次采用PBS冲洗3次。然后添加二抗于37℃中孵育30 min，DAB显色30 s后再采用苏木素复染2 min，采用盐酸酒精进行标本分化，用正常的自来水进行冲洗返蓝，脱水后进行自然晾干并采用中性树胶封片。阳性对照：以SPAG9蛋白阳性表达的正常睾丸组织；阴性对照：以非免疫山羊血清代替一抗。SPAG9蛋白阳性细胞判定标准：细胞浆中出现淡黄色至棕褐色颗粒的细胞。

1.3 观察指标 比较3组不同类型子宫肌肉瘤患者SPAG9蛋白表达水平以及阳性率。阳性率以及Formwitz(半定量积分法)积分方法：①0分：平均阳性细胞数<5%；1分：平均阳性细胞数5%～25%；2分：平均阳性细胞数26%～50%；3分：平均阳性细胞数51%～75%；4分：平均阳性细胞数>75%。②根据无着色、淡黄色、棕黄色、棕褐色分别计分0～3分。③将上述两者得分相乘，根据总分进行阳性判定：0、1～4、5～8、9～12分各自对应阴性、弱阳性、阳性、强阳性。阳性率=弱阳性率+阳性率+强阳性率。

2 结果

2.1 3组患者SPAG9蛋白表达水平以及阳性率 A、B组SPAG9蛋白表达阳性率均高于C组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 3组患者SPAG9蛋白表达水平以及阳性率(n，%)

2.2 A、B组SPAG9蛋白表达水平 A组患者SPAG9蛋白表达的Formwitz分值为(9.1±1.8)分，B组SPAG9蛋白表达的Formwitz分值为(4.8±2.1)分，A组SPAG9蛋白表达水平高于B组，差异有统计学意义(t=7.681，P<0.05)。

3 讨论

子宫肌肉瘤较为罕见，是一组起源于子宫平滑肌组织、子宫间质、子宫内组织的恶性肿瘤，包括原发性和继发性两种，约占子宫恶性肿瘤的2%～4%，严重威胁患者的生命健康[3]。该疾病临床表现特异性不强，与子宫平滑肌瘤、其他恶性肿瘤较为相似，因此术前诊断难度较大，多行病理学检查确诊。

据报道，形态学标准(有丝分裂活动、凝固性坏死)是区分良性、恶性子宫平滑肌瘤的重要、唯一指标，但是当前越来越多研究表明其并非是绝对指标[4]。有研究发现，SPAG9蛋白能够定位人体染色体的17q21.33，是多种肿瘤染色体突变的热点区域，与肿瘤的相关基因扩增以及表达存在相关性[5]。SPAG9蛋白属于单拷贝基因，属于C-Jun氨基端激酶家族成员，与JNK作用蛋白JIP3具有结构同源性，参与细胞增殖、分化、转化等多种活动，与精卵结合、促分裂原活化激酶信号通路中的分子作用明显相关，其在不同组织学类型肿瘤细胞中均有表达，可作为肿瘤侵袭性、预后评估的分子标记物。

综上所述，SPAG9蛋白参与了子宫肌肉瘤的发生、发展过程，因此可作为子宫平滑肌肉瘤、富于细胞性子宫平滑肌瘤的鉴别指标，值得临床推广。

[1] 曹敏敏.SPAG9在宫颈腺癌中的表达及其临床意义[D].济南:山东大学,2014.

[2] 王敏.SPAG9在子宫内膜癌中的表达及意义[J].西南军医,2014,11(5):497.

[3] 刘景城.P16、Bcl-2、P53、Ki-67、ER、PR抗体在子宫平滑肌瘤及平滑肌肉瘤中的表达研究[D].福州:福建中医药大学,2013.

[4] 魏莉.精子相关抗原9在子宫平滑肌肉瘤中的表达及临床意义[J].现代妇产科进展,2012,21(5):357.

[5] 潘皆慰.SPAG9在宫颈腺癌中的表达及其临床价值研究[J].中国妇幼保健,2016,31(10):2042.

R 446.8

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.16.068

2016-12-26)