新乡地区住院患者弓形虫感染状况

王苏康 刘燕子 党耀宏 邱中常 胡翠 李小丽王丹萍 白晨倩 娄玲玲 刘世国(.新乡医学院基础医学院 河南 新乡 45000；.新乡医学院第三附属医院 检验科 河南 新乡 45000；.新乡医学院 分子病原体实验室 河南 新乡 45000)

新乡地区住院患者弓形虫感染状况

王苏康1刘燕子2党耀宏1邱中常1胡翠1李小丽1王丹萍1白晨倩1娄玲玲1刘世国3
(1.新乡医学院基础医学院 河南 新乡 453000；2.新乡医学院第三附属医院 检验科 河南 新乡 453000；3.新乡医学院 分子病原体实验室 河南 新乡 453000)

目的 了解目前各类住院患者弓形虫感染状况。方法 在2014年5月至2015年10月随机收集新乡医学院第三附属医院住院患者血液标本830份，采用酚试剂法提取患者血液中DNA，将弓形虫多拷贝529DNA片段作为待检弓形虫序列，通过单管一步法巢式PCR技术扩增，琼脂糖凝胶电泳技术检测样本中目的基因的存在。结果 弓形虫529基因患者总阳性率为3.13%，男3.05%，女3.23%，差异无统计学意义(P>0.05)。育龄妇女(16～49岁)阳性率为3.74%，眼部疾病患者阳性率为5.10%，肝部疾病患者阳性率为5.56%，感染高于总体水平。结论 住院患者存在弓形虫感染，各科室各病种均有弓形虫阳性感染。

弓形虫；住院患者；新乡地区

弓形虫病是由刚地弓形虫感染所致的全球性人畜共患疾病[1]，人群普遍易感，几乎影响到世界人口的1/3[2-3]。人受感染后，虫体可侵犯人体多种脏器，其临床表现常因侵犯脏器不同而异，几乎涉及内、外、妇、儿、神经精神、传染病、肿瘤、眼、耳鼻喉等科室[4]。崔黎明等[5]调查吉林大学第一医院住院患者弓形虫感染率高达16.95%，目前河南新乡无相关报道。为了解河南新乡地区住院患者弓形虫感染情况，于2014年5月至2015年10月对新乡医学院第三附属医院各科室患者进行弓形虫DNA检测调查。

1 对象与方法

1.1 调查对象 随机选取2014年5月至2015年10月在新乡医学院第三附属医院入院检查的830例患者为调查对象，来自25个不同科室的患者，年龄0～96岁。

1.2 材料与方法

1.2.1 试剂 蛋白酶K购自USA Genview，Tris饱和酚购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，PCR 2*Es Taq master mix购自中国北京康为世纪生物科技有限公司，弓形虫RH株是新乡医学院人体寄生虫学教研室长期保种，引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，其他试剂均为国产分析纯。

1.2.2 DNA检测 患者血液DNA的提取按苯酚抽提法进行，RH株弓形虫滋养体的DNA提取按酚一氯仿法进行；然后以患者DNA为模板，进行单管一步法巢式PCR，扩增弓形虫529多拷贝片段。弓形虫529外引物F：5’-CGC TGC AGG GAG GAA GAC GAA AGT TG-3’，R：5’-CGC TGC AGA CAC AGT GCA TCT GGA TT-3’，弓形虫529内引物F：5’-AGA AGG GAC AGA AGT CGA AG-3’, R：5’-CTC CAC TCT TCA ATT CTC TCC-3’。PCR反应条件为：95 ℃ 30 s，68 ℃ 30 s，72 ℃ 50 s进行15个循环扩增；然后在95 ℃ 30 s，58 ℃ 30 s，72 ℃ 50 s，72 ℃ 5 min条件下再进行共35个循环扩增，每个样本DNA扩增反应均在1个PCR反应管内进行。取15 μl PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。以RH株弓形虫滋养体DNA作阳性对照，已知正常人血液DNA作阴性对照，ddH2O作空白对照。

1.3 统计学分析 本次调查统计性别、年龄和疾病为记录。用χ2检验检测在研究人群中不同性别、年龄和疾病弓形虫感染情况，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 男性与女性普通患者弓形虫感染情况 男性弓形虫感染阳性率为3.05%，女性为3.23%，差异无统计学意义(χ2=0.023 0，P>0.05)。见表1。

表1 男性与女性普通患者弓形虫感染情况(n，%)

2.2 各年龄段普通患者弓形虫感染情况 40～49岁组阳性率较高，为6.09%，0～9岁组较低，为0.00%，各年龄组之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 各年龄段普通患者弓形虫感染情况(n，%)

2.3 患病部位及不同类型 各个患病部位及不同类型弓形虫感染率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 患者的患病部位及不同类型情况(n，%)

3 讨论

弓形虫是重要的人兽共患病，对人类健康和畜牧业生产构成严重威胁。弓形虫感染免疫力正常者，常以包囊的形式潜伏与体内，在脑部常处于休眠状态，一般无临床症状[6]。当机体免疫力低下时，使其致病力增强，肿瘤患者由于经放疗或化疗机体免疫力下降，使原有隐形感染活化，诱发弓形虫感染，导致患者病情恶化，预后不佳[7]。

据本次调查显示，河南省新乡医学院第三附属医院住院患者弓形虫阳性率为3.13%，与国内报道的吉林大学第一医院住院患者阳性率16.95%，张家口地区医院10.12%相比较低，而与长沙医科大学附属湘雅医院3.54%结果相近[4，5，8]。国外报道的土耳其阿菲永医院检测弓形虫阳性率24%和伊朗艾尔·萨拉医院普通患者阳性率43.1%相比更低[9-10]。这可能与中国人口弓形虫感染率较低(7.88%)，而国外如罗马尼亚阳性率64.8% ，伊朗阳性率55.5%，美国阳性率为22.5%，土耳其阳性率为19.4%，普洱市阳性率为24.17%等感染较高相关[11-15]。可能是社会文化和气候因素的地区差异引起的[16-17]。弓形虫病是重要的食物源性寄生虫病，因此当地畜牧业发展对人类健康造成巨大的威胁，应该引起我们极大的关注和重视。

本次调查男性与女性普通患者弓形虫阳性率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。与罗马尼亚一般人群(男：60.4%，女：68.5%，P>0.05)、伊朗一般人群(男：54.4%，女：56.2%，P>0.05)、中国ICU(男：18.36%，女：21.60%，P>0.05)和莫桑比克艾滋病患者(男：39.30%，女：50.90%，P>0.05)等性别差异的调查结果相符合[13,14,18，19]。这说明弓形虫的感染与性别无关，但从上面数据可以看出女性弓形虫阳性率都略高于男性，这可能在某种因素的影响下存在差异。也有报道显示泰国南部HIV患者性别差异有统计学意义(男性：42%，女性：30%，P=0.031)，男性阳性率明显高于女性[20]。因此弓形虫感染与性别的关系应该引起大家的注意。各年龄组之间弓形虫感染亦无太大差异，并且随着年龄的增加弓形虫阳性率呈不规则变化，这与相关报道的弓形虫感染率随年龄增长而增长不符[19,21]。40～49岁年龄组阳性率明显高于其他年龄组，这可能与他们流动大、生活条件较差，感染机会多，且这个年龄段人体体能各方面开始减退，抵抗力下降，加上恶劣的环境，弓形虫更易侵入人体有关。也有报道称各年龄组中30～39岁感染率偏高基本相符[22]。

在本次研究中育龄妇女弓形虫阳性率为3.74%，与国内报道的鲁西地区3.10%基本一致，而与国外，如印度22.4%，罗马尼亚西部55.5%，西班牙43.8%，克罗地亚38.1%，匈牙利69.0%等相比，中国育龄妇女弓形虫感染率较低[13,16,23]。一个显著的相关性是与土壤接触，并且罗马尼亚报道称在育龄妇女中农村地区感染率显著高于城市地区(农村地区：68.9%，城市地区：40.0%，P=0.03)[13，24]。这可能是农村家庭养猫较多，猫通过粪便污染了土壤，而农村妇女长期接触土壤，便增加了弓形虫感染率，再加上农村卫生条件较差，因此农村妇女的健康应该引起我们的重视。

弓形虫寄生于有核细胞内，随血液流动，到达全身各部位，破坏大脑、心脏、眼部等重要器官，致使人的免疫力下降。本次调查统计了人体重要器官疾病弓形虫感染情况，在脑部疾病，眼部疾病、肝部疾病和心血管疾病的患者中均有弓形虫感染者，且眼部疾病患者和肝部疾病患者的阳性率高于总体水平。弓形虫是一种嗜神经细胞内寄生原虫，可引起严重的中枢神经系统损伤，破坏大脑、眼部等器官，引起较高的感染率，本次调查中脑部疾病患者弓形虫感染并不明显，但应引起临床医生的重视[23-24]。肿瘤患者弓形虫阳性率接近于总体水平，与有些报道称肿瘤患者(63.53%)和普通患者(24.14%)弓形虫感染有显著差异的结果不同[7]。心血管疾病患者弓形虫阳性率却低于总体水平，与相关结果(心脏病：13.8%，对照组：8%，P=0.010)更是不同，此报道称弓形虫感染可能与饮酒有关[25]。对于心血管疾病的感染情况有待进一步研究。

本次调查结果显示，河南省新乡医学院第三附属医院住院患者弓形虫感染率处于较低水平，但中老年、免疫功能低下者以及育龄妇女阳性率偏高，建议医院加强血清学检测，便于及时采取有效干预措施。

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Infection ofToxoplasmagondiiin hospitalized patients in Xinxiang district

Wang Sukang1, Liu Yanzi2, Dang Yaohong1, Qiu Zhongchang1, Hu Cui1, Li Xiaoli1, Wang Danping1, Bai Chenqian1, Lou Lingling1, Liu Shiguo3
(1.BasicMedicalCollegeofXinxiangMedicalUniversity,Xinxiang453000,China; 2.DepartmentofLaboratory,theThirdAffiliatedHospitalofXinxiangMedicalUniversity,Xinxiang453000,China; 3.MolecularPathogenLaboratory,XinxiangMedicalUniversity,Xinxiang453000,China)

Objective To investigate theToxoplasmagondiiinfection among all kinds of hospitalized patients. Methods Blood samples of 830 hospitalized patients were randomly collected from the Third Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University in May of 2014 to October of 2015. The total DNA was extracted by phenol reagents in the blood of patients. TheToxoplasmagondii529 muiticopy fragment gene was used as the sequence ofToxoplasmagondii. The DNA fragment was amplified by single one-step nested PCR technique and the presence of the target gene in the samples was detected by agarose gel electrophoresis. Results The total positive rate ofToxoplasmagondii529 gene was 3.13%. The positive rate of male was 3.05%, female was 3.23%, the difference was not statistically significant (P>0.05). The positive rate of women of childbearing age (16～49 years) was 3.74%. The positive rate of patients with ocular disease was 5.10% and the positive rate of patients with liver disease was 5.56%. The positive rate of these diseases was higher than the overall level of infection. Conclusion The infected person ofToxoplasmagondiiis present in hospitalized patients and the infection ofToxoplasmagondiiis positive in all departments and all types of diseases.

Toxoplasmagondii; hospitalized patient; Xinxiang district

刘世国，E-mail：lsg1963@163.com。

R 382.5

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.16.006

2016-11-16)