文冠果壳总多酚的含量测定

李 媛 施欢贤

陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046

药物研究

文冠果壳总多酚的含量测定

李 媛 施欢贤*

陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046

目的：测定文冠果壳中总多酚含量。方法：用紫外分光光度法对文冠果壳总多酚含量进行测定。结果：没食子酸标品浓度在0.05～0.25mg范围内线性关系良好(R2=0.9998)，回归方程为：Y=4.184X-0.0008，样品平均回收率分别为101.3%，稳定性RSD为2.50%，重复性RSD为1.27%，精密度RSD为1.88%。测得文冠果壳中总多酚含量为2.14mg/g。结论：该方法简单，稳定，可靠，可作为测定文冠果壳中总多酚的方法。

文冠果壳；总多酚；福林酚法

多酚是一类重要的植物次生代谢产物，研究表明多酚类化合物拥有抗肿瘤、抗病毒、抑菌、抗氧化等作用，广泛应用于医药、食品、日化等领域[1]。文冠果又名文官果、僧灯毛道、温旦革子、崖木瓜树、土木瓜等，为无患子科(Sapindaceae)植物。主要分布于东北、华北、陕西、甘肃、青海、宁夏等地[2]。研究表明，文冠果壳95%乙醇提取物中含有黄酮类、皂苷类、苯丙素类、多酚类等化合物，并具有良好的生物活性[3-6]。然而，关于文冠果壳中多酚含量的研究尚未见报道，对其开发和利用有一定阻碍。目前，多酚含量测定的方法有很多，包括高锰酸钾法[7]、酒石酸亚铁法[8]、Folin-Ciocalteu比色法[9]等，其中Folin-ciocalteu法显色明显，操作简单，误差小、回收率高而得到广泛运用。笔者利用 Folin-ciocalteu法对文冠果壳中总多酚含量进行测定，旨在建立一种快速，准确的测定文冠果壳总多酚含量的方法，为文冠果多酚类化合物资源的开发利用提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 电子天平(上海佑科仪器仪表有限公司)；旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；UV-2600紫外分光光度计(日本岛津公司)。1.2 材料 没食子酸对照品(批号: 140509，陕西乐博生化科技有限公司)；Folin -Ciocalteau试剂(批号: P/N F-9252，美国Sigma公司)；Na2CO3(批号: 20120210，廊坊鹏彩精细化工有限公司)。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液制备 精密称取文冠果壳粉末约2.50g，按1:10的料液比加入95%乙醇回流提取3次，每次1h，合并滤液，在转速为10000rpm/min条件下离心10 min，取上层清液，即得。

2.2 对照品溶液制备 精密称取标准品没食子酸6.25mg于25.00mL容量瓶中，95%乙醇溶解并定容至刻度，得终浓度为0.25mg/mL没食子标准品溶液，备用。

2.3 线性范围考察[10]分别精密吸取没食子酸对照品溶液0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL，加入Folin-Ciocalteau试剂1.50mL，摇匀，再加入6.00mL7.5%的Na2CO3，40℃水浴保温90min，在波长766nm处测定吸光度，结果制得标准曲线如图1所示，没食子酸对照品在浓度(x)与吸光度(y)线性回归方程为Y=4.184X-0.0008，相关系数R2=0.9998，没食子酸浓度在0.05～0.25 mg/mL区间内与吸光度线性关系良好。

2.4 方法学考察

2.4.1 精密度试验 精密称取没食子酸对照品溶液0. 50 mL，按“2.3”项下方法测定吸光度，重复测定6次，没食子酸对照品溶液吸光度相对标准偏差为1.88%。表明该方法的精密度较良好。2.4.2 重复性试验 取同一文冠果壳供试品(文冠果壳)，按“2.1”方法平行制备6份，按“2.3”项下方测定其吸光度，文冠果壳总多酚吸光度相对标准偏差RSD为1.27%，说明该方法重复性良好。

2.4.3 稳定性试验 精密量取同一文冠果壳供试品溶液0.5mL，按“2.3”项下方法分别于0、2、4、6、8、10 h测定吸光度，文冠果总多酚溶液吸光度相对标准偏差RSD为2.50%。说明该方法在一定时间内稳定性较好。2.4.4 加样回收率试验 精密称取文冠果壳粉末6份，每份约1.25g，按照Folin-Ciocalteu法测定吸光度，计算得平均回收率为101.3%，相对标准偏差RSD为1.96%，说明该方法具有较高的准确性和可靠性。结果见表1。

表1 回收率实验 (n=6)

2.5 样品含量的测定 吸取0.50mL的文冠果壳供试液，按“2.3”测定方法测定吸光度，计算文冠果壳提取物中总多酚的含量为2.14mg/g。

3 讨论

利用Folin-Ciocalteau法测定了文冠果壳总多酚的含量，测得文冠果壳总多酚含量2.14 mg/g。该方法简单，精密度，重复性，稳定性良好等优点。为后期开发和利用文冠果壳多酚类成分提供了一定的理论基础。

[1]陈为钧,万圣勤.茶叶中多酚类物质的研究进展[J].天然产物研究与开发,1994, 6(3): 74-80.

[2]万国盛，王晓波，吴立军，等，文冠果的化学成分及药理活性研究进展[J].中草药，2013，44(3)：1842-1850.

[3]毛迪锐,姜贵全,张卓睿,等.超声波辅助提取文冠果壳总黄酮的工艺及其抗氧化性研究[J]. 食品工业科技,2015,36(19):237-242.

[4]李光勋,王力华,陈玮.正交试验优选文冠果壳中文冠果壳苷提取工艺[J].2009,30(02):58-60.

[5]万国盛,任宇豪,高慧媛,等.文冠果果壳化学成分的分离与鉴定[J].沈阳药科大学学报, 2015, 32(1):18-21.

[6]李占林.文冠果果壳化学成分及生物活性研究[D].沈阳:沈阳药科大学, 2005.

[7]王烨军,徐奕鼎,黄建琴,等.酒石酸亚铁比色法和高锰酸钾滴定法测定茶多酚的比较[J].茶叶通报,2010,32(2): 61-63.

[8] 丁友昌.分光光度法测定茶多酚保健品中茶多酚[J].中国公共卫生, 1998,14(9)：62.

[9]钟兴刚,刘淑娟,郑红发,等.酒石酸亚铁法和福林酚法测定茶多酚的差异原因研究[J].茶叶通讯,2013,40(03):28-34.

[10]王晓林,钟方丽,孙威,等.东北铁线莲总多酚的超声提取工艺研究[J].河北科技大学学报，2012,33(01),32-35.

Determination the Total Polyphenol Content ofXanthocerasSorbifoliaBunge’s Husk

LI Yuan SHI Huanxian*

Shanxi University of traditional Chinese medicine,Xianyang 712046,China

Objective To determine the total polyphenol content(TP) in the husks ofXanthocerassorbifoliaBunge. Methods UV spectrophotometric was used to determine the total polyphenol content ofXanthocerassorbifoliaBunge husks. Results The results showed that TP content of standard samples (counted by gallic acid) was 2.14mg/g .The standard of gallic acid concentration in 0.05～0.25mg/g range and the linear relations were good (R2=0.9998), and the regression equation wasy=4.184x-0.0008. The average recovery rates ofXanthocerassorbifoliaBunge was 101.3%.The stability ofRSDwas 2.50%, the repeatabilityRSDwas 1.27%, and the precisionRSDwas 1.88%.Conclusions The method was simple, accurate and suitable for measuring TP content inXanthocerassorbifoliaBunge husks.

XanthocerassorbifoliaBunge Husk；Total Polyphenol；Folin-ciocalteu

李媛(1991-)，女，汉族，硕士研究生，研究方向为中医外科学(肛肠病)。E-mail：1182546093@qq.com

施欢贤(1991-)，男，汉族，硕士研究生，研究方向为中药药剂学。E-mail：ssshily@163.com

R284.2

A

1007-8517(2017)16-0013-02

2017-06-13 编辑：邓佳丽)