扶正平消胶囊的薄层色谱鉴别研究

周 瑾 赵 亮 周昶锐 李 洋 王 慧 吕 磊

上海东方肝胆外科医院药材科，上海 200438

扶正平消胶囊的薄层色谱鉴别研究

周 瑾 赵 亮 周昶锐 李 洋 王 慧 吕 磊*

上海东方肝胆外科医院药材科，上海 200438

目的：建立扶正平消胶囊薄层色谱鉴别方法，以提高该制剂的质量标准。方法：基于药典中单味药材的薄层方法进行优化，对组方中2味君药黄芪、龙胆，1味臣药浙贝母，1味毒性药材狼毒进行鉴别。结果：组方中4味药材的薄层鉴别显示，供试品斑点清晰，与对照品位置一致，可纳入新的质量标准。结论：研究建立的扶正平消胶囊薄层鉴别方法，简便可行，可为该制剂的质量控制提供科学的依据。

扶正平消胶囊；质量标准；薄层鉴别

扶正平消胶囊以中医学中气滞血瘀、热毒内蕴、肝失疏泄、气阴两虚肿瘤的病机理论为基础，采用行气破血、扶正抗邪的抗癌中药进行对症治疗，是我院结合临床长期研究，筛选精炼组方而制成，用于治疗原发性肝癌的经验方剂[1-3]，在临床使用十余年来，获得医生和患者的一致好评。扶正平消胶囊由黄芪、玄参、夏枯草、吴茱萸、龙胆等28味中药组成[4-5]，工艺复杂，对其质量标准进行研究和提高，对于保持该制剂质量及疗效稳定，具有十分重要的临床意义[6-7]。本研究对扶正平消胶囊中2味君药黄芪、龙胆，1味臣药浙贝母，1味毒性药材狼毒进行薄层鉴别研究，为该制剂的质量控制提供科学的依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 索尼DSC数码相机(索尼<中国>有限公司)；DHG恒温烘箱(上海合恒仪器设备有限公司)；ZF台式紫外分析仪(杭州齐威仪器有限公司)；展开缸(上海华连科技有限公司)；PW超纯水系统(香港Heal Force公司)。

1.2 材料 扶正平消胶囊(批号20160501)、黄芪甲苷对照品(批号110781-201616)、龙胆苦苷对照品(批号110770-201613)、贝母素甲对照品(批号110750-201612)、狼毒对照药材(批号121331-201303)均购自中国食品药品检定研究院。硅胶G薄层层析板(青岛海洋化工厂)，甲醇、三氯甲烷、氨水、无水乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、碘化铋钾、正己烷、乙酸酐、浓硫酸，均为分析纯，水为纯水。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

2.1.1 龙胆 取扶正平消胶囊内容物1g，加甲醇25mL，超声提取30min，滤过，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2 浙贝母 取扶正平消胶囊内容物5g，加浓氨试液2mL与三氯甲烷20mL，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.3 狼毒 取扶正平消胶囊内容物10g，加40mL氨试液，搅拌使溶解，放置过夜；过滤，残渣加无水乙醇100mL，回流提取1h，冷却，滤过；滤液蒸干，加乙醇2mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.4 黄芪 取扶正平消胶囊内容物11.25g，加甲醇100mL，超声提取1h，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100-120目，5g，内径为10～15mm)上，用40%甲醇200mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次20mL，弃去水液，正丁醇蒸干，残渣加甲醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。

2.2 对照品溶液的制备

2.2.1 龙胆 取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成每lmL含lmg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2 浙贝母 取贝母素甲对照品适量，加三氯甲烷制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.3 狼毒 取狼毒对照药材0.5g，按供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。

2.2.4 黄芪 取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 阴性样品的制备 以取缺该味药材的其他中药饮片依照处方和制法制得膏滋，按照供试品溶液的制备方法分别制得4种阴性样品溶液。

2.4 薄层检识

2.4.1 龙胆 吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(20∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品相应斑点位置处，显相同颜色的斑点，而阴性样品在相应位置上无相应斑点。如图1所示。

2.4.2 浙贝母 吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(17∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品相应斑点位置处，显相同颜色的斑点，而阴性样品在相应位置上无相应斑点。如图2所示。

2.4.3 狼毒 吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新配的醋酐-浓硫酸(1∶1)溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材相应斑点位置处，显相同颜色的斑点，而阴性样品在相应位置上无相应斑点。如图3所示。

2.4.4 黄芪 吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品相应斑点位置处，显相同颜色的斑点，而阴性样品在相应位置上无相应斑点。如图4所示。

3 讨论

3.1 实验条件优化 4种药材的薄层鉴别均参考了药典中单味药材的鉴别方法[8]，而根据复方制剂的复杂性，各组方含量低的特点，笔者对最终的薄层方法进行了一定的优化，以达到鉴别的最佳效果。龙胆的鉴别，展开剂的比例进行了调整，原方法乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶1)，调整为乙酸乙酯-甲醇-水(20∶2∶1)，调整后斑点的位置更为合理；浙贝母的鉴别，药典中采用贝母素甲和贝母素乙2种成分的混合对照进行薄层鉴别，考虑到浙贝母中的贝母素甲的含量约为贝母素乙的2倍，结合本方的复杂性，实验简化了方法，单用贝母素甲来鉴别，得到了比较稳定的结果；狼毒的鉴别，回流提取前增加了氨水浸泡过夜的操作，展开剂由环己烷-乙酸乙酯(8.5∶1.5)，调整为正己烷-乙酸乙酯(9∶1)，喷以10%硫酸乙醇溶液在365nm紫外光下检视，调整为喷以新配的醋酐-浓硫酸(1∶1)溶液在日光下检视，调整后斑点更为清晰；黄芪的鉴别，以简易的超声提取代替了回流操作，展开剂由三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)，调整为正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)，调整后的方法鉴别效果良好。

3.2 对玄参、夏枯草的条件优化探索 研究计划加入组方中君药玄参和夏枯草的薄层鉴别，其中玄参以哈巴俄苷为对照，夏枯草以迷迭香酸为对照。玄参按药典方法先采用甲醇超声提取，然后水饱和正丁醇提取2次，蒸干后甲醇定容，以三氯甲烷-甲醇-水(12∶4∶1)为展开剂，展开晾干后，喷以5%香草醛硫酸溶液显色。实验中样品在对照品相应位置没有明显斑点，对展开剂进行调整后，结果仍不理想，未列入新标准中。夏枯草按药典方法采用70%乙醇提取，用环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲酸(15∶3∶3.5∶0.5)展开，在紫外光(365nm)下检视。样品在对照品相应位置没有明显的斑点。后加入了AB-8大孔树脂富集纯化，实验结果仍不理想，未列入新标准中。

综上，扶正平消胶囊的薄层鉴别研究结果显示，君药黄芪和龙胆，臣药浙贝母，毒性药材狼毒的供试品与对照品在相应位置均显同色斑点，可以纳入新的质量标准。本研究建立的扶正平消胶囊薄层鉴别方法，简便易行，可为该制剂的质量控制提供科学的依据。

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[3]张玉军，胡同春，王玉强，等．中药组方联合化疗治疗中晚期原发性肝癌的临床研究[J]．中国药物与临床，2012，12(4): 474-475.

[4]赵亮，田文君，吕磊，等．HPLC-TOF/MS对中药复方扶正平消胶囊化学成分的鉴别[J]．第二军医大学学报，2012，33(7): 770-779.[5]吕磊，李玲，田文君，等．中药复方扶正平消胶囊挥发油成分的GC-MS分析[J]．药学实践杂志，2012，30(5): 353-356.

[6]姚成香，刘慧．中药合剂的质量标准研究进展[J]．海峡药学，2016，28(5): 45-46.

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[8]国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[M]．北京：中国医药科技出版社，2015.

Research on TLC Identification of Fuzhengpingxiao Capsule

ZHOU Jin ZHAO Liang ZHOU Changrui LI Yang WANG Hui LV Lei*

Department of Pharmacy, Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital, Shanghai 200438,China

Objective The study was aimed to establish a thin layer chromatography (TLC) method to improve quality standard of FuZhengPingXiao capsule. Methods The optimized method was based on the TLC method of single prescription in Pharmacopoeia, and applied to Radix Astragali and Radix Gentianae (monarch drug), Bulbus Fritillariae Thunbergii (official medicine), Stellera chamaejasme (toxic herb). Results The TLC identification of four species from the prescription showed that the spots of the test samples were clear and consistent with the control ones. They can be incorporated into the new quality standards. Conclusion The TLC identification method established by our study is simple and feasible, which can provide scientific basis for the quality control of the preparation.

Fuzhengpingxiao Capsule; Quality Standard; TLC Identification

军队医疗机构制剂标准单品种研究-扶正平消胶囊标准研究(NO：14TG0700)。

周瑾(1985-)，女，汉族，本科，药师，研究方向为临床药学。E-mail：aglie@126.com

吕磊(1984-)，男，汉族，硕士研究生，主管药师，研究方向为中药药效物质基础及体内代谢研究。E-mail：k_owen2002@126.com

R284.1

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1007-8517(2017)16-0024-03

2017-06-08 编辑：程鹏飞)