加味聚精食疗方联合电针督脉对少弱精子症大鼠内分泌的影响

陈鹏典 黎杰运 陈德宁 宁艳 刘芳 邱婷婷 尹绍锴 林婉珊

加味聚精食疗方联合电针督脉对少弱精子症大鼠内分泌的影响

陈鹏典 黎杰运 陈德宁 宁艳 刘芳 邱婷婷 尹绍锴 林婉珊

目的 探讨加味聚精食疗方联合电针督脉对少弱精子症模型大鼠内分泌的影响。方法 80只健康SD雄性大鼠, 随机分为G1、G2、G3、G4组, G1组为正常对照组, G2组为少弱精子症模型组, G3组为加味聚精食疗方治疗组, G4组为加味聚精食疗方联合电针督脉组, 每组20只。采用免疫放射法检测各组外周血睾酮(T)、促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH)水平, 并测量各组睾丸的体积及其重量。结果 G2、G3、G4组的睾丸体积均明显低于G1组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)；G2、G3组的睾丸重量、T、FSH、LH水平均明显低于G1组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)；G3、G4组的睾丸体积、重量、T、FSH、LH水平均明显高于G2组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)；G4组的睾丸体积和重量、T、FSH、LH水平均明显高于G3组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)。结论 加味聚精食疗方联合电针督脉具有协同效应, 可通过干预少弱精子症大鼠外周血T、FSH和LH水平, 复苏生殖功能, 提高其生育能力, 效果优于单纯加味聚精食疗方。

加味聚精食疗方；督脉；电针；少弱精子症；内分泌

不育症是男科临床的常见病, 也是当今全球生殖医学领域研究的热题难题。少弱精子症是导致男性不育的重要原因之一, 而各种病因引起少弱精子症的机制尚未完全阐明。前期研究［1,2］表明, 加味聚精食疗方可有效改善少弱精子症大鼠曲细精管组织结构的受损状态, 提高其附睾中的精子密度、a级精子和精子总活率(a+b+c级), 而其机制可能与上调大鼠睾丸间质细胞表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)的表达水平有关［3］。传统中医理论认为, 督脉为“阳脉之海”, 主阳主气, 可能通过温煦作用来调节精子成熟和促进其生精功能。本研究通过加味聚精食疗方联合电针督脉对模型大鼠进行干预, 旨在观察其外周血性激素水平的改变, 为未来针药结合治疗少弱精子症提供前沿的思路和研究基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物 本研究动物为健康S D雄性大鼠, 共80只,来源于广东省医学实验动物中心, 体重约200 g。将80只大鼠随机分为G 1、G 2、G 3、G 4组, G 1组为正常对照组, G 2组为少弱精子症模型组, G 3组为加味聚精食疗方治疗组, G 4组为加味聚精食疗方联合电针督脉组, 每组20只。

1.2 实验用药及试剂 雷公藤多苷片(远大医药黄石飞云制药有限公司, 生产批号20150617, 国药准字Z 42021212)；T、F S H和L H放射免疫分析药盒(天津九鼎医学生物工程有限公司)；加味聚精食疗方［深圳市中医院制剂室制备, 20ml/(k g·d)连续灌胃26 d］。

1.3 动物模型制备 除了G 1组外, 其他组均采用雷公藤多苷片加双蒸水配成5mg/m l的悬混液, 以悬混液20mg/k g连续给予灌胃26 d造成少弱精子症模型。G 3组给予加味聚精食疗方6.3g/kg连续灌胃治疗26 d, 1次/d。G 4组给予加味聚精食疗方6.3 g/kg连续灌胃联合电针治疗26 d, 1次/d。穴位选用督脉经穴命门、腰阳关和十七椎。采用电针仪疏密波刺激(疏波30Hz, 密波100Hz), 强度6～15 V, 以身体相应部位出现轻微颤动为准, 持续20min。

1.4 取材 受试大鼠在干预治疗26 d后称重, 股主动脉抽血, 4℃冰箱暂时保存。以5%水合氯醛腹腔注射(3ml/kg)麻醉, 剖开腹腔, 在无菌条件下快速取出大鼠双侧睾丸称重,放入盛有2ml蒸馏水的10ml量杯中, 其杯水增加容积即为睾丸体积。

1.5 检测 采用免疫放射法检测各组外周血T、FSH和L H水平, 并测量各组睾丸的体积及其重量。

1.6 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示, 采用单因素方差分析比较。对资料方差齐性进行Levene检验, 按α=0.10水准, 若方差齐, 则应用least significant difference t检验(LSD-t检验)；若方差不齐, 则应用Cochran & Cox近似t检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

G2、G3、G4组的睾丸体积均明显低于G1组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)；G2、G3组的睾丸重量、T、FSH、LH水平均明显低于G1组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)； G3、G4组的睾丸体积和重量、T、FSH、LH水平均明显高于G2组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)；G4组的睾丸体积和重量、T、FSH、LH水平均明显高于G3组, 差异均具有统计学意义(P＜0.01)。见表1。

表1 四组大鼠睾丸体积、重量以及外周血T、F S H、L H水平比较()

表1 四组大鼠睾丸体积、重量以及外周血T、F S H、L H水平比较()

注：与G 1组比较,aP＜0.01；与G 2组比较,bP＜0.01；与G 3组比较,cP＜0.01

组别 只数睾丸体积(m l)睾丸重量(g)T(n m o l/L)F S H(U/L)L H(U/L) G 1组203.66±0.213.61±0.2125.23±2.745.59±0.515.50±0.57 G 2组202.10±0.17a2.13±0.23a11.21±0.54a2.52±0.44a2.52±0.31aG 3组20 2.74±0.13ab3.07±0.18ab20.75±1.34ab4.42±0.48ab4.56±0.53abG 4组20 3.36±0.18abc3.48±0.11bc24.70±2.62bc5.64±0.45bc5.70±0.37bc

3 讨论

目前, 发达国家约有5%～8%的夫妇受到不育症的影响,发展中国家一些地区不育症的患病率高达30%［4］。少弱精子症是导致男性不育的重要原因之一, 而各种病因引起少弱精子症的机制尚未完全阐明。近年来研究显示, 男性精液质量随不同年代急剧下降, 不但给患者造成极大的心理压力和创伤, 甚至会影响到婚姻、家庭和社会等方面［5］。

加味聚精食疗方的组成部分主要包括鱼鳔、龟板胶、枸杞、人参和瘦猪肉, 选药精炼, 组方严谨, 脾肾同治, 药食结合, 口感颇佳［6-9］。督脉起于胞中, 下出会阴, 为生命之所系, 一身元气之所在［10］。临床上, 督脉经穴如命门、腰阳关、十七椎等治疗不育症也多用医家涉腊。从西医生理学和解剖学角度上看, 以上三穴都位于腰骶部, 骶丛神经分布较为丰富, 深部是脊髓中枢。针刺以上穴位可能通过刺激脊神经中枢而作用于丘脑下部-垂体-睾丸轴, 促进其对性腺激素的产生和调节, 从而通过干预性激素的释放而改善精子质量。

综上所述, 加味聚精食疗方联合电针督脉具有协同效应,可通过干预少弱精子症大鼠外周血T、FSH和LH水平, 复苏生殖功能, 提高其生育能力, 且效果优于单纯加味聚精食疗方。

［1］ 陈慰填, 陈德宁, 覃湛, 等.加味聚精食疗汤对少精弱精症大鼠曲细精管结构改善的实验研究.辽宁中医药大学学报, 2009(9):178-180.

［2］ 陈慰填, 陈德宁, 覃湛, 等.加味聚精食疗汤对少精、弱精症大鼠附睾中精子质量影响的实验研究.新中医, 2009(4):96-98.

［3］ 陈德宁, 洪志明, 周文彬, 等.加味聚精食疗方对少、弱精子症大鼠EGF、EGFR睾丸内表达的影响.世界中西医结合杂志, 2011, 6(11):940-943.

［4］ Kleiman SE, Almog R, Yogev L, et al.Screening for partial AZFa microdeletions in the Y chromosome of infertile men: is it of clinical relevance? Journal of Urology, 2012, 98(1):43-47.

［5］ Abolfotouh MA, Alabdrabalnabi AA, Albacker RB, et al.Knowledge, attitude, and practices of infertility among Saudi couples.International Journal of General Medicine, 2013, 6(default):563-573.

［6］ 陈德宁, 覃湛, 马庆辉, 等.加味聚精食疗方对少精子症患者精子质量的影响.南京中医药大学学报, 2007, 23(3):184-185.

［7］ 洪志明.加味聚精食疗方治疗脾肾两虚型少精子症的临床及实验研究.广州中医药大学, 2010.

［8］ 任晓艳, 洪志明, 洪金标, 等.加味聚精食疗方配合护理干预对少弱精子症病人的影响.护理研究, 2013, 27(17):1732-1733.

［9］ 洪志明, 陈德宁, 王全, 等.加味聚精食疗方对DS动物模型精子质量及睾丸组织中CR16表达的影响.中华中医药学刊, 2015(11):2690-2693.

［10］ 陈鹏典, 杨卓欣, 黎杰运, 等.任督脉与孕育的相关性探析.中国民族民间医药, 2016, 25(13):49-50.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.16.115

2017-06-05］

深圳市科技计划基础研究项目(项目编号：JCYJ20150402090413003)

518028 深圳市妇幼保健院(陈鹏典 宁艳 刘芳邱婷婷)；北京大学深圳医院(黎杰运)；广州中医药大学附属深圳市中医院(陈德宁 尹绍锴 林婉珊)

黎杰运