冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器堵塞处理对策的研究

熊惠连，熊烜俊，王晓华

（赣州市中心血站成分科，江西赣州341000）

冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器堵塞处理对策的研究

熊惠连，熊烜俊，王晓华

（赣州市中心血站成分科，江西赣州341000）

目的解决冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器堵塞的处理问题。方法当冷上清亚行甲蓝光化学病毒灭活发生滤器堵塞时，可用“一次性使用输血器”的过滤器，采用无菌接管技术将其连接在“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的的上方。冷上清通过输血器的过滤后，已经滤除了造成堵塞的冷不溶解物质等，再经过滤器，滤除亚甲蓝后自然流入血浆储存袋，制备成去冷沉淀病毒灭活冰冻血浆，并留取标本，检测血浆蛋白含量和亚甲蓝的残留量与随机抽取的病毒灭活冰冻血浆（各20份）进行差异性比较。结果血浆蛋白含量和亚甲蓝残留量差异比较，两组间差异无统计学意义（t=0.533、0.327，P＞0.05）。结论冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时，连接一个“一次性使用输血器”的过滤器，可以滤除造成堵塞的冷不溶解物质等，避免冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器发生堵塞，且不会影响血浆质量。

冷上清；亚甲蓝；病毒灭活；滤器堵塞处理；血浆蛋白；亚甲蓝残留

亚甲蓝光化学血浆病毒灭活是利用光敏剂-亚甲蓝能与病毒结合的特性，对血浆病毒进行灭活，并经过过滤有效地去除血浆中残存的白细胞，提高病毒灭活血浆的安全性,能有效地控制血浆引起的病毒传播性疾病的发生率[1]。赣州市中心血站于2009年开始使用血浆病毒灭活技术，对血浆进行亚甲蓝病毒灭活（除预制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆外）。本站成分科在使用“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”对冷上清（新鲜冰冻血浆制作冷沉淀后的上清液，又称去冷沉淀血浆）进行病毒灭活时，大约有6%的冷上清在经过滤器时发生堵塞，不能自然流入血浆储存袋，造成血浆报废。现就针对这一问题，我们对“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”进行了改进，解决了冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器堵塞的困难，并且显示出良好的推广和应用价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 对象随机选取2016年1月以来亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器发生堵塞的去冷沉淀病毒灭活冰冻血浆和病毒灭活冰冻血浆各20袋，并分别留取标本20份，根据《GB18469-2012全血及成分血质量要求》按照病毒灭活冰冻血浆质量控制项目和要求进行检测。

1.2 材料和仪器一次性使用病毒灭活输血过滤器材（上海输血技术有限公司），主要由无菌插袋针、亚甲蓝添加元件、光照袋、病毒灭活过滤吸附部件（简称滤器）和血浆储存袋组成，见图1；一次性使用输血器的过滤器（江西洪达医疗器械集团有限公司），见图2；无菌接管机（CompoDock）。

图1 一次性使用病毒灭活输血过滤器材（左图）

图2 一次性使用输血器的过滤器（右图）

1.3 制备方法将“一次性使用输血器”的过滤器使用无菌接管技术连接在“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的滤器的上方（见图3、图4），对发生堵塞的冷上清进行过滤。冷上清通过输血器的过滤器后，已经滤除了造成堵塞的冷不溶解物质等。再经过滤器，均能自然流入血浆储存袋。

图3 输液系统组成

图4 输液设备组成

1.4 检测方法血浆蛋白含量的检测应用双缩脲法，采用全自动生化分析仪测定，严格按照试剂和仪器使用说明书的要求操作；亚甲蓝的残留量采用固相萃取法检测。

1.5 统计学方法计量资料以“x±s”表示，采用配对t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

去冷沉淀病毒灭活冰冻血浆和病毒灭活冰冻血浆血浆蛋白含量与亚甲蓝残留量比较差异均无统计学意义。见表1。

表1 去冷沉淀病毒灭活冰冻血浆和病毒灭活冰冻血浆质量指标的比较（x±s）

3 讨论

冷上清为新鲜冰冻血浆中分离出冷沉淀凝血因子后剩余的血浆[2]。冷沉淀凝血因子是将保存期内的新鲜冰冻血浆，在1℃～6℃封闭状态融化后，在1℃～6℃无菌条件下分离出沉淀在血浆中的冷不溶解物质并在1 h内冻结而制成的成分血[3]。在制备过程中，难免有一些少量的冷不溶解物质(冷沉淀）残留在冷上清里，出现沉淀物[4]。

因此，本站成分科在使用“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”对冷上清进行病毒灭活时，约有6%冷上清在经过滤器时发生堵塞，不能自然流入血浆储存袋，造成血浆报废。

“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的滤器是用于光化学灭活血浆病毒后吸附其添加的光敏剂和滤除白细胞[5-6]。白细胞滤器过滤属于纵深过滤方式，过滤的基本原理主要包括阻塞、架桥、拦截和粘附等。白细胞难于通过小于5μm的孔径[7]。因此“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的滤器的孔径为小于5μm，所以，残留有冷不溶解物质的冷上清流经滤器时容易造成堵塞。而“一次性使用输血器”的过滤器为是一种安装于输血器滴斗内的筛网式滤网，其孔径约为170μm,过滤面积为24～34 cm2，可以滤除血液和血液成分制品中可能存在的聚集的血小板、白细胞和纤维蛋白[8]。冷上清通过输血器的过滤器后，已经滤除了造成堵塞的冷不溶解物质等。所以，冷上清再经过滤器，均能自然流入血浆储存袋。

对发生堵塞的去冷沉淀病毒灭活冰冻血浆和病毒灭活冰冻血浆质量指标（血浆蛋白含量和亚甲蓝的残留量）的差异进行比较，冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时连接一个“一次性使用输血器”的过滤器，对血浆质量指标没有影响。

综上所述，我们在“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的滤器的上方用无菌接管技术连接了输血器的过滤器后，已经滤除了造成堵塞的冷不溶解物质等，可以解决冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器堵塞的问题。但是，使用无菌导管连接器连接成本较高，如果厂家在生产“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的时候，在滤器的上方，增加一个输血器过滤器；或者在“一次性使用病毒灭活输血过滤器材”的无菌插袋针的下方，亚甲蓝添加元件的上方增加一个输血器过滤器，也就是让冷上清在添加亚甲蓝并进行光照病毒灭活之前先将造成堵塞的冷不溶解物质等滤除。这样就可以从根本上解决冷上清行亚甲蓝光化学病毒灭活时滤器堵塞的问题，避免了血液资源的浪费。而且因为批量生产费用低廉，基本上不会增加较多成本，该项目将产生良好的社会效益和经济效益，本研究认为觉得非常有必要推广。

[1]王培华.输血技术学[M].北京：人民卫生出版社，2002：272.

[2]田兆嵩.临床输血学[M].北京：人民卫生出版社，2002：20.

[3]王超英.亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆成分及白细胞残留量的影响[J].临床输血与检验,2014,16(3)：290-292.

[4]曹丽群,胡桂兰.亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆袋及其照射柜的血浆HBV病毒灭活效果[J].中外健康文摘,2011,8(37)：118-119.

[5]肖瑞卿,隆晓秋,刘风君,等.亚甲蓝光化学照射法可降低血浆IgM抗-A抗-B血型抗体效价[J].重庆医学,2010,39(23)：3252-3253.

[6]马春黎,宋静.血浆病毒灭活的临床应用与安全输血[J].中国当代医药,2011,18(13)：165.

[7]肖乐宇,李建伟,任红霞,等.白细胞过滤及病毒灭活对血浆主要成分的影响[J].现代预防医学,2014,41(13)：2435-2436.

[8]张淑琴,温涛,赵君.病毒灭活血浆亚甲蓝及凝血因子的质量控制[J].中国误诊学杂志,2010,10(15)：3617-3618.

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.23.036

赣州市指导性科技计划（GZ2016ZSF244)