不同病程尖锐湿疣患者HPV感染与T细胞亚群表达情况的关系

李伟权，陈宏辉，周秀莲，胡婷（广东省粤北人民医院，韶关512026）

不同病程尖锐湿疣患者HPV感染与T细胞亚群表达情况的关系

李伟权，陈宏辉，周秀莲，胡婷
（广东省粤北人民医院，韶关512026）

目的 探讨不同病程尖锐湿疣（CA）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染与T细胞亚群表达情况的关系。方法 选择2012年1月—2015年2月我院收治的151例CA患者，根据病程长短分为A、B组，A组病程≤3个月，B组病程＞3个月，A组97例，B组54例，另选同期体检健康的51例作为对照组。采集3组患者外周血，并使用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群的表达情况。取脱落疣体细胞，并使用核酸快速杂交分型法检测HPV-DNA。结果 B组患者CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于A组和对照组，CD8+水平显著高于对照组及A组患者，差异均有统计学意义（P＜0．05）。HPV阳性患者151例，其中包括单纯HPV6/11+、HPV16/18+型感染各45例、49例，HPV6/11、16/18+混合型感染57例。HPV6/11+、HPV16/18+、（HPV6/11+、16/18+）各组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于健康组，差异有统计学意义（P＜0．05）；而3组间CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较，差异均无统计学意义（P＜0．05）。结论 病程3个月以上CA患者细胞免疫功能明显降低，且各型HPV感染患者细胞免疫功能差异无统计学意义。

病程；尖锐湿疣；人乳头状瘤病毒；T细胞亚群

尖锐湿疣（CA）为是一种由人乳头瘤病毒（HPV）感染所引起的性传播疾病，临床表现为外生殖器、阴道、肛周等部位皮肤黏膜乳头瘤样增生，因此又称为生殖器疣或性病疣[1]。CA发病率较高，多数患者呈HPV亚临床或潜伏感染阶段，且多型HPV感染发生率较高。其中高危型HPV感染可诱导疣体皮损角质形成细胞的异常增生，甚至发生癌变。CA为病毒性感染疾病，其临床治疗复发率较高，且有研究认为复发率高的主要原因为细胞免疫功能的下降[2]。为了探讨不同病程的CA患者的细胞免疫功能变化及与HPV感染型的相关性，本研究对本院收集不同病程CA患者的T细胞亚群及HPV感染型进行分析，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月—2015年2月我院收治的151例CA患者，其中男89例，女62例，年龄21～53岁，平均（32.27±3.48）岁；病程2周～ 23个月，平均（5.51±1.94）个月。根据病程长短分为A、B组，A组病程≤3个月，B组病程＞3个月。A组患者97例，其中男58例，女39例，年龄21～51岁，平均（30.75±4.06）岁；病程2周～3个月，平均（1.14± 0.22）个月。B组患者54例，其中男31例，女23例，年龄21～53岁，平均31.42±3.86岁；病程3～23个月，平均（6.79±2.18）个月。选择51例在我院同期体检的健康人员作为对照组，其中男29例，女22例，年龄20～52岁，平均（31.64±4.07）岁。对照组与CA组患者一般资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。CA诊断标准采用卫计委防疫司制定的CA诊断标准，排除自身免疫性疾病及重疾患者，该研究通过医院伦理委员会审查，患者均签署知情同意书。

1.2 方法 ①分别采集3组患者肘静脉血2mL于抗凝管中，外周血转入检测管，并滴加适量的CD3+PerCP/CD4+FITC/CD8+PE三色抗体，混匀后孵育，FACSLysing红细胞裂解液处理，离心弃上清，采用FACSCalibur流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群情况，Cellquest软件分析结果。②取术中患者的脱落组织，收集于无菌离心管中，参照核酸快速杂交分型试剂盒提取HPV-DNA并进行结果判定。

1.3 统计学分析 数据均采用SPSS17.0统计分析，计量资料采用方差分析，以均值±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同病程CA患者T细胞亚群分布情况分析 对A组、B组及对照组患者的外周血T淋巴细胞亚群进行比较，结果显示A、B组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于对照组，而CD8+高于对照组；B组患者CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于A组和对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；而B组患者CD8+水平显著高于对照组及A组患者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 CA患者HPV分型情况及其T细胞亚群表达情况分析 HPV分型结果显示，HPV阳性患者151例，其中包括单纯HPV6/11+、HPV16/18+型感染各45例、49例，HPV6/11、16/18+混合型感染57例。对HPV6/11+、HPV16/18+、（HPV6/11+16/18+）、健康组患者的外周血T淋巴细胞亚群分布进行比较，结果显示，各组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于健康组，差异有统计学意义（P＜0.05）；而3组间CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比较，差异均无统计学意义（P＜0.05），见表2。

表1 3组患者外周血T淋巴细胞亚群分布情况比较（±s，%）

表1 3组患者外周血T淋巴细胞亚群分布情况比较（±s，%）

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表2 不同HPV型CA患者外周血T淋巴细胞亚群分布情况比较 （±s，%）

表2 不同HPV型CA患者外周血T淋巴细胞亚群分布情况比较 （±s，%）

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3 讨论

HPV病毒基因型较多，根据感染频率及严重程度基本可分为低危型和高危型，目前针对HPV致CA的临床治疗策略主要包括疣体去除及复发预防，但尚无可彻底根除HPV的疗法[3]。国内外研究均表明，CA的发生与转归与患者细胞免疫功能的改变密切相关，其中T淋巴细胞作为细胞免疫的效应细胞，其亚群表达水平间的动态平衡是机体发生免疫监视及防御的前提，T细胞亚群失衡导致HPV病毒的入侵[4]。研究不同病程CA患者T淋巴细胞亚群的分布情况及其与HPV分型的相关性，有利于阐明HPV感染型、病程与细胞免疫功能的关系。

本研究结果显示，CA组患者CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+均低于健康组，而CD8+高于健康组，提示CA可能导致机体细胞免疫功能的下降，与张东兴等[5]报道结果一致。作用机制可能为，CD4+细胞水平降低导致IL-2、IL-3等细胞因子表达减少，巨噬细胞及杀伤性细胞活化受抑制，CD8+细胞增多能够抑制淋巴细胞的活化，而从而影响机体的细胞免疫功能的抗病毒能力，为HPV的发生及发展提供了条件[6]。研究结果又发现，B组患者CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于A组和对照组，而CD8+水平显著高于对照组及A组患者，提示随着病程的延长，CA患者细胞免疫功能下降明显，通过T细胞亚群的异常表达改变了T细胞亚群的动态平衡，有利于HPV病毒的发生发展。种树彬等[7]研究显示随着CA皮损的消退，CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+值均明显升高，提示皮损消退时细胞免疫功能的恢复。胡雅玉等[8]研究显示CA病程的延长，导致机体免疫功能下降越显著，病程大于3个月的患者T细胞亚群表达变化较3个月内患者更明显，报道结果均与本研究结果一致。HPV阳性患者151例，其中包括单纯HPV6/ 11+、HPV16/18+型感染各45例、49例，HPV6/11、16/ 18+混合型感染57例。对HPV6/11+、HPV16/18+、（HPV6/11+16/18+）、健康组患者的外周血T淋巴细胞亚群分布进行比较，各型HPV感染组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于健康组，但各组间CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比较差异无统计学意义（P＞0.05），提示CA患者发生细胞免疫功能抑制程度可能与HPV感染型无明显相关性，与文献[9-10]报道结果一致。

综上所述，CA患者细胞免疫功能降低，且随着病程延长，其下降程度更明显；不同HPV感染型可能与细胞免疫功能的抑制程度无明显关系。

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Relationship Between HPV Infection and The Expression of T Cell Subsets in Condyloma Acum inata Patients at Different Courses

LiWeiquan,Chen Honghui,Zhou Xiulian,Hu Ting
YuebeiPeople's Hospital in Guangdong Province,Shaoguan 512026,China

Objective In order to study the relationship between human papillomavirus(HPV)infection and the expression of T cellsubsets in condyloma acuminata(CA)patientsatdifferent courses．M ethods A totalof151 casesof patientswith CA were collected in our hospital from January 2012 to February 2015．According to the course,all caseswere divided into group A including 97 cases(≤3months)and group B including 54 cases(＞3months),and 51 cases of the same physicalhealthy people were chosen as control group．The flow cytometry was used to detect the expression of T lymphocyte subsets of peripheralblood of three groups,and the nucleic acid hybrid classificationmethod of fastdetection was used to detectHPVDNA of cells．Results CD4+,CD4+/CD8+ofgroup Bwere significantly lower than those ofgroup A and controlgroup,while CD8+were significantly higher．Therewere statisticalsignificantdifferences among three groups(P＜0．05)．Allof151 patients were detected to be HPV positive,including pure HPV6/11+,HPV16/18+various infection with 45 and 49 cases,HPV6/11/ 18+mixed infection with 57 cases．CD3+,CD4+,CD8+and CD4+/CD8+levelsof these three groupswere lower than the healthy group,the differenceswere statistically significant(P＜0．05)．Therewere no statistically significantdifferences on comparison with CD3+,CD4+,CD8+and CD4+/CD8+levelsamong threegroups(P＜0．05)．Conclusion Cellular immune function decreases obviously in patientswith genitalwartswith course of threemonths ormore,and no significant differences are observed on cellular immune function in patientswith variousHPV infection．

Course;Condylomaacuminatum;Human papillomavirus;Tcellsubgroup

R752．5+3

：A

：1672-0709（2017）03-0230-03

2016-08-26）