Notch1信号通道在HER-2过表达乳腺癌细胞曲妥珠单抗（赫赛汀）耐药机制中的研究

刘云聪，吴 莉，祝 婕

（贵州省人民医院肿瘤科，贵州 贵阳 550002）

赫赛汀(曲妥珠单抗,Herceptin)是第一个抗HER-2/neu 的人源化单克隆抗体，用来治疗HER-2过表达的乳腺癌患者，其功效独特。然而，其具有应用单药客观有效率低，初始治疗有效者多于1年内出现耐药。Notch1信号通路为Ras通路的下游靶标，过度激活Ras信号能够促进表达Notch-1，因此在肿瘤生成时Notch信号可有效激活Ras通道，能够和Ras通道实现正反馈调控。

1 赫赛汀的耐药机制

1.1 空间结构改变相关的耐药

（1）一些细胞表面粘蛋白如 MUC4影响受体与抗体的有效结合。

（2）c-erbB2 基因突变导致耐药。

1.2 信号通路相关的耐药是目前研究更为广泛的耐药机制

（1）通过EGFR家族受体提高下游信号通道活性。在存在配基的条件下，ErbB3等家族成员和EGFR间能够经同源/异源二聚化激活MAPK及PI3K-AKT等下游信号通道，此外，浓度较高的配基可促进ErbB2与ErbB3、EGFR结合并提高其活性。

（2）激活胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)等因子提高其他受体通道活性，通常情况下，在乳腺细胞的生长发育及凋亡过程中，生长激素－胰岛素样生长因子I轴(GHIGF-Iaxis)具有重要的调节作用，且活化水平较高的IGF-IR和乳腺癌细胞增殖、转移关系密切。

（3）活性逐渐增强的MAPK及PI3K-AKT信号通道。酪氨酸激酶为生长因子受体，其活性持续提高后需经MAPK信号通道提高细胞增殖水平，以及PI3K-AKT信号通道对细胞生存及迁移进行调节。资料显示，在耐曲妥珠单抗细胞株内，MAPK及PI3K-AKT信号通道活性持续提高，致使曲妥珠单抗丧失抑制细胞生长及凋亡的能力。

（4）酪氨酸激酶是ErbB2受体，具有反馈抑制物的功能，该功能失调可影响相关信号通道，致使信号通道异常。研究证明，EGFR类受体信号通道既可提高下游MAPK及PI3K信号通道，又可提高编码RTK反馈抑制物相关基因的活性，促进反馈抑制物生成，并抑制相关受体的活性，达到调节受体活性的目的。

2 Notch1与乳腺癌

2.1 Notch1高表达与乳腺癌侵袭强有关

逯翀等[1]发现Notch1高表达的MCF-7/ADR的穿膜细胞数明显高于MCF-7，Notch1的mRNA与蛋白的表达水平与乳腺癌迁移能力正相关，提示Notch1信号通路可能参与调控乳腺癌细胞的侵袭与转移。

2.2 Notch1抑制乳腺癌细胞的凋亡

Mao等分析用Notch1-shRNA-4转染后的MCF-7细胞的Notch1、NF-κB、Caspase-3蛋白表达水平，发现Notch1与NF-κB蛋白表达量明显降低，Caspase-3的蛋白表达明显升高，进而促进了细胞的凋亡。提示通过抑制Notch1可以诱导Caspase-3的表达，可能与细胞凋亡有关[2]。

2.3 Notch1在乳腺癌干细胞中发挥重要作用

（1）Notch1的表达影响乳腺癌干细胞的数量。Peng等发现乳腺癌干细胞球体数减少，乳腺癌干细胞的比例减少。

（2）Notch1是维持乳腺癌干细胞恶性表型的重要因子。Notch1过表达可使乳腺癌细胞表现出干细胞类似的特性。Notch1信号与乳腺癌干细胞（CSCs）的自我更新和分化及其恶性行为有关。

3 乳腺癌的耐药与Notch1

3.1 研究证明，在耐药乳腺癌细胞中，Notch1表达水平显著升高

逯翀等[3]证明耐阿霉素乳腺癌细胞内Notch1m RNA及Notch1蛋白水平均明显高于非耐药细胞株。赵丽等发现Notch1的表达水平越高，肿瘤细胞耐紫杉醇药的比例也越高。故肿瘤细胞耐阿霉素、紫杉醇水平和Notch1密切相关。

3.2 抑制Notch1表达可逆转乳腺癌的耐药

Rizzo等证实，通过γ-分泌酶抑制剂或siRNA抑制Notch-1活性能够提高乳腺癌细胞抵抗他莫昔芬的能力。Notch-1信号通路在乳腺癌中具有促癌作用。资料显示，较多的肿瘤细胞产生通道与Notch-1信号通道相互影响，在过表达HER-2的乳腺癌细胞内，HER-2能够结合Notch-1，避免Notch-l配体和其受体相结合，避免生成Notch-1IC相关蛋白。作为HER-2单克隆抗体，赫赛汀能够竞争性结合HER-2，并生成Notch-1，激活Notch-l通道。Notch-l可NF-KB、cyclineD、RAS等途径干预肿瘤细胞，促进其增殖与凋亡。综上所述，Notch-1信号通道可认为是乳腺癌细胞耐赫赛汀的重要基础。

[1]逯 翀,刘春萍,赵向旺,等.Notch1表达与乳腺癌细胞迁移及侵袭能力的相关性[J].华中科技大学学报:医学版,2012,41(6):647-649.

[2]毛 俊,牟秋菊,李连宏,等.RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响[J].临床与实验病理学杂志,2012,28(1):11-14.

[3]逯 翀,刘春萍,赵向旺,等.Notch1在人乳腺癌细胞中的表达及其与乳腺癌耐药的关系[J].中华实验外科杂志,2012,29(5):818-820.