生物活性肽胶囊对实验小鼠增强免疫力功能的影响

朱 哲，骞秀芳，王 惠，李 灿

（武警北京总队第二医院，北京 100037）

生物活性肽胶囊对实验小鼠增强免疫力功能的影响

朱 哲，骞秀芳，王 惠，李 灿

（武警北京总队第二医院，北京 100037）

目的 分析生物活性肽胶囊对实验小鼠增强免疫力功能的影响，评价生物学活性肽的价值。方法 取实验小鼠随机分为5个单组，各10只，小剂量组、中剂量组、高剂量组、空白对照组、阳性对照组，均灌服1粒胶囊，1日1次。胶囊内分别装有性肽内容物100 mg/（kg·d）、200 mg/（kg·d）、400 mg/（kg·d、蒸馏水10 mL/（kg·d）、维生素C400 mg（kg·d），连续给药10日。末次灌药后处死进行试验。结果 五组肝脏指数、脾脏指数、抗体生成水平、单核一巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率多组间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；高剂量组、阳性对照组肝脏指数、脾脏指数、单核-巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率高于空白对照组、低剂量组、中剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。小剂量组与中剂量组抗体生成水平、单核一巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。中剂量组抗体生存水平高于小剂量、高剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 生物活性肽胶囊可增强实验小鼠增强免疫力，但对部分免疫功能存在剂量依赖、上限。

免疫功能；生物活性肽；小鼠；动物实验

生物活性肽是一种很强生物活性与生理功能的一类化合物，具有抗菌、抗氧化功能、血血压调节等作用[1]。本次研究试采用动物实验，分析生物活性肽胶囊对实验小鼠增强免疫力功能的影响。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

SPF级雄性小鼠，数量不限，6～8周龄，体重18～22 g，由实验动物中心提供。常规不锈钢笼饲养，采用标准啮齿类动物干燥饲料喂养2周。自由摄食饮水，温度控制在20℃～25℃，相对湿度40%～60%。

1.2 仪器与试剂

生物活性肽胶囊，自制，内容物为由内外原性原料蛋白混合获得，主要材料为动物皮，采用甲醇提取法提取获得。主要材料，RPMI1640细胞培养液，小牛血清，2-疏基乙醇，谷氨酰胺，链霉素，盐酸，异丙醇，MTT，二甲基亚砜，琼脂糖，肝素，碳酸氢钠溶液，生理盐水等、。仪器包括旋转蒸发仪，冷冻干燥剂，722行分光光度计，-80℃超低温冰箱，-4℃冰箱，电子分析天平，酶标仪，细胞计数板，水浴箱，显微镜等。

1.3 试验方法

1.3.1 分组与给药

取实验小鼠（20±2），随机分为5个单组，各10只。小剂量组：生物活性肽低剂量，1粒胶囊，按照体重计算，含生物活性肽内容物100 mg/（kg·d）。中剂量组：生物活性肽中剂量，1粒，含生物活性肽内容物200 mg/（kg·d）。高剂量组：生物活性肽高剂量，1粒胶囊，含生物活性肽内容物400 mg/（kg·d）。正常对照组：单纯有胶囊衣，灌入蒸馏水，10 mL/（kg·d）。阳性对照组：在胶囊内置入维生素C，400 mg（kg·d）。连续给药10日。

1.3.2 检验

末次给药24 h，称量体重，脱颈法猝死，取胸腺、脾脏，去掉血迹，沉重，计算胸腺、脾脏指数。同时进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验（MTT）、小鼠碳廓清试验、抗体生成实验试验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞（CRBC）实验（半体内法）、NK细胞活性。

1.5 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以“±s”表示，采用t检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

五组肝脏指数、脾脏指数、抗体生成水平、单核-巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率多组间比较，差异有统计学意义（P＜0.05），高剂量组、阳性对照组肝脏指数、脾脏指数、单核一巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率高于空白对照组、低剂量组、中剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。小剂量组与中剂量组抗体生成水平、单核一巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。中剂量组抗体生存水平高于小剂量、高剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 五组肝脏指数、脾脏指数、抗体生成水平、单核一巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率对比（±s）

表1 五组肝脏指数、脾脏指数、抗体生成水平、单核一巨噬细胞的吞噬指数、NK激活率对比（±s）

注：与空白对照组相比，*P＜0.05；与剂量组相比，aP＜0.05；与中剂量组相比，bP＜0.05

组别（n=10） 肝脏指数 脾脏指数 抗体生成（106） 单核-巨噬细胞的吞噬指数 NK激活率（%）空白对照组 0.013±0.011 0.31±0.05 20.12±2.53 0.51±0.14 55.14±8.56小剂量组 0.013±0.005 0.32±0.08 44.10±4.73* 0.60±0.15* 60.53±7.24*中剂量组 0.013±0.004 0.32±0.05 48.75±5.14*a 0.64±0.16* 67.23±11.43*a高剂量组 0.024±0.010*b 0.46±0.07*b 44.83±4.32*b 0.83±0.22*ab 77.43±12.31*b阳性对照组 0.020±0.004* 0.40±0.05* 49.10±3.72* 0.85±0.22* 66.59±9.31*

3 讨 论

生物活性肽在改善抗体生成方面存在明显的剂量上限，中剂量组便达到峰值，接近维生素C[2]。小剂量、高剂量组单核-巨噬细胞的吞噬指数无显著差异，差异无统计学意义（P＞0.05），而高剂量显著上升，接近维生素C。高剂量NK激活率明显高于阳性对照组。

本次研究显示，生物活性肽胶囊可增强实验小鼠增强免疫力，但对部分免疫功能存在剂量依赖、上限，在改善肝脏指数、脾脏指数、NK激活率方面甚至优于同剂量维生素C。生物活性肽并非药物，但广泛存在于自然界，来源广，具有较高的经济价值，发展潜力大，今后需要开展更多的基础研究，分析生物活性肽结构、保健功能，为生物活性肽保健品的开发提供依据。

[1] 梁美艳,陈庆森.具有降低心血管疾病危险的相关生物活性肤的研究进展[J].专题论述,2009,30(19):335-340.

[2] 鲁文玉,于文静,孙德群,等.海洋生物活性肽在药物研发中的应用进展[J].有机化学,2016(37):1-26.

本文编辑：赵小龙

R967

B

ISSN.2095-8242.2017.30.5748.02

朱哲（1984-），女，河北省秦皇岛市人，本科，主管药师，研究方向：临床药学方向