影响种公猪精液品质的因素分析

王黎，张护

（1.云南省蒙自市动物卫生监督所，云南蒙自661100 2.红河州畜牧技术推广站）

影响种公猪精液品质的因素分析

王黎1，张护2

（1.云南省蒙自市动物卫生监督所，云南蒙自661100 2.红河州畜牧技术推广站）

以某猪场饲养的9头成年种公猪为研究对象，分析年龄和保存时间对种公猪精液品质的影响。结果表明随着公猪年龄的增长，采精量不断增加，18月龄左右达到顶峰；随着保存时间的延长精子活力和活率呈逐步下降趋势，而畸形率则逐步上升。

精子；活力；活率；畸形率；保存时间

猪人工授精技术是利用人工和器械方法采集公猪精液，对其进行品质检查，稀释保存等处理，再用器械把精液送到发情母猪生殖器官内，从而使其受孕的一种配种方法。猪人工授精技术最大的优点是减少群体中所需公猪的总数，增加优良公猪的利用机会。很多学者对猪人工授精在实现猪场净化、提高母猪产仔数方面给予了肯定。该试验研究了种公猪不同年龄阶段、精液保存时间长短对种公猪精液品质的影响。

1 材料与方法

1.1 供试动物

供试种猪来源于红河州某种猪场成年种公猪9头。

1.2 公猪饲养管理

公猪全部单栏饲养，自由饮水，每天人工喂料两次。按照猪场常规程序进行保健，同时定期消毒。每头公猪每周采精2次。

1.3 试验仪器与试剂

精液显微镜、可调温加热板、盖玻片、载玻片、电子秤（百分之一精度）、两根30 cm的温度计、3个2 L塑料烧杯、500 ml量筒、水浴锅、输精瓶、瓶盖、冰箱、双蒸水仪、一次性输精管、精液稀释粉、采精杯、PE手套、滤纸、卫生纸、橡皮筋。

1.4 试验方法

1.4.1 采精

10月龄以下，每周1次；10至12月龄，2 W3次；12月龄以上，每周2次；没有配种需求的公猪每周至少采精1次。

1.4.1.1 精液稀释液的配制将精液稀释粉溶解于800 ml双蒸水中，搅拌均匀后，加双蒸水定容至1 L，置于37℃水浴锅内预热1 h备用。

1.4.1.2 采精杯的制备先在保温杯内衬1只一次性采精袋，再在杯口覆盖两层采精专用滤纸，用橡皮筋固定滤纸，用干净温度计下压滤纸中心，使其中心凹陷2 cm左右，采精杯盖与杯分开放于37℃恒温箱中30 min以上备用。

1.4.1.3 采精过程将待采精公猪赶至采精栏，挤出包皮积尿，用清水清洗腹部和包皮部，吸干；采精员采取两脚一前一后，单腿蹲跪，以便在出现危险时迅速跑开；采精员按摩公猪的包皮部，待公猪爬上假畜台后，手心朝下握紧伸出的龟头（握紧“S”状弯曲第一和第二摺处，避免让公猪不舒服），顺势将公猪阴茎拉出（不可强拉）。阴茎充分伸出后，达到强直“锁定”状态，开始射精。射精过程中不要松手，否则压力减轻将导致射精中断。

1.4.1.4 精液收集清亮部分和胶体部分，不要收集；浓厚精液部分，需要完全收集；要注意避免包皮液、尿液等其他异物混入到精液中。

1.4.2 精液品质检查

精液质量检查项目主要包括：精液量、颜色、气味、精子活力、精子活率、畸形率等（整个检查过程要迅速、准确，15 min内完成）。

1.4.2.1 精液量后备公猪的射精量一般为150～200 ml，成年公猪为200～600 ml，采精后称重并测量体积。

1.4.2.2 颜色正常精液的颜色为乳白色或灰白色，凡发现精液颜色异常，均应放弃使用，同时对公猪进行检查，并对症治疗，待精液检查合格后才可使用。

1.4.2.3 气味正常的公猪精液具有特有的微腥味，无腐败恶臭气味。有特殊臭味的精液不应使用，同时对公猪进行检查，并对症治疗，待精液检查合格后才可使用。

1.4.2.4 精子活力精子活力一般采用10级制，即在10× 20/40倍显微镜下观察一个视野内做直线运动的精子数，若有90%的精子呈直线运动则其活力为0.9；有80%呈直线运动，则活力为0.8，依次类推。先将载玻片放在37℃预热的保温板上3 min，滴上1小滴精液后，盖上盖玻片，镜检，新鲜精液的精子活力低于0.7不可使用。

1.4.2.5 畸形精子畸形精子包括：头部畸形、颈部畸形、中段畸形、尾部畸形、未成熟、顶体畸形；公猪总的畸形精子率超过25%不可使用。

1.4.2.6 精子活率的测定将精液解冻后滴入血细胞计数板的计数室内，用0.9%生理盐水稀释，置显微镜下观察。统计出4个角及中央共5个中方格的非直线运动的精子数，将计数板放入120℃的干燥箱中5 min，利用高温杀死全部精子后，计数出4个角及中央共5个中方格的精子数。用公式：精子活率=（总精子数-非直线运动精子数）/总精子数，求出精子活率。

1.4.2.7 精子畸形率的测定用细玻璃棒取精液一滴，滴于载玻片一端，滴0.9%NaCl溶液，以另一载玻片的顶角呈35度，抵于精液滴上，向另一端拉去，将精液均匀涂抹于载玻片上。抹片于空气中自然干燥，之后置于酒精固定液中固定5～6 min，取出水洗后，烘干，用蓝墨水染色3～5 min，再用水冲洗，使之干燥后在显微镜下检查。查数不同视野的500精子，计算出其中所含的畸形精子数，求出畸形精子百分率。

每份经过检查的公猪精液都要填写《公猪精液品质检查记录表》。

1.4.3 精液稀释处理

精液处理尽量在恒温环境中（采精实验室的恒温管理）进行，经过品质检查后的精液和稀释液都要在37℃预热；精液采集后要尽快稀释，未经精液品质检测或检测不合格的精液不可使用。处理步骤如下：①测量精液和稀释液的温度确保稀释精液时，稀释液与精液温度一致（以精液的温度为标准来调节稀释液的温度，两者温差在1℃以内）。②精液稀释按头份计算。人工授精的正常剂量一般为40亿/头份，体积为80 ml。例如，一份公猪的原精液密度为2亿/ml，采精量为150 ml，稀释后密度要求为40亿／头份。则此公猪精液可稀释150×2/40＝7.5头份，需加稀释液80×7.5－150＝450 ml。③将采精袋转移至2 L塑料大烧杯中，将稀释液分3次沿杯壁缓缓加入精液中，每次加入后轻轻摇匀，才可再次加入。④稀释后的精液静置5 min后，再次检查精液活力。⑤按每头份80 ml分装，在分装时，需排掉瓶内空气，并在包装上贴好标签，注明公猪的品种、耳号、采精日期和采精时间段。⑥用具清洗、消毒：所有使用过的烧杯、玻璃棒、温度计及时清洗，先用清水冲洗干净后，再用蒸馏水浸润洗涤1次。⑦采精完毕后填写《公猪采精登记表》，所有采精工作结束后及时冲洗采精区。

1.4.4 精液的保存

分装好的精液应平放（可叠放），不同品种精液应分开放置并粘贴标签。需保存的精液应先在室温下放置1 h后再转入17℃冰箱中（或用几层干毛巾包好后直接放入17℃冰箱中）。从放入冰箱开始，每隔8 h轻轻颠倒混匀一次并做记录。减少冰箱门的开关次数，出现异常情况，必须重查精液品质并做记录。

2 结果与分析

2.1 月龄对公猪精液品质的影响

在该次精液品质分析中由于涉及因素广且时间长，所以只用采精量来体现公猪不同月龄对精液品质的影响。

结果显示公猪从5月龄至8月龄开始，采精量逐步上升，到18月龄左右达到顶峰。但有关专家认为公猪精液量在18月龄后可一直维持到5岁才下降，该试验因时间关系暂不能证明。

2.2 保存时间对精子活力变化的影响

该研究测定了9份精液在0 h、24 h、48 h、72 h的精子活力等级，并统计了各等级阶段的份数。

结果表明，随着保存时间的推移精子活力呈下降趋势，整体来看精子活力主要分布在0.8～0.9之间，但随着时间推移，到24 h已经有1瓶精子的活力低于0.9，到48 h已经有1瓶精子的活力低于0.7。

2.3 保存时间对精子活率和畸形率变化的情况

测定了9份精液在不同保存时间下的精子活率和畸形率，试验过程中最大程度地保证了单一变量为时间，尽可能的排除由其他因素对精液品质造成的影响，每一次测定过程都严格按照检测程序进行。影响情况如下图所示：

图 保存时间对公猪精子活率和畸形率的影响

结果表明，随着保存时间的延长精子活率在下降，畸形率在上升。由于精子活率低于70%和畸形率高于17%都不能再利用，而在该试验中保存72 h时的测量值中已有超过这两个值的。

3 讨论

遗传是决定公猪精液品质的最主要因素。有研究表明，公猪的睾丸大小、精子数量、性欲的遗传力估值分别为0.4、0.3和0.2。而这些性状对精液品质影响较大，所以，子代的精液品质受父母代影响较大。据郭应琳和伏彭辉报道，不同的猪种精液品质是不同的，一般是大白公猪最好，大约克次之，杜洛克最差［1］。

年龄对公猪精液品质影响较大。老龄公猪的精子密度不如壮年公猪，青年公猪总精子数最少。提高饲粮粗蛋白水平能显著增加采精量。但也有研究结果表明，过量的蛋白质摄入会引起血液中氨和尿素浓度升高，进而引起公猪精子畸形率的增加。王玉良和吴德标的试验表明了日粮中的硒、铁和钴对公猪精液品质具有不可忽视的影响［2］。其他的试验则表明，饲料中的各种维生素含量影响着公猪的精液品质［3-5］。玉荣等对杜洛克、大白、长白3个不同品种种公猪（各30头分）的不同月龄段（8～12、12～18、18～30月龄）的精液品质进行比较发现，3个品种种公猪精子活力都在8～12月龄段最强，随着年龄增大种公猪精子活力下降。到12～18月龄段3个品种种公猪精液体积都处于高峰期，18月龄开始下降。长白种公猪在18～30月龄段精子密度极显著高于另2个品种种公猪（P＜0.01），但精子活率比较低，平均活率小于75%［6］。

4 结论

笔者从不同年龄阶段、精液不同的保存时间两方面对精液品质的影响进行了分析。结果表明随着公猪年龄的增长，采精量不断增加，18月龄左右达到顶峰；随着保存时间的延长精子活力和活率呈逐步下降趋势，而畸形率则逐步上升。由于精子活率低于70%和畸形率高于17%都不能再利用，根据该试验建议，规模猪场一般当天采精后可放入17℃专用冰箱，但仅留作第2天使用即可，最好超过48 h的精液不要使用。这些情况在今后种公猪人工授精工作中有一定的参考作用，能够确保猪人工授精技术的顺利推广。

［1］郭应琳，伏彭辉.公猪精液品质的影响因素及其改进途径［J］.畜禽业.2009，（245）：46-49.

［2］王玉良，吴德标.种公猪精液品质与微量元素的关系［J］.上海畜牧兽医通讯，2007，（5）：29-30.

［3］王怀禹.日粮维生素E水平对种公猪精液品质的影响［J］.猪业科学，2010，（2）：50-52.

［4］李雪梅，曾饶琼，易宗容，等.维生素A饲喂量对种公猪精液品质的影响［J］.安徽农业科学，2008，36（33）：14540-14544.

［5］樵星芳，艾必燕，宋代军.烟酸铬对公猪精液品质的影响［J］.粮食与饲料工业，2006，（3）：41-42.

［6］玉荣，包花尔，斯日古楞.不同月龄、不同品种种公猪精液品质的比较试验［J］.2014，（7）：43-44.

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