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冰片对于血脑屏障开放的促进作用

2017-07-31李昭君

特别健康·下半月 2017年6期
关键词:冰片

李昭君

【摘要】目的:了解冰片对于血脑屏障开放的意义[1]。方法:将40只小白鼠平均分成两大组,生理组和病理组,然后将生理组又分为对照组和冰片组;药理组分为模拟脑外伤组以及模拟脑外伤加冰片组,每组十只,雌雄掺半。然后开始实验,将四组小白鼠按照实验要求进行处理,切片取材,使用四百倍的显微镜对每一只小鼠随机观察10条微血管。结果:对照组脑微血管内皮细胞大部分都呈现阴性;冰片组中的细胞阳性并没有得到增强,也是大部分呈现阴性;模拟脑外伤组细胞阳性有了很清晰的提高,大部分呈现中度阳性,而脑伤+冰片组的细胞阳性又出现了清晰地衰减,大部分呈现了阴性。讨论:冰片促进BBB开放和脑外伤造成的BBB病理性开放有显著区别。

【关键词】冰片;脑微血管内皮细胞;血脑屏障

【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851(2017)06-0-01

引言:大脑是人体的重要器官,其损伤会带来人体机能的相对退化。人体血脑屏障是对大脑的一种保护,但是保护大脑的同时,也隔绝了一部分药物的进入,为医学带来了难题。冰片可以促进血脑屏障的开放[2],有效促进医学的进步。

1.资料与方法

1.1 一般资料

从医药大学实验中心购买40只小白鼠,雌雄掺半,体重平均值为(251±19.8)克,平均分成两组:生理组和病理组,其中生理组又分为对照组和冰片组;药理组分为模拟脑外伤组和模拟脑外伤加冰片组(简单记为脑伤+冰片组),每一组十只小白鼠,雌雄掺半。

1.2 药物

从药材公司购买合成冰片[3],主要有94.6%的右旋龙脑,0.8%的龙脑香二醇酮,1.5%的龙脑香醇酮,以及1%的β-榄香烯,其中杂质的含量不足0.5%。把他调配成百分之十的冰片石蜡油溶液。同时还需要购买iNOS多克隆抗体和DAB染色试剂盒以及多聚甲醛。

1.3 方法

对照组小白鼠先服用15ml/kg的石蜡油,然后40分钟后用戊巴比妥钠进行麻醉,将其固定为仰卧位,进行开胸手术将其心脏裸露在外,往左心室注入37℃的生理盐水,随后切开右心耳,将液体排出,等到开始流出澄清的液体的时候,使用大注射器及时的向左心室注射一百毫升浓度为百分之四的多聚甲醛,然后快速完成取脑,浸泡在多聚甲醛溶液里,浸泡一天之后进行石蜡包埋,切片作为备用。

冰片组小白鼠服用与对照组等量的百分之十的冰片石蜡油溶液,在40分钟后采取和对照组相同的步骤完成取脑,再进行石蜡包埋后切片备用。

模拟脑伤组的小白鼠先进行麻醉,然后将其固定为俯卧位,在头部中线偏左的位置做一个头皮切口,使用牙科钻在该位置钻一个半径为3毫米的骨窗,要注意保证脑硬膜的完整,使用落体致伤模具对小白鼠的脑硬膜进行猛烈撞击,使其形成局部脑挫裂伤,六小时候之后采用对照组的方法进行材料选取。

脑伤+冰片组的小白鼠采用模拟脑伤组同样的方法使其形成脑伤,形成伤口六小时之后采用冰片组的方法完成材料选取。

1.4 脑微血管诱导性NOS免疫组化染色

在同样的环境里完成所有切片的免疫组化链菌素亲生物素—过氧化酶连结法染色,DAB显色,苏木精复染,然后在六十摄氏度的环境里进行烘干,用中性树胶进行密封固定,在400倍的显微镜下进行观察。其中将已知阳性片作为阳性对照,使用PBS作为阴性对照。

2.结果

从每一个组的十只小白鼠中任选一片切片,在每张切片中任意选择十条血管进行观察。然后对血管内皮细胞阳性率和染色体颜色进行记录分析。注意:呈现棕黄色的染色体进行的是阳性反应。下表中表1 为评分标准,表2是实验结果。

从表2中可以看到:对照组脑微血管内皮细胞大部分都呈现阴性;冰片组中的细胞阳性并没有得到增强,同样大部分呈现阴性;模拟脑外伤组细胞阳性有了很清晰的提高,大部分呈现中度阳性,而脑伤+冰片组的细胞阳性又出现了清晰地衰减,大部分呈现了阴性。

3.讨论

对照组小白鼠大脑切片中的脑微血管内皮细胞呈现阴性,说明正常的小白鼠脑微血管里不呈现iNOS;

冰片组的小白鼠使用了冰片以后,切片呈现的依旧是阴性,表示冰片不会使正常的小白鼠脑微血管中出现iNOS;

模拟脑外伤组的小白鼠脑微血管里出现了大量的iNOS,从iNOS中释放的NO使BBB病理性开放;

模拟脑外伤加冰片组使脑部出现损伤的小白鼠脑微血管中的iNOS衰减,造成NO量的减少,NO的大量释放是小白鼠大脑出现的病理性损伤减弱,很大程度上保护了脑组织。

实验告诉我们:冰片促BBB开放和脑外伤造成的BBB病理性开放是不一样的。

4.结束语

有学者研究声明:NO会影响微血管的通透性,会对BBB通透性产生很大的影响。iNOS会造成迟发性神经损伤,同时也会造成脑缺血和脑水肿。在正常生理状态中,脑微血管不会表现出iNOS,同时冰片也不能使其产生iNOS,也就是说促BBB开放和iNOS是没有关联的。而外伤可以很大程度上促进iNOS的释放,可以造成一连串的病理反应,BBB病理性开放。从实验中我们可以分析出来,冰片促BBB开放和病理性开放是有着很大区别的,冰片对大脑是有一定的保护价值的,它促血屏障开放不会给大脑带来损伤[4]。

参考文献

[1]张珉,张俊钰,钟武.血脑屏障开放方法研究进展[J].国际药学研究杂志,2016,2(43):126-133.

[2]奚卉.冰片促进血脑屏障开放机制的探讨[J].安徽医学,2013,30(6):696-698.

[3]王刚,曾南,王建,等.合成冰片影响血脑屏障开放促槲皮素脑吸收的研究[J].中药药理与临床,2013,28(1):65-68.

[4]施文甫,羅安明.冰片在脑部疾病中的应用[J].贵阳中医学院学报,2013,32(1):59-61.

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