滤除白细胞对悬浮红细胞不同贮存期溶血率的影响

董勤敏

·论著·

滤除白细胞对悬浮红细胞不同贮存期溶血率的影响

董勤敏

目的 对悬浮红细胞滤除白细胞后，其不同贮存期溶血率受到的影响情况展开分析。方法 将80名健康志愿者捐献的血液制备成80份悬浮红细胞，并根据随机数字表法将其分为两组，一组为对照组，未将白细胞滤除；另一组为观察组，滤除白细胞。将两组悬浮红细胞样品保存在4℃的环境中，并在保存当天，以及保存1周、2周、3周、4周、5周这几个时间点取样，并对保存液中的钾离子、钠离子以及游离血红蛋白(FHb)的含量进行检测与对比。结果 两组悬浮红细胞样品中的钾离子及钠离子含量随着贮存时间的延长而不断下降，但两组数据差异无明显差异(P>0.05)；两组的FHb随着贮存时间的延长而不断上升，且观察组各时间段的水平明显高于对照组(P<0.05)。此外，两组样品的溶血率也随着时间的延长而不断增加，自贮存至3周起，观察组的溶血率与对照组相比发生明显升高，但均符合标准要求。结论 对于贮存期不超过5周的悬浮红细胞，在贮存前将白细胞滤除，不会对其溶血率及质量产生明显影响。

悬浮红细胞 滤除白细胞 溶血率

在血液及红细胞制品中，游离血红蛋白(FHb)为一项非常重要的质控指标，当FHb含量过高时，很有可能导致受血者出现急性肾功能衰竭的情况[1]。当前，临床已经正式通过将血液制品中的白细胞滤除，可有效预防因人类白细胞抗原系统同种抗体而造成的一系列免疫性输血反应，如非溶血性发热反应、输血相关的移植物抗宿主病等。然而，国内不少滤白(也即滤除白细胞)血制品的保质期不长，容易造成浪费，并对临床应用及普及产生不利影响[2]。基于此，本文就悬浮红细胞滤除白细胞后，其不同贮存期溶血率受到的影响情况展开探究。现将结果报告如下。

1.材料与方法

1.1 样品来源 以2016年10月15日来我院献血的80名健康志愿者为例，每人捐献400ml血液，并置于CPDA-1的保养液中进行保存。随后，在采血的8小时内，将血液标本中的血浆分离，制备成80份悬浮红细胞，并采取随机数字表法将其分为两组，一组为对照组(40份)，未将白细胞滤除；另一组为观察组(40份)，滤除白细胞。将两组悬浮红细胞样品保存在4℃的储血冰箱中。实验均获得献血志愿者的知情同意。

1.2 试剂及仪器 试剂主要包括本科室自主配置的血红蛋白标准工作液，血红蛋白标准贮存液，以及浓度为1%的双氧水溶液。使用的仪器包括型号为Multiskan MK3的酶标仪，型号为罗氏COBAS 80000的生化分析仪，DU640型紫外分光光度计，NIHon Ko HDEN血细胞自动分析仪，由ROCHE 诊断公司生产的各项生化诊断试剂、加样枪以及血液分装五联袋等。

1.3 留样过程 将观察组悬浮红细胞血液样品中的白细胞滤除以后，立即用五联袋将两组的样品分装起来，并置于4℃的专用冰箱中进行贮存。将每份采血袋中剩余的50ml样品看作是保存当天样品，并在保存当天，以及保存1周、2周、3周、4周、5周这几个时间点取样，对保存液中的钾离子、钠离子、游离血红蛋白(FHb)的含量进行检测与对比，并在保存2周、3周、4周、5周检测两组的溶血率。

1.4 样品检测 取出标本并摇匀，从每袋中抽取2ml血液送往生化科检测钾离子及钙离子含量。并用血细胞自动分析仪将剩余样品中的红细胞比容(Hct)及血红蛋白(Hb)直接测定出来，采取邻甲联苯胺法测定FHb的含量，并根据溶血率=[上清液或血浆游离血红蛋白浓度×(1-血细胞比容)]÷总血红蛋白浓度×100%的公式，计算出悬浮红细胞的溶血率。

1.5 统计学方法 利用SPPSS18.0统计学软件分析实验中的数据，并用平均数与标准差表示计量数据，用t进行检验；计数资料则用百分比表示，用χ2检验，当P<0.05时，有统计学意义。

2.结果

2.1 两组悬浮红细胞样品中钾离子、钠离子及FHb含量比较 两组样品中的钾离子含量随着贮存时间的延长不断上升，钠离子随时间延长不断下降，但两组数据差异无明显差异(P>0.05)；两组的FHb随着贮存时间的延长而不断上升，且观察组各时间段的水平明显高于对照组(P<0.05)。详见表1。

表1 两组样品中钾离子、钠离子及FHb含量比较

注：与对照组相比，*P<0.05。

2.2 两组样品溶血率比较 两组样品的溶血率随着时间的延长而不断增加，自贮存至3周起，观察组的溶血率与对照组相比发生明显升高(P<0.05)，但均符合标准要求，详见表2。

表2 两组样品溶血率比较(%)

注：与对照组相比，*P>0.05，#P<0.05。

3.结论

近些年来，随着医疗技术的不断进步与发展，血液制品在临床中也得到了更加广泛的应用。而血液制品中的白细胞不但会作为病原载体传播各种病毒，而且还可能引起一系列的发热性输血反应[3]。因此，为有效减少输血传染病及输血副反应的发生，不少发达国家纷纷采取全面滤除白细胞(ULR)的措施，以期充分促进血液安全性的提高[4]。然而在实际应用过程中，就有报道称血液滤除白细胞后，出现了肉眼可见的溶血情况，究其原因，可能与过滤时对血液中的红细胞产生了机械性损伤存在紧密联系[5]。但也有学者认为，滤除血液中的白细胞后，有效防止了白细胞死亡后释放水解酶，极大程度上降低红细胞在贮存期以内的溶血率[6]。考虑到输血的安全性及有效性会受到红细胞溶血情况的而影响，因而欧盟及AABB均规定血液溶血程度的标准为贮存期末溶血率不超过0.8%，但国内尚未明确规定红细胞制品的溶血率标准[7]。

具体分析，红细胞质量一项非常重要的评估参数即为溶血，而血液中的钾离子、钠离子以及FHb均可作为溶血的关键指标[8]。由于临床用的滤白血液均需要尽可能快地输毕，因而本文对滤除白细胞与否的悬浮红细胞在不同贮存期的钾离子、钠离子、FHb及溶血率进行测量与对比。结果显示，随着贮存期的不断延长，两组悬浮红细胞钾离子及钠离子含量随着贮存时间的延长而不断下降，但两组数据差异无明显差异(P>0.05)，表明悬浮红细胞中的钾、钠离子不会受到滤白与否的影响；两组的FHb随着贮存时间的延长而不断上升，在贮存当天，由于观察组的悬浮红细胞在滤除白细胞过程中受到了机械性损伤，因而其FHb水平明显高于对照组(P<0.05)。此外，两组样品的溶血率也随着时间的延长而不断增加，自贮存至3周起，观察组的溶血率与对照组相比发生明显升高，但均符合欧盟就AABB制定的红细胞制品的溶血率标准要求。

综上所述，在贮存前将白细胞滤除不会对贮存期不超过5周的悬浮红细胞的溶血率及质量产生明显影响。

1 夏维英,张网兰,蒋琼.不同白细胞滤除方式对去白细胞悬浮红细胞溶血的影响[J].中国输血杂志,2013,26(7):646-647.

2 赵颖,曾娇，钟利，等.滤除白细胞的悬浮红细胞制剂保存24小时质量评价[J].现代临床医学,2012,38(4):264-266.

3 龚裕春,邱颖婕,金魏名，等.去白细胞悬浮红细胞与悬浮红细胞储存期内溶血率的比较[J].检验医学与临床,2013,26(3):151-152.

4 尤兆雄,隋素琴,张瑞君,等.去白细胞悬浮红细胞在保存期内生化指标的变化[J].中国临床研究,2015,28(3):301-302.

5 王超英.滤除白细胞对悬浮红细胞保存期质量的影响[J].安徽医学,2014,35(5):658-661.

6 王红,贺曾,吴瑕,等.滤除白细胞对全血保存质量的影响[J].中国输血杂志,2013,26(6):525-529.

7 陈菊芬,黄文光,温程荣,等.储存前去白细胞悬浮红细胞在保存期内质量变化的研究[J].中国输血杂志,2013,26(7):612-615.

8 罗圆圆,桂萍,潘继春,等.滤除白细胞对悬浮红细胞不同贮存期溶血率的影响[J].中国输血杂志,2013,26(8):728-729.

The effect of removing white blood cells on hemolysis rate of red blood cells in different storage periods

(DONGQinmin.Nanyangdowntownbloodbank,Nanyang473000,China.)

Objectives To analyze the effect of different red blood cells on the hemolysis rate after the removal of white blood cells.Methods 80 healthy volunteers donated blood to prepare 80 copies of suspended red blood cells were divided into two groups according to random number table method will be divided into two groups，a group for the control group，the leukocyte filtration; another group for the observation group，leukocyte filtration.Two groups of suspended red blood cell samples stored at 4℃ in the environment，and to save the day，and saved 1，2，3，4，5 weeks this time a few samples，and ions，preservation solution of potassium and sodium ions and free hemoglobin(FHb) were detected and compared the content of.Results Potassium ion and sodium ion content of two groups of suspended red blood cells in the sample decreased continuously with the extension of storage time，but no significant difference between the two groups(P>0.05); the two group of FHb increased with the extension of storage time，and the observation group each time the water were significantly higher than that of the control group(P<0.05).In addition，the hemolysis rate of the two groups increased with the extension of time，and the hemolysis rate of the observation group was significantly higher than that of the control group，but all of them were in accordance with the standard requirements.Conclusion The red blood cells were stored for no more than 5 weeks，and the white blood cells were removed before storage.

WBC,RBC,hemolysis rate

河南省南阳市中心血站 成分科 473000

10.3969/j.issn.1672-4860.2017.03.013

2017-3-31