联合检测血清AFP、GGT、AFU、D—D在原发性肝癌诊断中的临床应用

张文娟+张莉辉

【摘要】 目的：探讨甲胎蛋白（AFP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）及D-二聚体（D-D）联合检测在原发性肝癌诊断中的临床意义。方法：选取60例原发性肝癌患者（原发性肝癌组）和60例健康体检者（对照组），检测其血清AFP、GGT、AFU、D-D的水平，并进行统计学分析。结果：原发性肝癌组患者血清AFP、GGT、AFU、D-D单项检测阳性率分别为83.33%、75.00%、85.00%、78.33%，均明显高于对照组的5.00%、8.33%、3.33%、1.67%，差异均有统计学意义（P<0.05）。四项血清标志物联合检测阳性率为88.33%，显著高于各单项检测，差异均有统计学意义（P<0.05）。原发性肝癌组的联合检测的阳性率高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：AFP、GGT、AFU及D-D是原发性肝癌诊断的有效指标，联合检测对辅助诊断原发性肝癌及监测预后有重要的临床参考价值。

【关键词】 甲胎蛋白； 谷氨酰转肽酶； α-L-岩藻糖苷酶； D-二聚体； 原发性肝癌

Clinical Application of Combined Detection of Serum AFP，GGT，AFU，D-D in the Diagnosis of Primary Hepatic Cancer/ZHANG Wen-juan，ZHANG Li-hui.//Medical Innovation of China，2017，14（09）：125-128

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical significance of the detection of alpha-fetoprotein （AFP） combined with glutamyl transpeptidase （GGT），alpha-L-fucosidase （AFU）and D-dimer（D-D） in the diagnosis of primary hepatic cancer（PHC）.Method：60 primary hepatic cancer patients（primary hepatic cancer group） and 60 heathy individuals（control group） were selected，the levels of serum AFP，GGT，AFU and D-D were detected and analyzed statistically.Result：The positive rates of serum AFP，GGT，AFU，D-D in primary hepatic cancer were 83.33%，75.00%，85.00%，78.33%，respectively，which were significantly higher than 5.00%，8.33%，3.33%，1.67% in control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The positive rate of combined detection of four serum markers was 88.33%，which was significantly higher than those of each single item，the differences were statistically significant（P<0.05）.The positive rate of combined detection of primary hepatic cancer group was higher than that of control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：AFP，GGT，AFU and D-D are effective indicators for the diagnosis of primary liver cancer，joint detection has important clinical value in the diagnosis and prognosis of primary hepatic cancer.

【Key words】 Alpha-fetoprotein； Glutamyl transpeptidase； Alpha-L-fucosidase； D-Dimer； Primary hepatic cancer

First-authors address：The Peoples Hospital of Mengzi，Mengzi 661100，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.09.036

原發性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是一种进展快、预后差，恶性程度仅次于胃癌、食道癌的恶性肿瘤，其全球死亡率和发病率逐年呈上升趋势，分别占所有肿瘤的第4位和第7位[1]。该病的发生是一个多因素、多步骤的过程，发病较为隐匿，确诊时多为中、晚期，因此早期诊断和治疗成为临床关注的焦点。甲胎蛋白（AFP）作为诊断肝癌的经典血清学指标，由于单项指标检测的灵敏度不高，以及假阳性和假阴性存在，容易造成漏诊和误诊，有学者提出多种标志物联合可提高诊断的灵敏度和特异性[2-5]。目前，国内关于AFP、AFU、GGT和D-D联合检测诊断肝癌患者的报道较少，本研究将联合检测AFP、AFU、GGT和D-D水平，探讨它们对原发性肝癌诊断的临床价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2014年1月-2016年12月在本院就治的原发性肝癌患者共计60例，纳入标准均符合中国抗癌协会1999年修订通过的肝癌诊断标准。排除标准：（1）近期内感染者；（2）接受放疗和化疗者；（3）近期应用免疫抑制剂治疗者；（4）有其他系统肿瘤者；（5）合并严重内脏器官疾病的患者。其中男33例，女27例；平均年龄（53.26±15.15）岁。同期选健康体检者

60例作为对照组，男30例，女30例，平均年龄（59.63±15.25）岁。两组的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 仪器与方法

1.2.1 仪器与试剂 仪器：AU5800全自动生化分析仪检测，希森美康SYSMEX全自动血凝分析仪CA1500，贝克曼库尔特UniCel DxI800 Access免疫分析仪。试剂：r-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（速率法），D-二聚体测定试剂盒（免疫比浊法），α-L-岩藻糖苷酶测定试剂盒（CNPF底物法），甲胎蛋白测定试剂盒。

1.2.2 方法 血清D-二聚体检测采用枸橼酸钠（109 mmol/L）0.2 mL，清晨空腹，采集上臂静脉血1.8 mL，迅速摇匀后，3000 r/min高速离心15 min，提取血浆，应用希森美康SYSMEX全自动血凝分析仪CA1500，采用免疫比浊法检测；GGT和AFU检测采用真空采血管，清晨空腹采集静脉血3 mL，分离血清后采用AU5800全自动生化分析仪检测，GGT采用γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（速率法），AFU采用α-L-岩藻糖苷酶测定试剂盒（CNPF底物法）；AFP采用UniCel DxI800 Access免疫分析仪，试剂为甲胎蛋白测定试剂盒。采集静脉血取所有样本及时分离血清和血浆，标本均无溶血和脂血现象，所有操作步骤均在标准实验条件下进行，严格按照仪器及试剂盒说明进行操作。

1.3 观察指标 生化指标参考范围：AFP为0～20 ng/mL，AFU为0～40 U/L，GGT为3～64 U/L，D-D为0～0.55 mg/L。D-D、AFP、GGT及AFU检测水平高于参考值为阳性，任意一项条件满足为联合检测阳性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0软件进行数据处理，先进行数据的正态性和方差齐性检验，样本均数以（x±s）表示，均数比较采用t检验；率的比较采用 字2检验，多个样本率多重比较采用bonferroni方法，以a=0.05为检验水准，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 D-D、GGT、AFU、AFP检测水平比较 原发性肝癌组的D-D、GGT、AFU、AFP检测水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 D-D、GGT、AFU、AFP单独检测与联合检测阳性率比较 原发性肝癌组的D-D、GGT、AFU、AFP阳性率均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；原发性肝癌组D-D、GGT、AFU、AFP的单项检测阳性率均低于四项联合检测的阳性率，差异均有统计学意义（P<0.05）；原发性肝癌组的联合检测的阳性率高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

原发性肝癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率逐年不断攀升。由于目前诊断、治疗和监测方法的局限性，以及病情发展过程中伴随癌栓、血行转移等，导致我国肝癌患者被诊断时多已处于肝癌晚期，PHC术后生存率一直处于较低水平，因此，早期发现、早期诊断肝癌和改善其预后尤为重要[6]。仅用单一血清学标志物检测PHC由于假阳性和假阴性率高，容易造成漏诊和误诊，联合多种标志物可提高PHC早期诊断率[7-8]。目前越来越多的学者开始着眼于新的肝癌血清标志物，由于已知的血清标志物种类繁多，又各自具有自己独特的优势，将它们联合进行检测将在一定程度上弥补PHC诊断假阳性和假阴性率高的问题，也显著的提高了诊断的灵敏度[9-10]。本试验将研究D-D、GGT、AFU、AFP四种血清标记物在原发性肝癌发生时的变化水平，來探讨它们对原发性肝癌临床诊断的价值。

AFP一直被作为肝癌诊断中的经典血清学标志物，但由于胃肠道恶性肿瘤、急慢性肝炎、肝硬化和妊娠妇女等人群AFP含量均有明显升高，故特异性较低[11]。AFU是一种溶酶体酸性水解酶，存在于肾纤维细胞、肝、脑等溶酶体内，主要以肝和肾组织中活性最高；当肝细胞发生癌变时酶合酶蛋白合成增加及降解减慢有关或与肿瘤细胞坏死、破裂、酶释放过多导致AFU升高[12]。相关文献研究发现，当肝细胞发生癌变时，含盐藻糖基的糖蛋白和糖脂代谢功能紊乱，肝癌细胞大量坏死，刺激溶酶体释放AFU入血，导致肝癌患者体内AFU水平明显升高[13-15]。本研究中原发性肝癌组AFU水平明显高于健康对照组，阳性率高达85.00%，且明显高于AFP、GGT及D-二聚体，因此，AFU可作为诊断原发性肝癌的一种酶类指标。

血液中GGT主要来自肝胆系统，当肝内和肝外胆管梗阻时，血清中GGT升高；PHC患者由于肝内阻塞，酶因排泄障碍而逆流入血，使肝细胞产生大量GGT，同时癌细胞及周围的炎症刺激作用使肝细胞膜通透性改变，导致GGT含量明显增高[16]。临床GGT异常升高主要见于肝内外胆道阻塞；中度升高见于胰腺疾病、各种肝炎、肝硬化；高度升高多见于原发和继发性肝癌；总活力的测定中，GGT对肝癌诊断的敏感性高于AFP，但由于特异性较差，近年来多作为PHC的诊断的联合检查的指标[17]。

D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能，其在血浆中浓度增高，表示体内有活化的血栓形成及纤维活性增强，恶性肿瘤患者的血浆D-二聚体都有升高，肿瘤发生转移时，升高的更加显著[18]。血浆D-二聚体含量因病情的严重程度及肝功能损害程度加重而增高，故动态观察PHC患者的血浆D-二聚体可判断病情的预后及指导治疗[19]。本研究中，PHC组血清D-二聚体浓度较健康对照组明显增高，可能是由于患者体内的肿瘤细胞释放出大量促凝物质，导致凝血酶的产生而形成纤维蛋白[20]。

本研究结果显示，PHC组D-D、GGT、AFU、AFP检测结果分别为（3.78±1.98）mg/L、

（467.03±127.90）U/L、（50.07±16.28）U/L、

（525.88±159.70）ng/mL，均高于對照组的（0.18±0.02）mg/L、（28.50±15.71）U/L、（24.75±7.39）U/L、（3.32±2.69）ng/mL（P<0.05），这说明可以将D-D、GGT、AFU、AFP作为诊断PHC的有效指标。且研究发现，PHC组的AFP、GGT、AFU、D-D单项检测阳性率分别为83.33%、75.00%、85.00%、78.33%，四项联合检测使PHC的诊断率明显提高，阳性率达88.33%。联合检测D-D、GGT、AFU、AFP能较早反应肝功能损伤及合成功能，对PHC的诊断和预后有重要的临床价值。D-D、GGT、AFU、AFP检测具有创伤性小，操作简单，实现全自动化等优点值得在临床上推广运用。

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