罕见患者Ael04亚型1例及其家系调查

何卫社 梁俊杰 刘建岭 刘乐霞 王德平 冯丽娜 张 燕 曹立敏

罕见患者Ael04亚型1例及其家系调查

何卫社 梁俊杰 刘建岭 刘乐霞 王德平 冯丽娜 张 燕 曹立敏

Ael04亚型 家系调查 分子生物学

Ael亚型在人群中罕见[1]，最近在患者中发现1例Ael亚型，现将家系调查及分子生物学鉴定结果报道如下。

材料与方法

1 材料 患者，女，26岁，足月待产，无输血史、妊娠史，常规查血型为正定O、反定A，经家系调查，其母亲正定O、反定A，进一步做血型血清学鉴定，并送上海血液中心血型参比室做分子生物学鉴定。

2 试剂 单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂（长春博讯生物有限公司），人源抗-A和抗-B及Ac、Bc、Oc、A2c和自身红细胞（本站制备），抗-H、抗-A1（上海血液生物医药有限责任公司），均在有效期内使用。

3 方法

3.1 血型血清学检查

3.1.1 血型鉴定：按标准操作规程操作［2］，见表1。

3.1.2 吸收、放散试验：被检者红细胞、阳性对照A型红细胞、阴性对照O型红细胞分别与效价64的人源抗-A血清做吸收放散试验。按标准规程操作［2］。

3.1.3 血型物质检测：取被检者唾液1～2 ml，沸水煮10 min，离心后取上清。 抗-A、抗-B单克隆抗体试剂用生理盐水稀释至效价为1∶16，抗-H抗体不用稀释。分别将100 μl血型物质与制备后的试剂100 μl等体积混合，室温放置10 min。 用Ac检测中和后的抗-A抗体，Bc检测中和后的抗-B抗体，Oc检测中和后的抗-H抗体。

3.2 家系调查：对家系共3代进行调查。

3.3 分子生物学鉴定：患者及其母亲标本送上海市血液中心国家血型参比室进行分子生物学鉴定。

结 果

1 血型血清学检查结果 该患者及其母亲的红细胞与抗-A、抗-B、抗-AB在室温、4℃时均不凝集，与抗-H出现强凝集。2人的血清中除有正常抗-B外，在4℃与A2c、自身c、Oc均不反应，与Ac有弱凝集，证明血清中有抗-A1；吸收放散试验效价为64的人源抗-A经被检者红细胞和对照A型红细胞吸收后，被检者抗-A的效价降为16，对照A型红细胞抗-A效价降为0，被检者放散抗-A的效价为32，对照A型红细胞放散抗-A效价为0，阴性对照O型红细胞放散液为阴性，证明被检者的A抗原比正常A型的A抗原吸收能力弱，放散能力强，红细胞上有弱的A抗原；血型物质测定显示患者为分泌型，分泌H型物质，不分泌A型、B型物质。见表1。

2 家系调查结果 家系3代中有2人为Ael亚型。见图1。

3 分子生物学鉴定结果 患者及其母亲基因型分别为Ael04/ O201、Ael04/O101。见表1。

表1 血型血清学、分子生物学检测结果

图1 Ael04家系血型遗传图

讨 论

Ael在人群中罕见，有学者在法国150 000名献血者中未查到Ael，而在400 000名中国人群中检测到5例Ael［1］，提示Ael在人群中频率较低且存在差异。本研究的血型血清学试验结果显示患者及其母亲均为A细胞不被抗-A、抗-AB凝集，但经吸收放散试验可证实红细胞上有极弱的A抗原，唾液中含H物质，不含A物质，符合Ael血型血清学特点［3］。而Ael亚型的血清中是否含有抗-A1尚不肯定；许先国等［4］报道先证者不含有抗-A1，但其母亲含有；宿军［5］、王成辉［6］、吕杭军等［7］报道两者均含抗-A1；本例患者及其母亲血清中均有抗-A1，肯定了某些Ael个体血清中含抗-A1。Ael与Ax、Am的区别主要在于Ax血清中常有抗-A1抗体，而Am唾液血型物质有A、H物质［8，9］。

采用分子生物学方法进行基因定型，本例患者及其母亲均为Intron 6 5G＞A突变，对照血型抗原基因突变数据库[10]，其等位基因均为Ael04。Soloman及Sturgeon于 1964年报道，Ael具有遗传性[11]，家系调查及分子生物学鉴定发现此患者Ael04血型从母亲遗传所得，其家族目前已遗传了2代，本例证实了Ael的遗传性。由此可见，血清学方法无法对亚型正确定型，通过分子生物学技术，结合家系调查揭示血型遗传方式，可得到准确的血型结果，因此，分子生物学技术及家系调查是血型血清学方法的重要辅助手段。

Ael亚型红细胞上的A抗原极弱，一般情况下不易检出，患者及其母亲血清中不但含有抗-B，还有抗-A1，易将其误定为“O”型。该Ael亚型患者由于其血清中有抗-A1，不能接受A型红细胞，而应输注O型红细胞，作为献血者，血浆不应输给A型患者。

（感谢上海市血液中心血型参比室向东老师的大力支持！）

1 Daniels G. ABO，Hh，and Lewis systems[A].// Daniels G. Human blood groups[M]. 2nd ed. Oxfond：Blackwell Science Publishing，2002：36-39.

2 陈宏础，王鸿利.血型血清学检查[A].叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社，2006：262-264.

3 李勇，马学严.实用血液免疫学血型理论和实验技术[M].北京：科学出版社，2006：136-137.

4 许先国，何吉，洪小珍，等.Ael亚型的分子生物学研究[J].中国输血杂志，2003，16（2）：74-77.

5 宿军，宋静，杨春晴，等.Ael亚型伴有抗-A11例[J].中国输血杂志，2009，22（3）：233-234.

6 王成辉，陈远贵，杨清平，等.Ael02B亚型1例[J].中国输血杂志，2012，25（6） ：591-592.

7 吕杭军，洪小珍，应燕玲，等.ABO血型新等位基因Ael08的分子生物学研究[J].中国输血杂志，2011，24（8）：676-678.

8 丁伟. 1例少见AxB亚型的鉴定分析[J].临床输血与检验，2015，17（2）：160-162.

9 周金安，艾伯平. Am亚型 1 例[J]. 临床检验杂志，2011，29（2）：150.

10 Blumenfeld OO.Patnaik SK.Allelic genes of blood group antigens： a source of human mutations and cSNPs documented in the Blood Group Antigen Gene Mutation Database[J] .Hum Mutat，2004，23（1） ：8-16.

11 Bryant N.J An introduction to immunohematology Philadelphia[M]：2nd ed，Saunders Company，1982：74-76.

R457.1+1

B

1671-2587（2017）02-0203-02

2016-08-22）

（本文编辑：姚萍）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.033

065000 河北省廊坊市人民医院（何卫社，王德平）；沧州市中心血站（梁俊杰，刘建岭，刘乐霞，冯丽娜，张燕）；廊坊广安医院（曹立敏）

何卫社（1966–），男，河北廊坊人，副主任技师，主要从事临床输血工作，（Tel）18003368990（E-mail）tianwaiyoutian8270@sina.com。

刘乐霞，女，主任技师，主要从事免疫血液学及质量管理工作，（Tel）13582728982（E-mail）liulexia@163.com。