核酸检测系统应用于血站血液筛查的使用前确认*

2017-04-26李莉华何路军马印图

临床输血与检验 2017年2期

李莉华何路军马印图

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目的回顾性分析华益美核酸检测（nucleic acid technology，NAT）系统应用于血站实验室血液筛查的使用前确认的内容和方法，为采供血单位顺利开展核酸检测提供参考。方法按照《血站质量管理规范》、《血站实验室质量管理规范》及《血站核酸检测实验室质量保证指南》的要求进行使用前确认，主要包括检测设备的安装、运行、性能确认，实验人员资质和能力、试剂性能、核酸实验室质量体系文件、信息系统的确认，以及标本处置和风险评估等方面。结果通过对华益美核酸检测系统使用前的确认，为后续NAT有效、平稳开展提供了文件化的证据，提高了血站实验室核酸检测的工作质量。结论有效开展核酸检测系统使用前确认活动是常规核酸检测的前提，是降低实际运行过程中风险的有效手段。

血站核酸检测（NAT）血液筛查实验室管理系统确认

根据我国《卫生事业发展“十二五”规划》的要求，采供血机构实现“到2015年底，血液筛查核酸检测基本覆盖全国”的工作要求，目前，国内多数采供血机构基本实现了NAT全覆盖。使得NAT系统在献血者血液筛查中得到极大的应用。NAT直接检测病毒核酸，具有极高的灵敏度和特异性，操作技术要求高，检测系统运行状态的好坏直接关系到血液检测的结果和质量；特别是部分血站刚刚开展，对NAT实验室的运行模式、系统确认等方面不熟悉，工作中存在盲点和误区。因此，有效开展NAT系统使用前确认活动是常规NAT的前提，是降低实际运行过程中风险的有效手段。本文总结了华益美NAT系统应用于本实验室血液筛查的使用前确认内容和确认方法，为采供血单位顺利开展核酸检测提供参考。

1 依据与原则

1.1 NAT系统使用前确认的依据核酸检测系统使用前确认活动依据的规范和标准包括《血站质量管理规范》、《血站实验室质量管理规范》、《血站核酸检测实验室质量保证指南》等。

1.2 NAT系统使用前确认的基本原则 NAT设备作为血液筛查实验室中大型关键设备之一，在正式投入运行前需按照《血站质量管理规范》及《血站实验室质量管理规范》的要求进行使用前确认。而核酸检测系统投入使用前开展的确认活动不仅包括设备的确认，其涵盖范围更广泛。因此，确认活动结合核酸检测的方法学特性宜遵循以下几个原则。

1.2.1 多环节全面的原则 NAT系统的使用确认包括检测设备的安装、运行、性能确认，实验人员资质和能力、试剂性能、核酸实验室质量体系文件、信息系统的确认，以及标本处置的确认等方面。使用前确认活动应考虑到NAT体系相互关联的多个环节。

1.2.2 可测量量化的原则确认活动应通过可以测量的量化指标来证实检测系统的应用是否符合预期，是否满足检测需求。

1.2.3 可操作适度的原则 NAT系统的确认活动既要结合其技术特点、实际情况，又要结合试剂盒使用说明书，确定适宜的确认范围和深度，具有可操作性。

1.3 提出确认申请、制定确认计划 NAT系统确认活动涉及采供血业务流程的多个相关部门，在向业务主管部门提出确认申请后，核酸实验室主管负责各部门的沟通协调，制定确认计划和确认方案。实验室明确确认目的、对象，确认活动时间表，小组成员及分工等。制定确认方案，以确立各项确认内容、所需材料、拟用的检测方法、可接受标准、结果结论等。

2 确认与实施

确认实施阶段是确认活动的重点环节，大部分的确认活动在此阶段开展。根据确认方案中既定的确认内容，实施各项确认，评估所得数据是否符合预期标准。以华益美NAT系统为例实施确认活动。

2.1 NAT设备安装、运行确认

2.1.1 在NAT设备到货前首先对实验室是否具备安装条件进行评估，具体核实的内容见表1。

2.1.2 安装确认（IQ）涉及工程质量管理规范在设备安装时的验证［1］，检查设备安装是否正确，一般包括设备硬件和软件的安装。具体安装确认内容见表2。

2.1.3 运行确认（OQ）是检查设备的各种参数设置和空载运行的可靠性和稳定性，确保设备可在要求的范围内正确运行［2］。确认内容见表3。

2.2 实验人员资质和能力确认与血清学检测比较，NAT技术含量高、操作复杂，要求实验人员具备熟练的操作能力，以减少NAT无效运行，避免报告发放周期延长。因此，操作人员能力和资质的确认也自然成为NAT过程确认的重要组成部分［3］。此次华益美NAT系统的人员培训工作本着少人次多循环的原则，以保证实验人员能更多地独立操作、独立处理问题。基于实验人员除需要具备一定的基础理论和基本知识外，更重要的是需要具备熟练的操作能力和应急处理能力，以及血液检测过程控制和质量管理理念和技能［4］，培训内容应结合NAT实验室特点，涉及理论、实际操作、流程控制以及应急处理等方面，最后采用理论加操作相结合的考核方式对培训效果、人员资质进行评估。

2.3 NAT系统性能确认性能确认（PQ）是通过模拟检测实验的方式，进行设备的试运行，确认设备是否符合实验要求［2］。国际输血协会（International Society Blood Transfusion，ISBT）指出IQ、OQ、PQ是设备确认的3个连续阶段，并对具体操作进行了说明［5］。本实验室实施性能确认旨在对已安装调试完毕的华益美NAT系统（设备与试剂）进行评估，确保检测性能符合产品说明书标准。见表4。

2.4 NAT实验室体系文件的确认我中心实验室自2009年将NAT应用于血液筛查，采用Procleix TIGRIS NAT系统和上海浩源NAT系统进行检测，NAT实验室的质量管理已纳入中心质量体系中，建立了相应的体系文件。根据《血站核酸检测实验室质量保证指南》要求：实验室应采用经过评估和确认的NAT标准操作规程进行操作。本次确认活动由实验人员与厂方工程师配合完成编写华益美检测系统SOP 及相关管理程序，重新构建NAT实验室体系文件。

表1 实验室安装NAT设备前评估的内容

表2 华益美核酸检测系统安装确认内容

表3 华益美NAT系统运行确认内容

表4 华益美NAT系统性能确认主要内容

2.5 信息系统的确认血液筛查实验室信息管理系统（LIMS）覆盖了整个血液检测过程对流程、设备、人员、试剂、耗材、记录、环境监控等各环节的管理和控制，无论是新建还是在用系统的修改都应该实施全面的确认活动［6］。本实验室在启用新NAT系统前，对核酸相关信息系统进行了确认，包括软件添加物料、设备、检测方法、设备接口，采集服务配置，文件生成，数据传输，报告审核签发等系列内容。

2.6 风险评估 NAT系统投入使用前首先对其相关过程进行风险评估，对可能存在的风险采取措施使之处于可接受范围内。如设备运行的安全控制、故障处理、核酸试剂的库存管理、检测报告时限，实验人员再培训等方面进行风险评估并制定措施。

2.7 形成确认报告我中心实验室在华益美NAT系统使用前开展了一系列确认活动，所有测试结果有效，各个确认项目达到各自可接受标准，证实该系统在本实验室的使用性能与预期一致，可以常规开展检测。本次确认活动有效。

3 结语《血站质量管理规范》中规定：建立和实施确认程序，对新的或有变化的过程、程序、设备、软件、试剂或其他关键物料进行系统检查，以保证在正式使用前符合预期的使用要求［7］。随着规范在血站系统的有效实施，确认工作越来越多地应用到血站质量管理活动中，成为实验室质量管理体系不可或缺的要素。本次开展的华益美NAT系统使用前确认活动，为后续NAT有效、平稳开展提供了文件化的证据，也为其他血站实验室实施NAT系统的确认工作提供参考，以达到深化认识持续改进的目的。

1 邹峥嵘，周国平，郑岚，等. 上海血站血液核酸检测确认工作初探[J].中国输血杂志，2013，26（9）：813-815.

2 田耘博，李维，秦伟斐，等. 血液病毒核酸检测仪器使用前的性能确认[J].临床血液学杂志，2015，28（2）：112-114.

3 葛红卫，王鸿捷.血站核酸检测实验室过程确认与变更能控制 [J].中国输血杂志，2012，25（6）：519-523.

4 郑静，姚凤兰，冷禅，等.血站核酸检测实验室人员培训模式探讨 [J].中国输血杂志，2012，25（6）：528-529.

5 ISBT.Guidelines for validation of Automated Systems in Blood Establishments [J].2nd ed Vox Sanguinis， 2010，98：1-19.

6 汪德海.血液筛查实验室信息管理系统（LIMS）确认的探讨 [J].中国卫生信息管理杂志，2012，9（1）：47-49.

7 中华人民共和国卫生部.血站质量管理规范[S].2006-4-25.

R457.1+2 R392.11

1671-2587（2017）02-0198-04

2016-10-12）

（本文编辑：姚萍）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.031