蒲公英不同提取物抗炎效果研究

侯京玲 ， 周霄楠 ， 冯沙沙 ， 赵兴华

(河北农业大学动物医学院中兽医学院 ， 河北保定071001)

蒲公英不同提取物抗炎效果研究

侯京玲 ， 周霄楠 ， 冯沙沙 ， 赵兴华

(河北农业大学动物医学院中兽医学院 ， 河北保定071001)

为了解蒲公英主要药效成分的抗炎效果，通过建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型筛选出蒲公英的抗炎成分，并通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀，蛋清致大鼠足跖肿胀及大鼠棉球肉芽肿模型，研究蒲公英抗炎成分对毛细血管扩张和通透性亢进、渗出水肿、白细胞向炎症聚集、纤维组织增生的抑制作用。结果显示，蒲公英的主要抗炎成分为蒲公英黄酮，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀，蛋清致大鼠足跖肿胀及大鼠棉球肉芽肿均有明显抑制作用。表明蒲公英黄酮对急慢性炎症均具有良好的抑制作用，并且高剂量组的蒲公英黄酮抗炎效果最好。

蒲公英 ； 黄酮 ； 肿胀 ； 炎症 ； 抗炎

蒲公英味苦甘、性寒、无毒，入肝、胃经，具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋等功效。临床上主要用于治疗疖痈、急性乳腺炎、感冒等多种炎症性疾病。蒲公英的抗炎作用在现代药理学中有一定的发展，但都是以全草或粗提物来进行的，单体成分的抗炎研究较少。如 Gonzalez-Castejon等[1]研究表明，蒲公英可用于治疗急性扁桃体炎。Schutz等[2]用药蒲公英乙醇提取物可部分抑制角叉菜胶诱导的大鼠足跖水肿。Koh等[3]用70%甲醇提取蒲公英叶，发现三氯甲烷和醋酸乙酯部分抗炎作用最强，并证实蒲公英叶提取物能降低LPS诱导的RAW264.7细胞中iNOS和COX-2的表达。本试验先对蒲公英不同提取成分进行抗炎活性筛选，再通过急慢性炎症模型探讨蒲公英黄酮抗炎效果，为蒲公英抗炎成分的药理研究和进一步研究蒲公英抗炎机制提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 昆明系小鼠(许可证号：SCXK2013-1-003)，体重(24±4)g；SD大鼠(许可证号：SCXK2013-1-003)，体重(220±25)g；购自河北医科大学实验动物中心。

1.2 药品 蒲公英，购自河北省安国药材市场，蒲公英多糖、蒲公英酚酸、蒲公英黄酮和蒲公英甾醇由河北农业大学实验室提取制备。

1.3 蒲公英抗炎成分筛选 小鼠30只，随机平分为6组。A组为空白对照组，给予0.2 mL/20g生理盐水，B、C、D、E组为试验组，分别给予0.2 mL/20g蒲公英多糖、蒲公英黄酮、蒲公英酚酸和蒲公英甾醇，连续给药5 d。F组为阳性药物对照组，1次性给予0.2 mL/20g氢化可的松注射液。末次给药1 h，小鼠右耳廓涂二甲苯致炎。1 h后将小鼠处死，剪下双耳用直径9 mm的打孔器在同一部位打下耳片，称重并记录。

1.4 抗炎效果研究 (1)二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验：小鼠50只，随机分为5组。A组为空白对照组，给予0.2 mL/20g生理盐水，B、C、D组为试验组，分别给予蒲公英黄酮溶液 0.1，0.2 mL/20g和0.4 mL/20g，连续给药5 d。E组为阳性药物对照组，一次性给予0.2 mL/20g氢化可的松注射液。试验方法及处理同1.2.1；(2)蛋清致大鼠足跖肿胀试验：取大鼠25只，随机分为5组。分组及给药同上试验1.2.3(1)。末次给药1 h，于大鼠左后趾中部皮下注射10%新鲜蛋清0.1 ml，分别在注入后0.5、1、2、4、6 h后测足趾容积，记录各时刻数据；(3)大鼠棉球肉芽肿试验：取大鼠25只，用1%戊巴比妥麻醉，下腹部去毛消毒，将50 mg的无菌棉球植入左侧腹股沟皮下，缝合伤口。术后随机分为5组，每组5只，1 h后开始给药，分组及给药同1.2.3(1)，连续给药5 d。第6天取出棉球肉芽肿组织，于烘干箱中60 ℃烘干，称重并记录。

2 结果

2.1 蒲公英抗炎有效成分筛选 通过建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型筛选蒲公英的有效抗炎成分(表1)。由表1可知，与空白对照组小鼠相比，蒲公英多糖组和蒲公英酚酸组耳肿胀度无显著差异(P>0.05)，而蒲公英黄酮组、蒲公英甾醇组与空白对照组相比小鼠耳廓肿胀度极显著(P<0.01)降低；蒲公英黄酮组与氢化可的松组相比耳廓肿胀度无显著差异，蒲公英甾醇组耳廓肿胀度显著高于氢化可的松组(P<0.01或P<0.05)。这说明蒲公英黄酮和蒲公英甾醇显著抗炎作用且蒲公英黄酮效果比蒲公英甾醇好，所以蒲公英黄酮为蒲公英的主要抗炎成分。

表1 蒲公英有效抗炎成分筛选(x±s)

注：大写字母为差异极显著，小写字母为差异显著，下表同

2.2 蒲公英黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 通过建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型研究蒲公英黄酮的抗炎效果(表2)。由表2可知，与空白对照组小鼠相比，低剂量组无显著差异；而高剂量组、中剂量组与空白对照组相比耳廓肿胀度极显著降低。高剂量组与氢化可的松组相比无显著差异；中剂量组耳廓肿胀度极显著低于空白对照组，显著高于高剂量组。由此可知蒲公英黄酮能够抑制小鼠耳肿胀，且抑制作用呈剂量依赖性。

表2 蒲公英黄酮对二甲苯诱发小鼠耳部水肿的影响

2.3 蒲公英黄酮对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响 通过建立蛋清致大鼠足跖肿胀模型研究蒲公英黄酮的抗炎效果(表3)。注射蛋清水溶液后，致炎效果显著，0.5h后足趾肿胀率即可达到92.76%，0.5～6 h 内都为肿胀高峰期，足趾肿胀率在80%以上，说明造模成功。蒲公英黄酮高剂量组从造模后0.5 h～6 h，与同期模型组相比，可极显著抑制蛋清引起的足趾肿胀，其作用效果与氢化可的松组的抗炎效果接近。中、低剂量组对于炎症的抑制效果也极显著。说明蒲公英黄酮对大鼠足跖肿胀模型有显著的抗炎作用。详见表3。

表3 蒲公英黄酮对蛋清诱导的大鼠脚趾肿胀的影响

2.4 蒲公英黄酮对大鼠棉球肉芽肿增生的影响 通过建立大鼠棉球肉芽肿模型研究蒲公英黄酮的抗炎效果(表4)。由表4可知，与空白对照组肉芽肿相比，中剂量组和低剂量组肉芽肿增生无显著差异；而高剂量组肉芽肿极显著低于空白对照组。由此可知高剂量的蒲公英黄酮具有抗炎效果。

表4 蒲公英黄酮对棉球肉芽肿增生的影响(x±s)

3 讨论

蒲公英价格低廉，资源丰富，在我国分布广泛。近年关于蒲公英抗炎作用的研究有很多，以蒲公英提取物为最多，但多数并没有明确的鉴定蒲公英提取物中何种成分有抗炎作用。王利[4]对蒲公英进行了蛋清性、琼脂性所致大鼠足趾肿胀观察，发现蒲公英能够抑制大鼠蛋清性足趾肿胀；平家奇[5]等通过建立急慢性炎症模型，研究证明蒲公英提取物具有明显的体内抗炎作用；刘婧陶[6]等通过研究表明，蒲公英甾醇具有明显的体内抗炎作用；蒲公英水提物在体内通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路，对于LPS诱导的小鼠肺炎显示出抗炎作用[7]。蒲公英中含有大量的黄酮类成分，是抗氧化抗炎作用的活性成分[8]。近年有很多关于黄酮抗炎的研究，如赵頔[9]研究表明，杜香黄酮能够抑制醋酸致小鼠毛细血管通透性增强，二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足趾肿胀，说明杜香黄酮对炎症的抑制作用；吴金梅[10]研究发现，甘草总黄酮对奶牛乳房炎有明显的治疗效果。本试验对4种蒲公英提取物进行抗炎效果对比，筛选出蒲公英有效抗炎成分为蒲公英黄酮，而后建立急慢性炎症模型研究蒲公英黄酮的体内抗炎效果，试验结果表明，蒲公英黄酮具有明显的体内抗炎作用。蒲公英黄酮资源广，提取方便，抗炎抗氧化作用显著具有良好应用前景，但对于蒲公英黄酮的抗炎作用还需进一步的研究。

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Anti-inflammatory effect of Dandelion different extracts

HOU Jing-ling , ZHOU Xiao-nan , FENG Sha-sha , ZHAO Xing-hua

(Agricultural University of Hebei , College of Veterinary Medicine, Baoding 071001,China)

To investigate the anti-inflammatory effect of dandelion main efficacy components, the model of mouse xylene-induced auricle swell was established to screen dandelion anti-inflammatory ingredients of dandelion. Then the models of mouse xylene-induced auricle swelling, cotton-pellet granuloma of the mice and egg white-induced rat paw oedema were established to study the inhibition of dandelion anti-inflammatory ingredients on capillary expansion and permeability sthenia, oozy edema, white blood cell gathering, and fibrous tissue hyperplasia. Results show that the dandelion flavonoids was the main anti-inflammatory ingredients of dandelion. Dandelion flavonoids had great inhibitory effect on xylene-induced auricle swelling, cotton-pellet granuloma of the rat and egg white-induced rat paw models. In conclusion, dandelion flavonoids has remarkable anti-inflammatory effects in the animal models of both acute and chronic inflammation, and high dose group of dandelion flavonoids has the best anti-inflammatory effect.

Dandeloin; Flavonoids ; Swelling ; Inflammation ; Anti-inflammatory Corresponding author:ZHAO Xing-hua

2016-04-07

河北省高等学校科学技术研究优秀青年基金项目(YQ2013019)；河北省科技计划项目(13226624)

侯京玲(1986-)，女，硕士生，研究方向为中药药理学， E-mail: 15232973536@163.com

赵兴华，E-mail: dyzhaoxh@hebau.edu.cn

S853.7

文章编号：0529-6005(2017)03-0064-03