吉林省牛新孢子虫病流行病学调查

张贺洋， 刘晋宇， 凌芳芳 ， 兰 岚 ， 姜利建 ， 贾立军

(延边大学农学院动物医学系 ， 吉林延吉133002)

吉林省牛新孢子虫病流行病学调查

张贺洋， 刘晋宇， 凌芳芳 ， 兰 岚 ， 姜利建 ， 贾立军

(延边大学农学院动物医学系 ， 吉林延吉133002)

新孢子虫病(Neosporiasis) 是由犬新孢子虫(Neosporacaninum) 寄生于犬、牛、羊等多种动物细胞内而引起的一种原虫病。该病对牛的危害最为严重，能够感染各种奶牛、肉牛和黄牛，主要引起孕畜流产或死胎以及新生儿运动神经障碍等，从而造成经济价值降低和淘汰率升高。新孢子虫病呈世界性分布，美国、英国、澳大利亚、新西兰、日本等30多个国家都有发生，严重危害养牛业的健康发展[1]。我国多个省份和地区已报道该病的发生和流行[2-4]。近年来，新孢子虫病的流行区域逐渐扩大，已给养牛业发展造成了严重影响。为了解吉林省牛新孢子虫病的感染情况，本次调查采用间接ELISA方法对吉林省5个地区386份牛血清样品进行牛新孢子虫病的抗体检测，以期为该病的防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 血清样本 386份牛血清样本无菌采自吉林省梅河、松原、长春、吉林和延边5个地区养牛场。无菌分离血清，于-20 ℃保存备用。牛新孢子虫病阳性血清、阴性血清均由延边大学预防兽医学实验室制备、保存。

1.2 虫株与试剂 牛源犬新孢子虫延边株由延边大学预防兽医学实验室分离保存；辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗牛IgG为美国Sigma公司产品；其他试剂均为国产分析纯级。

1.3 血清样本检测 以待检血清样本和阴阳性对照样本为一抗，HRP标记的羊抗牛IgG为二抗，按已建立的间接ELISA方法[5]对386份牛血清样本进行新孢子虫病抗体检测。

1.4 统计分析 应用GraphPad Prism软件对检测结果进行不同养殖方式、不同品种及不同年龄段的统计学分析。

2 结果

2.1 不同地区的牛血清样本新孢子虫病感染情况调查 应用ELISA方法，对吉林省梅河、松原、长春、吉林和延边等5个地区386份血清样本进行了牛新孢子虫的抗体检测。结果，梅河、松原、长春、吉林和延边牛新孢子虫阳性率分别为19.67%、23.07%、10.53%、16.67%和26.60%(见表1)。结果说明吉林省的梅河、松原、长春、吉林和延边地区均为牛新孢子虫病的流行地区，其中延边地区流行最为严重。

表1 不同地区牛新孢子虫的感染情况

2.2 不同养殖方式的牛血清样本新孢子虫病感染情况调查 本次调查采用ELISA方法对放牧和舍饲饲养的386份牛血清样本进行了新孢子虫抗体检测，其中放牧饲养方式的阳性率为22.45%，舍饲饲养方式的阳性率为17.39%，平均阳性率为21.27%。经统计学分析，放牧和舍饲之间牛新孢子病感染率差异显著(P<0.05)(见表2)。

表2 不同养殖方式牛新孢子虫病感染情况

2.3 不同品种的牛血清样本新孢子虫病感染情况调查 本次调查采用ELISA方法对黄牛和奶牛的386份血清样本进行了新孢子虫抗体检测，其中黄牛的阳性率为21.42%，奶牛的阳性率为20.00%，平均阳性率为21.24%。经统计学分析，奶牛和黄牛之间牛新孢子病感染率差异不显著(P>0.05)(见表3)。

表3 不同品种牛新孢子虫病感染情况

2.4 不同年龄的牛血清样本新孢子虫病感染情况调查 本次调查采用ELISA方法对不同年龄段的386份牛血清样本进行了新孢子虫抗体检测，其中0～3岁的阳性率为18.36%，4～6岁阳性率为25.00%，合计阳性率为21.24%。经统计学分析，幼龄和中龄之间牛新孢子病感染率差异显著(P<0.05)(见表4)。

表4 不同年龄段牛新孢子虫病感染情况

3 讨论

近年来，新孢子虫病在我国的流行区域逐渐扩大，新疆、青海、河北、山东、北京、吉林、黑龙江等多个省、市、自治区都有牛新孢子虫病的报道[6]。2006年丁德等对吉林省的梅河、舒兰、珲春、双阳地区黄牛进行了新孢子虫病调查，其感染率最高为16.67%[7]。本次调查对吉林省5个地区的386份牛血清样本进行了检测，总体阳性率为21.24(82/386)，证实吉林省是牛新孢子虫病的流行区域，其感染率显著高于前期吉林省其他地区的调查数据，说明该病在吉林省的流行区域逐渐扩大，并呈现明显的上升趋势。

通过对386份牛血清样本的检测，其中延边地区牛新孢子虫病感染严重，长春地区感染率最低；不同养殖方式牛新孢子虫病感染率差异显著(P<0.05)，其中放牧牛新孢子虫病感染率高，这与虫体由卵囊传播有直接关系；不同年龄段牛新孢子虫病感染率差异显著(P<0.05)，其中成年牛感染率高，而犊牛感染率低，这可能与犊牛多以垂直传播为主，而成年牛多以水平传播为主有关；不同品种间牛新孢子虫病感染率差异不显著(P>0.05)，说明牛新孢子虫病感染与牛的品种无关，黄牛和奶牛均是易感动物。

由于人们对犬新孢子虫的生活史阐明的不够完全，感染途径仍不够清楚，因此对该病的防控缺乏有效措施。本次调查结果表明，吉林省是牛新孢子虫病的流行区域，尤其延边地区感染严重，此调查数据为吉林省新孢子虫病的有效防控提供了科学的流行病学资料。

[1] Reichel M P,Alejandra Ayanegui-Alcérreca M,Gondim L F,etal.What is the global economic impact of Neospora caninum in cattle-The billion dollar question[J].Int J Parasitol,2013,43(2):133-142.[2] 刘群，李博，齐长明，等.奶牛新孢子虫病血清学检测初报[J].中国兽医杂志，2003，39(2):8-9.

[3] 王春仁，李志莲，翟延庆，等.奶牛新孢子虫重组蛋白NcSRS2t间接ELISA方法的建立及初步应用[J].中国预防兽医学报，2009，31(2)：145-149.

[4] 闫双，陈亮，巴音查汗.牛新孢子虫病在新疆地区流行情况调查[J].黑龙江畜牧兽医,2012(10)：98-100.

[5] 贾立军，张守发，鲁承.犬新孢子虫可溶性抗原分析及间接ELISA检测方法的建立[J].中国兽医杂志，2009，45(9)：25-26．[6] 邹世颖，何倩妮，王小蕾，等.我国北方六省市牛新孢子虫病血清学调查[J].中国兽医杂志，2012,48(2):54-55.

[7] 丁德，于龙政，贾立军，等.吉林省部分地区黄牛新孢子虫病的流行病学调查[J].畜牧与兽医，2006，38(11)：34-36.

2016-03-11

国家自然科学基金(31160501;31360605)；吉林省重点科技攻关项目(20140204078NY)；吉林省教育厅重点项目[吉教科合字(2015)第1号]；吉林省自然科学基金项目(20160101201JC)

张贺洋(1986-)，女，硕士生，研究方向为动物疫病防制，E-mail：271555612@qq.com

贾立军，E-mail：lijunjia1015@sohu.com

S852.72+3

B

0529-6005(2017)03-0052-02