慢性乙肝患者血清补体C3、C4与肝炎分级程度以及肝纤维化程度的关系研究

郭飞波

(天门市第一人民医院检验科，天门431700)

慢性乙肝患者血清补体C3、C4与肝炎分级程度以及肝纤维化程度的关系研究

郭飞波

(天门市第一人民医院检验科，天门431700)

目的：研究血清补体C3及C4水平与慢性乙肝(CHB)患者肝炎分级程度及肝纤维化程度的关系。方法：收集2014年3月～2016年3月期间，我院收治的CHB患者185例作为CHB组，同期体检健康者60例作为对照组，检测并比较两组的血清补体C3、C4水平，并分析C3、C4与CHB肝炎G分级、肝纤维化S分级的关系。结果：CHB组的血清C3、C4水平显著低于对照组(t=10.476、9.172，P<0.05)；血清C3、C4水平在不同肝炎活动度之间比较差异显著(F=4.321、3.495，P<0.05)，在不同肝纤维化分级之间比较差异显著(F=3.861、4.541，P<0.05)；血清C3、C4水平与肝炎活动度G分级呈显著负相关性(r=-0.575、-0.542，P<0.05)，与肝纤维化S分级(≥S1)显著负相关性(r=-0.512、-0.636，P<0.05)。结论：血清补体C3、C4水平与CHB患者肝炎程度及肝纤维化程度密切相关，可作为CHB患者肝病理学状态的辅助预测指标。

慢性乙型肝炎；肝纤维化；肝炎炎症分级；补体

乙型肝炎病毒(HBV)感染所致肝炎是世界范围内最为常见的肝病类型之一，HBV感染后免疫逃逸，导致HBV持续存在而发生肝炎慢性化，还可进一步诱发肝硬化、肝衰竭甚至肝癌等，严重威胁患者的健康[1]。既往主要依靠肝组织病理学检查评价CHB患者的肝炎活动度及肝纤维化程度，但因肝活检创伤较大，且不便重复检查，临床应用具有一定的局限性。近年来，越来越多的学者致力于CHB肝炎活动度与肝纤维化程度的生物学标志物研究，发现血清补体C3、C4在不同肝损伤阶段具有特征性变化，可能对CHB病理学状态评估具有指导意义[2]。本研究检测分析了185例CHB患者不同肝炎分级与肝纤维化程度的血清补体C3、C4水平变化，旨在评估血清补体C3及C4检测对CHB患者肝炎分级程度及肝纤维化程度的预测及评估价值，为临床评价肝组织病理学状态提供无创性诊断指标。

1 资料与方法

1.1 资料 研究对象为2014年3月～2016年3月期间我院收治的CHB患者185例为CHB组，同期体检健康者60例对照组。CHB组中，男131例，女54例，年龄20～68岁，平均(40.32±5.43)岁。对照组中，男43例，女17例，年龄20～70岁，平均(37.89±4.98)岁。两组年龄、性别构成等经比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 病例选择

1.2.1.1 纳入标准 CHB组符合《慢性乙型肝炎防治指南》[3]中诊断标准；血清检查显示乙肝表面抗原(HBsAg)呈阳性，且持续时间>6个月；经超声或CT检查提示肝组织炎症性病变，经血生化检查显示血清白蛋白(ALB)降低、总胆红素(TBIL)升高、凝血酶原时间(PT)延长等；患者自愿参与本次研究，病例资料完整；具有完整的肝炎活动度评估与肝纤维化分级资料。

1.2.1.2 排除标准 甲型及丙型等其他类型肝炎病毒感染者；药物性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、脂肪肝以及肝癌患者；合并严重心肺功能不全、肾脏及血液系统疾病、大量腹腔内腹水、肝前腹水及过度肥胖者；妊娠期、哺乳期女性。

1.2.2 检查方法

1.2.2.1 病理学检查 CHB组患者在彩色多普勒超声引导下实施1 s快速经皮肝穿刺。采集≥1.5 cm长肝组织，标本包含至少3个汇管区。常规以10%甲醛液进行标本固定，石蜡包埋并连续切片，以HE以及网织纤维染色处理。由经验丰富的高年资病理学医师1名独立完成标本观察分析。参照《病毒性肝炎防治方案》[4]对肝炎活动度与肝纤维化程度进行分级，肝炎活动度包括G1-G4级，肝纤维化程度包括S0-S4级。

1.2.2.2 血清补体检测 所有受试者均在隔夜空腹>8 h后采集于次日清晨8:00～9:00采集空腹肘静脉血5 ml，3 000 r/min转速下离心10 min，分离血清，在1 h内完成检测。应用Beckman Coulter公司生产的Immage 800型免疫化学系统及其配套试剂，采用免疫比浊法进行血清补体C3、C4检测，正常参考值范围：C3为0.79～1.52 g/L，C4为0.16～0.38 g/L。

2 结果

2.1 CHB组与对照组的血清C3、C4水平比较 CHB组的血清C3、C4水平均较对照组显著降低(P<0.05)，见表1。

2.2 不同肝炎分级的血清C3、C4水平比较 不同肝炎分级的C3、C4水平比较差异显著，且随着分级升高呈现显著降低趋势(P<0.05)。C3与C4在相邻G分级之间比较，C3在G1与G2、G2与G3、G3与G4之间比较差异有统计学意义(t=2.057、2.330、2.682，P=0.042、0.021、0.010<0.05)，C4在G1与G2、G2与G3之间比较差异有统计学意义(t=4.334、3.587，P=0.000、0.000<0.05)，但在G3与G4之间比较差异无统计学意义(t=1.682，P=0.098>0.05)。见表2。

2.3 不同肝纤维化程度血清C3、C4水平比较 不同肝纤维化程度血清C3、C4水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。C3与C4在相邻G分级之间比较，C3在S0与S1、S1与S2、S0与S2之间比较差异无统计学意义(t=1.679、0.756、1.179，P=0.098、0.470、0.243)，在S1与S3、S1与S4之间比较差异有统计学意义(t=2.705、3.369，P=0.008、0.001>0.05)；C4在S1与S2之间比较差异无统计学意义(t=0.606，P=0.546>0.05)，在S0与S1、S0与S2、S1与S3、S4与S3之间比较差异有统计学意义(t=3.130、3.427、4.663、6.783，P=0.027、0.001、0.000、0.000<0.05)。见表3。

2.4 血清C3、C4与肝炎分级及肝纤维化程度的相关性 C3、C4与肝炎G分级和肝纤维化分级呈显著相关性(P<0.05)，见表4。

GroupsnC3C4CHBgroup1850.87±0.150.18±0.05Controlgroup601.12±0.190.26±0.08t10.4769.172P0.0000.000

InflammatorygroupnC3C4G1600.91±0.310.26±0.07G2670.82±0.170.21±0.06G3510.75±0.150.17±0.06G470.59±0.130.13±0.05F4.3213.495P0.0120.017

InflammatorygradingnC3C4S0240.80±0.230.18±0.06S1360.91±0.260.24±0.08S2470.87±0.240.23±0.07S3410.77±0.220.17±0.05S4370.73±0.220.14±0.04F3.8614.541P0.0150.009

表4 血清C3、C4与肝炎分级及肝纤维化程度的相关性

Tab.4 Correlation of serum C3 and C4 with hepatic grading and degree of hepatic fibrosis

ComplementGclassficationrPSclassfication(≥S1)rPC3-0.5750.011-0.5120.017C4-0.5420.015-0.6360.004

3 讨论

CHB患者的肝损伤与病毒变异及宿主免疫应答水平密切相关，尤其是与补体系统及细胞免疫状态关系密切。临床研究表明，HBV感染后所致肝炎、肝硬化等并非病毒直接损伤肝细胞所致，而是由于感染HBV后引起机体免疫功能紊乱而致病[2]。因此，免疫功能在CHB的发生及发展中具有重要作用，评价免疫功能状态对于CHB的防治及病情评估具有重要价值。

补体是一组存在于组织液及血清中的具有酶活性的球蛋白，在机体免疫调节、内环境维护及抗病原菌等生理过程中中具有重要作用，同时也具有免疫性病理损伤介导作用。补体系统主要包括30多种膜结合蛋白及可溶性蛋白，其中，以C3、C4最为重要，因其变化多与补体总水平呈平行状态，可直接反映机体补体系统功能状态，从而较为客观、准确地反映机体体液免疫功能[5]。临床研究表明，人体的免疫因子有超过90%源于肝脏，肝细胞是血液中大部分蛋白质的主要合成场所[6]。因此，在发生CHB后肝细胞损伤，势必影响补体C3、C4的合成，从而导致血清C3、C4水平降低。同时，HBV持续感染可引起机体免疫功能紊乱，导致补体系统激活，增加机体的C3、C4消耗量，也可导致血清C3、C4降低[7]。本研究结果显示，CHB组的血清补体C3、C4水平均较健康对照组显著降低(P<0.05)，与既往研究报道一致[8,9]，证实CHB患者具有补体合成紊乱，主要表现为血清C3、C4水平降低。

C3、C4是反应机体体液免疫的敏感指标，同时也是反映肝细胞损伤的主要指标之一，血清C3、C4水平降低多提示体液免疫异常及肝细胞受损[10]。何涛君等[11]研究表明，血清补体C3、C4与CHB严重程度及HBV-DNA呈密切相关，C3、C4水平越低，CHB病情越严重，HBV-DNA复制活跃性越高。本研究发现，随着肝炎分级程度的升高，血清C3、C4水平呈现显著降低趋势，C3与C4在相邻G分级之间比较，C3在G1与G2、G2与G3、G3与G4之间比较差异显著(P<0.05)，而C4在G1与G2、G2与G3之间比较差异显著(P<0.05)，且Spearman分析显示血清C3、C4与肝炎分级均呈显著负相关性(r=-0.542、-0.575，P<0.05)，C3与G分级的相关性高于C4，这与刘兴晖等[12]报道相似，证实血清补体C3、C4降低可能参与了HBV感染的慢性化过程及病理进展。Vasel等[13]研究显示，CHB肝硬化患者的血清补体C3、C4水平与Child分级呈显著负相关性，Child分级越高则血清C3、C4水平越低。国外研究报道显示，在肝硬化发生前，患者的血清C3、C4水平有轻度升高，发生肝硬化后显著降低，而进展至肝癌后呈显著升高趋势[14]。由此可见，血清补体C3、C4水平可随着HBV感染患者肝脏病理变化而波动。本研究中，肝纤维化S1期患者的C3、C4水平最高，而在S0期及S2-S4期均降低，但在S2时降低不明显，在S3、S4期时降低明显，可能是由于肝脏具有强大的储备功能，在发生肝纤维化后可代偿性地生成C3、C4，或肝炎活动可诱导肝细胞合成C3、C4，从而出现短暂性C3、C4水平升高。此外，C4仅在S1与S2中差异无统计学意义(P>0.05)，其余分级两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)；而C3仅在S1与S3、S1与S4之间差异有统计学意义(P<0.05)，相关性分析亦显示，≥S1与血清C3、C4水平呈显著负相关性，且C4与S分级的相关性高于C3，认为C4在S分级评估中更具价值。张占卿等[15]研究发现，CHB患者的血清补体C3、C4水平在肝炎活动度G1和肝纤维化S1期时最高，而此后均随着分期升高呈降低趋势，这与本研究基本一致。且其采用Wilks′ λ法逐步判别分析显示，CHB患者血清补体C3水平≥0.84 g/L时多提示肝炎程度为G1级，而当补体C3水平≤0.65 g/L时多提示G4级肝炎；血清补体C4水平 ≥0.18 g/L时多提示肝纤维化程度为S1期，而当补体C4水平≤0.14 g/L时多提示S4期肝纤维化。本研究中，G1级CHB患者的C3平均为(0.91±0.33) g/L，超过0.84g/L；G4时C3为(0.59±0.15) g/L；S1患者的C4水平(0.24±0.08) g/L，≥0.18 g/L，而S4患者的C4水平(0.14±0.05) g/L，≤0.14 g/L，与上述报道基本吻合。提示HBV感染后在发生显著肝炎活动期(G1)及肝纤维化初期(S1～S2)之前有一定程度的升高，而随着病情进展又将再度降低，C3、C4水平检测对中、重度肝脏炎症及肝纤维化具有较大的预测价值。

综上所述，CHB患者具有血清补体C3、C4异常变化，且随着肝脏炎症活动度以及肝纤维化程度的不同而变化，除在肝炎活动期(G1)及肝纤维化初期(S1-S2)之前有一定程度升高外，均随着病情进展具有显著降低趋势，血清C3、C4水平检测可能对中、重度肝炎、肝纤维化具有较高的预测价值，对病情评估、诊治决策及预后判断有所助益。

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[收稿2016-08-08 修回2016-08-25]

(编辑 许四平)

Research on relationship between serum complement C3,C4 and hepatitis grade level and liver fibrosis degree in patients with chronic hepatitis B

GUOFei-Bo.

DepartmentofClinicalLaboratory,TianmenFirstPeople′sHospital,Tianmen431700,China

Objective:To investigate the relationship between serum complement C3,C4 and hepatitis grade level and liver fibrosis degree in patients with chronic hepatitis B(CHB).Methods: 185 cases of patients with CHB admitted in our hospital from March 2014 to 2016 March were collected as CHB group,60 cases who were considered healthy at the same period as the control group.The serum complement C3,C4 of the two groups were detected and compared,and relationship between serum complement C3,C4 and hepatitis grade level and liver fibrosis degree was analyzed.Results: The serum C3,C4 levels in CHB group were significantly lower than the control group (t=10.476,9.172,P<0.05).The differences of serum C3,C4 levels among different levels of hepatitis activity were significant (F=4.321,3.495,P<0.05),and differences among different levels of hepatic fibrosis grading were significant (F=3.861,4.541,P<0.05).The serum C3,C4 levels were negatively associated with G rating of hepatitis activity(r=-0.575,-0.542,P<0.05),and were negatively associated with S rating (≥S1) of liver fibrosis (r=-0.512,-0.636,P<0.05).Conclusion: The serum complement C3,C4 levels is closely related with hepatitis grade level and liver fibrosis degree in patients with CHB,it can be used as secondary predictors of hepatic pathological status in CHB patients.

Chronic hepatitis B;Liver fibrosis;Hepatic inflammation grade;Complement

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.03.023

郭飞波(1980年-)，男，硕士，主管检验师，主要从事病毒免疫分子病毒方面的研究，E-mail：guofeibo@126.com。

R575.1

A

1000-484X(2017)03-0426-04