烧伤创面治疗中透明质酸钠对磺胺嘧啶银药物毒性影响的研究

段辉辉，王 瑞

•基础研究•

烧伤创面治疗中透明质酸钠对磺胺嘧啶银药物毒性影响的研究

段辉辉，王 瑞

(西安交通大学医学院第一附属医院整形美容颌面外科 陕西 西安 710061)

目的：将透明质酸钠与磺胺嘧啶银制成混合剂，用于对大鼠烧伤创面模型的治疗，对照分析，进而评估联合用药的安全性。方法：采用大鼠制作烧伤动物模型，随机均等分为实验组、对照组。对照组烧伤创面外涂磺胺嘧啶银，实验组大鼠创面外涂混合制剂（磺胺嘧啶银和透明质酸钠），采用暴露疗法，每天处理创面，周期21d，分别于涂药后的3d、5d、7d、10d、14d、21d分批处理老鼠，每批每组各5只，断头采血，进行肝肾功能测定，记录、分析所得数据，计量资料组间对比，使用SPSS统计学软件行统计学分析。结果：混合制剂组第3、5、7、10、14、21d所提取的血浆中肌酐、尿素氮、丙氨酸氨基转移酶浓度与磺胺嘧啶银组差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：透明质酸钠与磺胺嘧啶银在创面的联合应用，且并未出现明显肝肾功能损害表现。

烧伤创面；新型制剂；磺胺嘧啶银；透明质酸钠；药理学

磺胺嘧啶银(Silver sulfadiazine 简写为SD-Ag)，化学式C10H9O2N4Sag，属于国内外烧伤创面治疗的一线药物[1]，同时具有银离子和磺胺的抗菌作用。磺胺类药物种类繁多，例如磺胺嘧啶锌、磺胺嘧啶银、磺胺嘧啶铜等，在各种烧创伤创面、皮肤黏膜感染创面的治疗中，疗效显著[2-5]，抗菌活性广谱而强大，临床治疗中，对于脑膜炎球菌，肺炎球菌，淋球菌，溶血性链球菌等感染引起的疾病均有效，体外实验证明对沙眼衣原体、疟原虫、弓形虫等也有效[6]。磺胺嘧啶在结构上近似对氨基苯甲酸，可对二氢叶酸合成酶产生竞争性抑制，从而导致细菌合成叶酸障碍，进而影响DNA和RNA的合成代谢，抑制细菌生长繁殖[7]。此外，随着各个学科的交叉学习及研究，更多的学者把磺胺嘧啶银成功推广应用在其他领域，例如糖尿病足、溃疡、褥疮、唇炎等[8-9]，均取得良好效果，未发现明显毒副作用。有另有报道称，将磺胺嘧啶银用于治疗大疱性表皮坏死松解型药疹[10]、宫颈上皮内瘤变[11]，取得一定疗效。磺胺嘧啶银应用于治疗烧伤创面时仍有一定的毒副作用，包括对外周血细胞及肝肾功能的影响，曾有体外实验证实，磺胺嘧啶银会对大鼠及人的骨髓细胞产生抑制作用[12]。透明质酸（Hyaluronic acid，HA），（βl-4）D-葡萄糖醛酸和（β-l-3）N-乙酰基-D-氨基葡萄糖交联形成的粘多糖，结构独特，人体内组织细胞及间质的重要组分之一。人体内含量巨大，皮肤软组织、关节液、玻璃体等组织中均大量存在[13-15]，是最主要的组织细胞形成、构建、生长发育的基质成分，改善皮肤的营养，调控分解代谢，调节皮肤组织的成熟、老化过程，减少皱纹，维持其饱满、光滑的质感，保持水分[16]。在生物医药领域，透明质酸被大量合成及广泛应用，多用于眼科手术[17]、外科手术术中术后预防粘连[18]、关节炎的治疗、药物缓释剂等方面，疗效显著，经济效益前景乐观。透明质酸钠（SH）即透明质酸的钠盐，实验证明二者作用基本等同。有动物实验表明，在治疗烧伤创面时，将透明质酸钠与磺胺嘧啶银联合应用，既可以发挥自身保湿、抗菌、促进愈合、减轻瘢痕等作用，又能提高磺胺嘧啶银的药物疗效及稳定性，从而起到协同作用，加速了创面的愈合速度，并提高愈合质量[19]。本实验旨在研究当二者联合使用在治疗烧伤创面时，实验动物肝肾功能是否出现明显损害，以评估透明质酸钠对磺胺嘧啶银药物毒性的影响，进而评估其联合使用的安全性，指导新药的研发。

1 材料和方法

1.1 模型建立：选取SD大鼠60只，体重为200～220g，雌雄各半。随机均等分为实验组、对照组。常规适应性饲养2d，使用水合氯醛（浓度为5%）腹腔内注射麻醉（20mg/kg），再使用手术刀在大鼠脊柱两侧行剃毛处理，继续饲养12h后开始进行试验，首先使用同样方法对实验大鼠进行注射麻醉，使用自制烧伤仪（95℃、2.0kPa压力、持续时间约10s），在大鼠背部脱毛区制作深Ⅱ°烧伤创面，直径1.5cm，创面数量为5个（图1）。

图1 大鼠烧伤创面模型

1.2 给药方法：对照组中的实验鼠背部烧伤创面外涂磺胺嘧啶银（混悬液）治疗；实验组中的大鼠创面外涂磺胺嘧啶银和透明质酸钠混合制剂（混悬液）治疗。创面暴露，无使用纱布等敷料，每天均行创面处理，适度清创并涂药一次，实验周期为连续21d（创面用药情况如图2所示）。

图2-1 实验组大鼠烧伤创面模型（涂药后3d）

图2-2 对照组大鼠烧伤创面模型（涂药后3d）

图2-3 实验组大鼠烧伤创面模型（涂药后10d）

图2-4 对照组大鼠烧伤创面模型（涂药后10d）

图2-5 实验组大鼠烧伤创面模型（涂药后21d）

图2-6 对照组大鼠烧伤创面模型（涂药后21d）

1.3 取材方法：分别于实验开始3.5.7.10.14.21d取材，断头采血。

1.4 统计方法：levene检验方差齐性，计量资料组间对行t检验，P＞0.05提示差异无统计学意义。

2 实验结果

2.1 实验中在不同时间点取样后血液肌酐浓度检测结果对照图表如下（表1、图3-1）levene检验提示方差齐，F=1.19，P=0.22，计量资料组间对行t检验，P=0.15（P＞0.05提示差异无统计学意义），由此证明实验组创面外用磺胺嘧啶银及透明质酸钠后，与对照组相比，血液中肌酐含量改变不明显。

2.2 实验中在不同时间点取样后血液尿素氮浓度检测结果对照图表如下（表2、图3-2）levene检验提示方差齐，F=1.36，P=0.32，计量资料组间对行t检验，P=0.21（P＞0.05提示差异无统计学意义），由此证明实验组创面外用磺胺嘧啶银及透明质酸钠后，与对照组相比，血液中尿素氮含量改变不明显。

表1 两组血液标本中肌酐浓度随时间变化比较 （μmol/L,x¯±s，n=5）

表2 两组血液标本尿素氮浓度随时间变化比较 （mmol/L，x¯±s，n=5）

表3 两组血液标本丙氨酸氨基转移酶浓度随时间变化比较 （U/L，x¯±s，n=5）

图3-1 血液肌酐浓度对比图

图3-2 血液尿素氮浓度对比图

图3-3 血液丙氨酸氨基转移酶浓度对比图

2.3 实验中在不同时间点取样后血液丙氨酸氨基转移酶浓度检测结果对照图表如下（表3、图3-3）levene检验提示方差齐，F=1.23，P=0.29，计量资料组间对行t检验，P=0.24（P＞0.05提示差异无统计学意义），由此证明实验组创面外用磺胺嘧啶银及透明质酸钠后，与对照组相比，血液中丙氨酸氨基转移酶含量改变不明显。

3 讨论

透明质酸钠与磺胺嘧啶银在烧伤创面治疗中联合应用时，且并未出现明显的肝肾功能损害毒副作用增加表现。磺胺嘧啶银和透明质酸钠在临床治疗领域的功效和地位已经得到时间的检验和肯定。磺胺嘧啶银化合物本身同时具有银离子和磺胺嘧啶两者的作用，最突出的特点即为广谱抗菌活性，对多数细菌、真菌、绿脓杆菌等有着良好的抗菌作用及很强的抑制作用，当在伤口及创面外用磺胺嘧啶银时，还可以促进创区干燥、结痂、愈合。这些特点及优势在对烧伤创面治疗的应用当中充分显现出来，但在长期的临床使用及观察中发现，药物本身还存在一些不足之处。透明质酸（HA）由D-葡糖醛酸和N-乙酰葡糖胺组成，含有二糖单元，属于酸性粘多糖，透明质酸因为其独特分子结构和与生俱来的物理化学性质故而独具特性，生理功能非常重要，是到目前为止，自然界天然形成的最佳保湿物质。透明质酸以基质成分广泛存在于人体组织中，组织细胞形成、构建、生长发育的基质成分，人体的各个部位包括结缔组织、上皮组织、神经组织等，均含量丰富。两者联合使用对动物模型创面的愈合功效明显增强，且并未发现明显毒性反应增加，但对于如何得到最佳效果，两种药物成分的配比、剂型仍有待进一步研究。

[1]陈煜.磺胺嘧啶银的研究进展[J].中国现代药物应用,2013,23(7):224-225.

[2]汪倩.复方磺胺嘧啶锌凝胶与传统硫酸镁湿敷治疗渗透性静脉炎的疗效对比[J].中华损伤与修复杂志,2014,9(6):660-661.

[3]杨伯明.湿润烧伤膏与磺胺嘧啶银霜在烧伤创面修复中的疗效比较[J].药物与临床,2011,8(26):83-84.

[4]张友智,赵瑛.磺胺嘧啶铜对实验性口腔黏膜溃疡的药效学[J].中国医院药学杂志,2007,27(8):1055-1056.

[5]曾秀育,宋知仁,刘杰.复发磺胺嘧啶锌涂膜、湿润烧伤膏用于烧死创面效果对比观察[J].临床军医杂志,2007,35(4):506-507.

[6]许丽芳,杨秋林,曾桥,等.阿奇霉素、红霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫作用的研究[J].右江民族医学院学报,2004,(2):157-158.

[7]Naturally occurring oxygen heterocyclics.IX.1.isolation and characterization of geniPin2[J]. J Organic Chem,1960,25 (12): 4076-87.

[8]林忠,周国宁,林丽.芦荟与磺胺嘧啶银临床治疗褥疮的比较研究[J].重庆医学,2014,43(19): 2500- 2501.

[9]刘艳萍,田松波.磺胺嘧啶银敷料联合高压氧治疗老年糖尿病足溃疡的临床疗效及机制[J].中国老年学杂志,2014,34(7):3894-3895.

[10]王旭东,魏生明,于承新,等.磺胺嘧啶银在大疱性表皮坏死松解型药疹中的应用[J].河北医学,2007,13(4):425-426.

[11]陈建梅,葛彦欣,咸保花.阴道镜引导下射频消融联合磺胺嘧啶银粉治疗宫颈上皮内瘤变的疗效观察[J].现代预防医学,2008,35(22):4528-4530.

[12]Viala J,Simon L,Le Pommelet C,et al.Agranulocytosis after aPPlication of sliver sulfadiazine in a 2 month old infant [J].Arch Pediatr,1997,4(11):1103-1106.

[13]Baumann L.Dermal fillers [J].Cosm Derma,2004,4:249-250.

[14]Hollander DA,Schmandra T,Windolf J.A new aPProach to the treatment of recalcitrant wounds:a case rePort demonstrating the use of a hyaluronan ester fleece [J].Wounds,2000,12:111-115.

[15]Maitre S,Jaber K,Perrot JL,et al.Increased serum and urinary levels of silver during treatment with toPical silver sulfadiazine [J].Ann Dermatol Venereal,2002,129(2):217-219.

[16]宋斌,刘进辉,李明华.A型肉毒素联合透明质酸在眼周年轻化治疗的疗效观察[J]中国医疗美容,2014,5(5):29-30.

[17]鞠凤阁,朱照静,马俐丽.透明质酸钠对眼用温度敏感原位凝胶体外释放和粘附力的影响[J]中国新药杂志,2009,18(13): 1237-1238.

[18]王莲莲,曹霞.几丁糖和透明质酸钠防粘连材料在妇产科的应用[J].中国组织工程研究,2012,16(47):8923-8925.

[19]赵永德,田洪根,丁长玲,等.HPLC法测定复方磺胺嘧啶银混悬液中2种组分的含量[J].中国药房,2013,24(9):816-817.

Studies on the Effects of Sodium Hyaluronate on the Pharmacological and Toxicological Effects of Silver Sulfadiazine in Burn Wound Healing

DUAN Hui-hui,WANG Rui
(Department of Plastic and Maxillofacial Surgery,the First Affiliated Hospital to the Medical School,Xi'an Jiaotong University,Xi’an 701161,Shaanxi,China)

Objective To analyze the safety of a combined mixture (hyaluronic acid sodium and silver sulfadiazine ) for the treatment of burn wounds in the rat model.MethodsThe rat models of burn injury were established. Then models were randomly divided into two groups, the experimental group and the control group. The control group was treated with silver sulfadiazine, and the experimental group was treated with the mixture of sulfadiazine silver and sodium hyaluronate for 21 days. Tissue samples were obtained at day3, day5, day7, day10, day14, and day21. The function of the liver and kidney were tested and record. Data were analyzed with SPSS.ResultsThe plasma concentration of creatinine, urea nitrogen and alanine aminotransferasee has no significant difference between the two groups (P＜ 0.05).ConclusionThere was no obvious liver and kidney damage in the combined application of sodium hyaluronate and silver sulfadiazine.

burn wounds; new preparations; silver sulfadiazine; hyaluronic acid sodium; pharmacology

R644

A

1008-6455（2017）02-0065-03

2016-10-16

2016-12-28

编辑/张惠娟

基金名称：西安交通大学第一附属医院临床研究资助课题（2013YK37）

王瑞，1979-，男，汉族，陕西西安人，硕士研究生学历，主治医师，主要从事整形美容烧伤专业研究；E-mail:wangrui2133@sina.com