鸡大肠杆菌对12种抗菌药的药敏试验

杨立 姚小青 陈海婷/常州市金坛区金城兽医站

鸡大肠杆菌对12种抗菌药的药敏试验

杨立 姚小青 陈海婷/常州市金坛区金城兽医站

鸡大肠杆菌病一年四季均可发生，但以冬春寒冷和气温多变季节多发。在自然条件下，本病可发生于各种年龄的鸡，但多发生于雏鸡，特别是3～6周龄内的雏鸡最为易感。发病率一般在30%～69%之间，死亡率42%～75%，致死率可高达100%。随粪便污染蛋壳的E.coli可感染鸡胚，造成鸡胚在孵化期死亡。或者被感染的鸡胚虽可孵出雏鸡，但在第1周内即死于脐炎或以卵黄感染而引起生长缓慢。一般情况下，养殖场的大肠杆菌病可通过呼吸道感染而引起。本病常与某些细菌及病毒同时感染。传染源主要是被上述血清型的致病病性E.coli所污染的卵、病鸡及其分泌物、排泄物，被污染的饲料、饮水、垫草和尘土等。感染途径为消化道和呼吸道，鼠和臭虫是该病病原体的携带者。

一、临床症状

病禽精神不振，不爱活动，常呆立于禽舍一隅，羽毛松乱，两翅下垂，食欲减少等一般性病状。由于大肠杆菌病的临诊病型不同，可以出现肠炎、败血症、呼吸道炎、输卵管炎、眼炎、关节炎、神经症状、肿头综合征等为主的相应的症状。如鸡发生气囊炎时，则见病鸡呼吸困难，咳嗽，有罗音，羽毛松乱，精神差，食欲减少，肉仔鸡则增重缓慢。肠炎型病鸡除见一般病状外，主要是拉稀，消瘦，最后衰竭死亡。关节炎时，则见关节肿大，跛行。眼炎时，则见流泪，结膜潮红，角膜混浊，有脓性分泌物，瞳孔缩小，重者眼前房破溃，失明。神经型（脑型）病鸡。1986年广东省首次报道了大肠杆菌引起的脑炎（现国内已有多次报道），除一般病状外，主要症状是昏睡及神经紊乱，歪头、斜颈，转圈，共济失调，抽搐等神经症状，以及下痢。除以上原发性感染时的病型外，如有继发或并发病时，则有其相应的病状。

二、药敏试验

本文就金坛地区3个鸡场5周龄鸡发生本发生的以精神不振，采食减少、拉稀等为病症，部分死亡，剖检有疑似大肠杆菌病的病例进行病原分离鉴定，从分离出的菌株中挑选9株进行药敏试验，旨在为鸡大肠杆菌病的诊断和治疗提供参考。现将实验方法和结果报告。

三、试验方法和结果

（一）细菌的分离和培养

剖解病鸡观察病变，取病变部位（如肝、小肠）进行细菌的分离。用灭菌的接种环挑取部分组织在麦康凯培养基进行三区划线。37℃培养24 h，观察时候有单个红色菌落，同时取一小部分组织放到LB液体培养基，37℃培养24 h进行增菌。如麦康凯培养基没有形成菌落，用LB培养的菌液在麦康凯培养基进行三区划线，37℃培养24 h观察是否形成单个红色菌落。

（二）细菌的药敏试验

对分离的细菌进行药敏试验，采用纸片扩散法。在“超净台”中，用经酒精灯火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌均匀涂布到麦康凯琼脂平板上。

用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的二分之一。然后，找到第二点划线至平皿的二分之一，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。

将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，去药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。将平皿培养基置于37℃温箱中培养24 h后，观察效果。

（三）药敏试验结果

判定标准：抑菌圈直径（φ）≥18 mm为高度敏感；抑菌圈直径18 mm＞（φ）≥14 mm为中度敏感；抑菌圈直径14＞（φ）≥10 mm为低度敏感；抑菌圈直径10 mm＞（φ）为耐药。

四、讨论

此项试验结果证实：不论是标准菌株还是所分离的大肠杆菌对安普霉素、阿米卡星具有高度敏感性；新霉素、庆大霉素、头孢噻肟钠、恩诺沙星、环丙沙星敏感性居中；而对氟苯尼考、环丙沙星、复方新诺明、头孢氨苄抑菌作用较低，甚至已产生耐药性。安普霉素、阿米卡星、庆大霉素及新霉素均为氨基糖苷类抗生素，对金葡菌、绿脓杆菌、大肠杆菌及变形杆菌等均有效。此项试验证实：氨基糖苷类抗生素不仅对标准菌株具有较强的抗菌活性，而且对各种临床菌株也具有较强的抗菌活性。掌握鸡致病性大肠杆菌的耐药情况，通过药敏试验寻找疗效最好的药物，是解决大肠杆菌病的主要手段。