如何利用唾液对猪蓝耳病进行监测与驯化

黎先伟 编译 By Piotr Biernacki

如何利用唾液对猪蓝耳病进行监测与驯化

黎先伟 编译 By Piotr Biernacki

到目前为止，猪繁殖与呼吸综合征（又称猪蓝耳病，PRRS）仍是全球养猪业中的一种头号疾病，严重阻碍仔猪和生长育肥猪的生长性能，同时严重影响种猪群繁殖性能的稳定性，给养猪场造成巨大的经济损失。虽然大量研究已对猪蓝耳病（PRRS）的流行特定和发病机理有了一定的认识，但是对于全球的众多养猪场来说，要想成功的控制猪蓝耳病（PRRS）仍然面临着严峻的挑战。通常来说，猪蓝耳病（PRRS）的有效控制需要把完善的生产管理措施（如适当的生物安全措施、全进全出和单向猪群流动）和疫苗接种方案相结合。猪群感染或接种猪蓝耳病活病毒（弱毒）并产生高水平的抗体后，对日后再感染同源性高的猪高致病性蓝耳病病毒具有较好保护效果。但是，由于猪蓝耳病病毒（PRRSv）是单链的RNA病毒，其要比其他DNA病毒（如猪伪狂犬病毒）更容易发生重组变异，因此，疫苗毒株往往与田间分离野毒株，在同源性方面存在一定的差异。猪蓝耳病病毒（PRRSv）的这种特性使得一些养猪场在接种疫苗后仍不能很好的控制猪蓝耳病（PRRS），这种情况很大程度上归因于猪场并没针对自身的实际情况选择合适的（安全性好、同源性高的）猪蓝耳病疫苗。目前，市面上猪蓝耳病活病毒疫苗的毒株多达7种，这给养猪户在疫苗的选择上带来很大的烦恼，以至于很多猪场利用药物来替代接种疫苗，而这往往更不能达到防控猪蓝耳病（PRRS）的预期效果。另一方面，定期的对猪群进行病原（猪蓝耳病病毒）检测可清楚的掌握猪场内病原的实际状况，了解场内猪蓝耳病的主要流行毒株及变异程度，同时有助于我们选择合适的疫苗来更好地防控猪蓝耳病。

本文主要阐述如何使用唾液来在后备母猪的驯化过程中进行猪蓝耳病（PRRS）的控制。

自从2015年下半年以来，全国的猪价行情一直维持在较高的水平，养猪人迎来了前所未有的春天。在这波行情下，一些猪场会选择扩大自家的饲养规模，从生物安全和疫病防控来说，通过自繁自养的方式来逐步扩增母猪群的数量是最为理想的，不过这需要耗费较长的时间。因此，很多人会选择从一些知名的种猪场来选购后备母猪来快速扩增自家猪场的饲养规模。众所周知，猪场在引入后备母猪之前有两个重要的步骤是必不可少的，即后备母猪的隔离和驯化。隔离的主要目的是为了防止外来疫病通过新引入的后备母猪感染原有的经产母猪。一般建议隔离的时间应达到20～45 d。而后备母猪驯化则是通过一定时间让后备母猪熟悉本场经产母猪的环境，包括内环境和外环境。一般普遍认为，后备母猪驯化的时间应至少持续60～120 d。在这段时间里，我们可以让这些动物接触感染猪场内已有的病毒（如蓝耳病）和其他病原菌。要想打破经产母猪的病毒循环，首先第一步是要使用已接触蓝耳病病毒（PRRSv，疫苗毒或弱毒）且早已产生坚强免疫力的动物来替代原有的动物。这主要的目标是让所有新引入的动物感染猪场内特定的蓝耳病病毒（PRRSv），值得注意的是确保后备母猪在混入经产母猪之前已产生足够的抗体保护水平。因此，针对抗原和抗体的检测均显得尤为重要。

据大量的研究证实，猪蓝耳病病毒（PRRSv）可在多种不同类型的样品中检测到，包括肺脏、扁桃体、血液、精液、尿液、粪便、常乳、初乳和唾液等。在国外一些国家，部分养猪场会选择让后备母猪人工感染猪蓝耳病病毒（PRRSv），即让后备母猪直接接触PRRSv阳性猪的排泄物，或反饲。值得注意的是，猪蓝耳病病毒（PRRSv）的排毒时间可长达99天。因此，采取这种人工感染措施的前提是，必须清楚了解自家猪群的实际病原感染状态，真正做到针对性的驯化过程。

图1 唾液收集的工具一次性手套、棉绳和连有塑料袋的胶管

在一个PRRSv阳性群体的情况下，采用唾液收集的方法可能会增加病毒（PRRSv）从经产母猪传递给后备母猪的可能。该方法的基础是从处于病毒血症的猪群中收集唾液。为了确定病毒（PRRSv）的类型，重要的是将收集的唾液进行分子生物学（PCR）检测，以鉴别猪场内主要流行的病毒（PRRSv）毒株。为了达到这个目的，我们可以采用血清或唾液样本从不同年龄段具有代表性的几栏猪中进行取样。检测结果将表明，猪蓝耳病病毒（PRRSv）在哪个年龄段的猪群中较为活跃（不稳定）。当确定具有病毒血症的猪群后，我们可以从特定年龄段的几栏猪群中收集唾液样本来进行下一步的驯化工作。

对于唾液的收集，我们可以使用一条棉绳，直径1.5～2 cm，将其悬挂在远离饮水器的位置，以免水浸泡绳索影响唾液收集的效果。通常来说，一条棉绳在栏舍内悬挂20～30 min就足够让一栏（约20头左右）内的每个动物啃咬棉绳。而对于更大的动物群体，则需要适当悬挂更多的棉绳。这将增加栏舍内虚弱和发病动物啃咬棉绳的机会。越多的动物啃咬到棉绳，病毒传播的机会就越大。20～30 min后，将棉绳收集起来并及时悬挂在后备母猪的栏舍内。动物都应该被这些新奇且具有特殊气味的物体所吸引。我们应该可以观察到，是否大多数后备母猪都有机会啃咬到棉绳。在某些情况下，即便个别猪会对这些棉绳不感兴趣，但是在短时间内同圈的其他猪也会水平感染这些猪，让全部动物都感染上特定的猪蓝耳病病毒（PRRSv）。最理想的状态是让疫苗毒株成为猪场的优势毒株，而野毒株则控制在可控的范围之内。

图2 断奶仔猪在啃咬棉绳

图3 后备母猪对这新奇的物体很有兴趣

要想验证这种方法是否成功，我们建议在后备母猪驯化结束后进行血清学的检测，并可通过收集唾液样本进行PCR检测，以确保动物不再排泄与本场不同的野毒株。要明白，新引入的后备母猪仍然继续排泄与本场不一样的野毒株，整个猪群可能会使陷入不稳定的状态，造成更为严重的损害。如果对新引入后备母猪的病毒水平监测失败的话，那么之前所做的隔离驯化工作将功亏一篑。

总的来说，将新引入后备母猪针对猪蓝耳病病毒（PRRSv）进行一致的驯化，可显著的保证种猪群临床症状的稳定，生产参数的优化，并可获得高健康水平的断奶仔猪。因此，对于引入后备母猪来说，完善的管理措施以及正确的免疫方案和检测手段将是控制猪蓝耳病病毒（PRRSv）的。与此同时，基于其方便性和实用性，唾液样本将会是日后检测各种病原（包括猪蓝耳病病毒）的一种有力工具。