脓毒血症患者血清IL-6以及IL-10的表达及对免疫功能的影响

赵雪峰,魏秀华

(天津市第五中心医院 重症医学科,天津300450)

脓毒血症患者血清IL-6以及IL-10的表达及对免疫功能的影响

赵雪峰,魏秀华

(天津市第五中心医院 重症医学科,天津300450)

目的 探讨脓毒血症患者血清IL-6以及IL-10的表达及对免疫功能的影响。方法 选择2013年6月-2015年6月在我院重症医学科(ICU)收治的50例脓毒血症患者为实验组，2015年1月-2015年6月来我院体检的健康人群50例为对照组，检测两组血清IL-6、IL-10以及T细胞亚群水平；分析IL-6、IL-10水平与CD4+/CD8+比值的相关性。结果 实验组患者血清IL-6以及IL-10水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，实验组CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+均有不同程度降低，差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果显示，IL-6、IL-10水平与CD4+/CD8+比值均呈显著负相关 (r分别为-0.328,-0.452；P均<0.05)。结论 脓毒血症患者血清中IL-6和IL-10水平呈高表达、T细胞亚群呈低表达，且三者间具有协同作用，可以共同促进病变的进展。因此，在早期阶段检测IL-6、IL-10及T淋巴细胞亚群可以作为早期诊断脓毒血症的指标，对于疾病的预后判断也有一定的指导意义。

脓毒血症；IL-6；IL-10；免疫功能

(ChinJLabDiagn,2017,21:0279)

脓毒血症是一种常见的感染性、多器官损伤的疾病，是由于患者继发感染后，由多种炎症介质参与的一种全身性综合性疾病，可以引起休克、多脏器功能障碍综合征(MODS)，是导致危重患者死亡的主要原因之一[1]。早期诊断脓毒血症，可以及早的治疗患者，降低病死率。因此，寻找一种可以早期诊断脓毒血症，并预测MODS发生的监测指标，是急救医学学者们研究的热点问题。研究表明[2,3]，在脓毒血症发生、发展是过程中，患者不仅仅处于免疫细胞过度激活的状态，它经历了多个环节，包括免疫激活、免疫抑制以及免疫类型转化等。发生脓毒血症后，患者体内的免疫细胞可以分泌大量的细胞因子，在这些细胞因子中，促炎因子IL-6和抑炎因子IL-10在免疫调节反应中具有十分重要的临床意义[4,5]。2013年6月-2015年6月，我们检测了脓毒血症患者血清IL-6、IL-10的表达，旨在探讨上述指标在脓毒血症中的变化及其对免疫功能的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

实验组为2013年6月至2015年6月在我院重症医学科(ICU)收治的脓毒血症患者50例。所有患者均符合《2001年国际脓毒血症定义会议关于脓毒血症诊断的新标准》[6]。排除各类自身免疫性疾病、HIV感染、急性心脑血管疾病、病毒性感染以及6个月内使用过影响免疫功能的药物等的患者。其中男27例，女23例；年龄34-76岁，平均年龄(60.4±10.5)岁；发病原因：肺部感染24例，腹腔感染10例，胰腺炎8例，术后5例，其它3例。对照组为2015年1月-2015年6月来我院体检的健康体检者50例。其中男26例，女24例；年龄32-73岁，平均年龄(60.3±9.4)岁。两组年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 检测方法

在体检者体检当日以及脓毒血症患者确诊后，抽取所有研究对象空腹静脉血5 ml，置于无抗凝剂的真空采血管内，充分摇匀，在4℃、3 000 r/min条件下离心10 min，取上层血清，采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测IL-6及IL-10的含量。试剂盒均购自武汉博士德生物技术有限公司，雷杜RT-6000酶标仪购自深圳市雷杜电子有限公司。EPIC-SXL-MCL流式细胞仪测定T细胞亚群，试剂盒采用美国Becton Dickinson公司生产的CD3-PE-CY5、CD4PE、CD8PE试剂盒。

1.3 质量控制

为了保证研究资料以及数据的准确性、可靠性，在研究过程中，我们采取了一系列的质量控制措施，具体包括：(1)由我院ICU具有丰富临床经验的医师严格根据脓毒血症的诊断以及排除标准确定入选病例；(2)所有参与研究的人员均经经过统一的技术培训；(3)选用准确的测量仪器，并在进行检测进行质控；(4)检测指标均分别采用双份血清进行检测；(5)实验过程由专业的技术人员进行指导，严格按照操作规范以及试剂说明书进行，安排专人监督加样、配样过程；(6)所有数据资料均由双人独立录入数据库中，安排专人核对所录入的数据。

1.4 观察指标

比较两组血清IL-6及IL-10水平；外周血CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+比值；分析IL-6、IL-10水平与CD4+/CD8+比值的相关性。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 两组血清IL-6及IL-10水平比较

如表1所示，实验组患者血清IL-6及IL-10水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 两组血清IL-6及IL-10水平比较

注：*两组间比较P<0.05。

2.2 两组免疫功能比较

如表2所示，与对照组比较，实验组CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+均有不同程度降低，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 两组免疫功能比较

注：T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+单位为：个/μl；*两组间比较P<0.05。

2.3 IL-6、IL-10水平与CD4+/CD8+比值的相关性分析

相关分析结果显示，IL-6、IL-10水平与CD4+/CD8+比值均呈显著负相关(r分别为-0.328,-0.452；P均<0.05)。

3 讨论

脓毒血症是继发于各种严重疾病后常见的并发症，比如烧伤、严重创伤、感染、休克、以及各种大手术后等，患者并发脓毒血症后的预后差、住院时间长、病死率较高。目前，有关脓毒血症的发病机制尚未明确，研究认为[7,8]，在脓毒血症的发生和发展过程中，炎症反应和免疫功能紊乱发挥着至关重要的作用。一般认为，各种炎性反应介质的释放、转运和堆积是脓毒血症和(或)向MODS恶化的关键的原因之一。此外，机体的免疫状态也在脓毒血症的发生、发展以及转归中起着重要的作用，在抗感染免疫中辅助性T细胞释放的细胞因子和T淋巴细胞分化、增殖、合成以及分泌的细胞因子起着重要的作用[9]。

IL-6是重要的炎性因子，主要由表皮细胞和单核巨噬细胞表达，在抑制机体炎症反应、引发炎症发生等方面均可起到重要的作用，在严重损伤以及组织修复的过程中也起着十分重要的作用[10,11]。IL-10是由B细胞刺激激活的一种内源性抑炎因子，由T细胞、B细胞和巨噬细胞产生，可以抑制免疫应答[12]。IL-6、IL-10等炎症因子的过量释放表达，可能是引起ALI/ARDS，甚至发生难以控制的MODS的重要机制之一。本次研究结果显示，实验组患者血清IL-6及IL-10水平均明显高于对照组，提示IL-6及IL-10参与了脓毒血症的发生发展过程。脓毒血症的病理过程中炎症激活与免疫抑制共同存在，而免疫抑制则表现为淋巴细胞增殖能力的降低，以辅助性淋巴细胞型反应为主的中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及大量淋巴细胞的凋亡为主。目前，大量研究表明[13,14]，由于凋亡诱导的淋巴细胞丢失，导致脓毒血症患者淋巴细胞数量明显的减少，机体免疫力也大大的降低。本研究发现，脓毒血症患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较正常对照组明显的降低，也提示脓毒血症患者存在T淋巴细胞的缺失。

研究表明，脓毒血症时机体不仅处于促炎过程，同时还伴有免疫功能紊乱[15]。由于皮肤和脾内的树突状细胞的大量丧失，抗原递呈功能也随之减弱；另外，加上广泛性的淋巴细胞凋亡，抗体的产生明显的减少，淋巴细胞激活出现障碍，使得机体免疫功能显著的减弱或是受到抑制，导致免疫功能失调或紊乱。研究认为[16]，脓毒血症患者淋巴细胞凋亡与血浆的IL-6和IL-10水平有着十分密切的关系。IL-6可以调节多种细胞的生长与分化，具有调节免疫应答、急性期反应以及造血功能，在机体的抗感染免疫反应中也起到重要的作用。IL-10是一种多功能负性调节因子。本研究结果显示，IL-6、IL-10水平与CD4+/CD8+比值均呈显著负相关，提示两者生理作用表现为相互协同或相互制约，共同促进了脓毒血症的发生和发展。

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Expression of serum IL-6 and IL-10 in sepsis patients and influence on immune system

ZHAOXue-feng,WEIXiu-hua.

(IntensiveCareUnit,TheFifthCenterHospitalofTianjin,Tianjin300450,China)

Objective To investigate the expression of serum IL-6 and IL-10 in sepsis patients and influence on immune system.Methods 50 cases of sepsis patients in ICU in our hospital from June 2013-June 2015 were selected as the experimental group,50 healthy people to examination in our hospital from January 2015 -June 2015 were selected as control group.The serum IL-6,IL-10 and T cell subsets of the two groups were detected.The correlation between serum IL-6,IL-10 and the ratio of CD4+/CD8+were analysed.Results The serum IL-6 and IL-10 levels of the experimental group were significantly higher than that of the control group,the differences were statistically significant (P<0.05).Compared with the control group,CD3+,CD4+,CD8+and CD4+/CD8+in the experimental group were reduced to varying degrees,the difference was statistically significant (P<0.05).The results of correlation analysis showed that IL-6,IL-10 and the ratio of CD4+/CD8+was negatively correlated (r=-0.328,-0.452;P<0.05).Conclusion There were higher expression of IL-10 and IL-6,and lower expression of T cell subsets in serum of patients with sepsis;The effect is congenerousbetween the three common,which promote lesions progress.Therefore,the detection of IL-6,IL-10 and T lymphocyte subsets in the early stages can be an indicator in the diagnosis of sepsis,and help to estimate the prognosis.

sepsis;IL-6;IL-10;immune function

1007-4287(2017)02-0279-03

R446.6

A

2016-02-14)