ESAT-6、INF-γ、IL-10联合ADA检测在结核性脑膜炎早期诊断中的意义

赵 玉，刘玉祥，李 倩，陆连第，王义义

(1.天津市海河医院 脑系二科，天津300350；2.国家中医药管理局中医药防治传染病重点实验室，天津300350；3.桐乡市第一人民医院 内二科，浙江 桐乡314500)

ESAT-6、INF-γ、IL-10联合ADA检测在结核性脑膜炎早期诊断中的意义

赵 玉1,2*，刘玉祥3，李 倩1,2，陆连第1,2，王义义1,2

(1.天津市海河医院 脑系二科，天津300350；2.国家中医药管理局中医药防治传染病重点实验室，天津300350；3.桐乡市第一人民医院 内二科，浙江 桐乡314500)

结核病是因机体免疫功能减弱导致结核分枝杆菌感染而出现的传染性疾病。结核性脑膜炎(TBM)是因结核分枝杆菌侵袭脑膜所致，由于脑脊液标本较难留取，且细胞数量较少，导致TBM早期诊断存在一定难度[1]。随着结核病防治及卡介苗广泛接种工作进行，TBM发病率有所降低，但部分地区仍较为常见，且多数患者确诊时疾病已进展至晚期，错过最佳治疗时机[2]。TBM发病与机体免疫应答密切相关，机体经结核分枝杆菌刺激可产生ESAT-6、INF-γ等免疫应答因子，因此临床将TBM早期诊断研究重点转向检测上述因子[3]。本研究选取我院32例TBM患者，通过设置对照组，探究ESAT-6、INF-γ、IL-10联合ADA检测在TBM早期诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

抽取2015年3月-2016年8月我院收治的32例TBM患者作研究组，另选取同期体检健康者32例作对照组。研究组男18例，女14例；轻症15例，重症17例；年龄13-52岁，平均(32.32±6.11)岁。对照组男19例，女13例；年龄11-53岁，平均(32.24±6.07)岁。对比两组基线资料，差异无统计学意义(P>0.05)，可进行对比研究。

1.2 研究组纳入及排除标准

(1)纳入标准：符合中华医学会制定的TBM临床诊断标准[4]；脑脊液结核培养结果呈阳性；签署知情同意书；(2)排除标准：合并肿瘤疾病者；并发中枢神经系统感染者。

1.3 方法

于入院后1 d内在无菌调节下对两组行腰椎穿刺处理，取2 ml脑脊液，离心处理(3 000 r/min，10 min)，取上清液置于-20℃环境内储存待检；研究组于恢复期再次抽取脑脊液检测，流程与首次相同；以酶联免疫吸附法检测ESAT-6、INF-γ、IL-10水平，以酶动力学终点法测定ADA水平；对TBM不同时期、不同病情严重程度与对照组ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表达水平，各项指标单独诊断与联合诊断准确度差异进行统计。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 对照组与TBM不同时期ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表达水平对比

TBM急性期ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA水平高于恢复期、对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，TBM恢复期各指标水平与对照组对比差异无统计学意义(P>0.05),结果见表1。

表1 对照组与TBM不同时期ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表达水平对比

注：与对照组比较，*P<0.05；与TBM恢复期比较，#P<0.05

2.2 对照组与TBM轻症组、重症组ESAT-6、INF-

γ、IL-10、ADA表达水平对比

TBM重症及轻症组ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表达水平均高于对照组(P<0.05)，TBM重症组各指标水平均高于TBM轻症组，差异有统计学意义(P<0.05)，结果见表2。

表2 对照组与TBM轻症组、重症组ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA表达水平对比

注：与对照组比较，*P<0.05；与TBM轻症组比较，#P<0.05

2.3 单独诊断与联合诊断TBM准确度对比

4项指标联合诊断准确度90.63%(29/32)高于ESAT-6(65.63%，21/32)，INF-γ(62.50%，20/32)，IL-10(68.75%，22/32)和ADA(65.63%，21/32)。

3 讨论

TBM发病初期无明显症状，病情进展迅速，诊断及治疗难度较大。既往多通过细菌培养、脑脊液涂片检查结核杆菌，并联合头颅CT等方式对TBM予以诊断，但由于多数患者无典型症状，导致涂片检查结核杆菌阳性率较低，而细菌培养用时较长，易造成漏诊或误诊。近些年，随着免疫学研究深入发现，部分蛋白与细胞因子在TBM发病与进展中具有重要作用，因此推测通过检测此类因子水平，可提高TBM诊断准确度。

ESAT-6为结核杆菌感染初期出现的分泌型低分子蛋白物质，广泛分布于致病性结核杆菌中，但在牛型分枝杆菌、大部分环境内的分枝杆菌中极少分布，可将其作为结核杆菌感染标志物。马江涛等[5]研究发现，ESAT单独诊断TBM灵敏度与特异度分别为78.9%与90.0%。INF-γ为大颗粒淋巴细胞及T淋巴细胞经结核抗原刺激作用后生成的一类细胞因子，属免疫调节蛋白，在机体对结核杆菌细胞免疫中具有重要参与，可提高巨噬细胞与其溶酶体活化程度，促使结核杆菌抗原进行递呈。当INF-γ表达水平过高时，可增强免疫反应，损伤中枢神经系统。在抗结核免疫反应过程中，IL-10可抑制巨噬细胞，提高刺激因子表达水平，TBM患者中IL-10的抑制效果可弱化巨噬细胞免疫强度。魏丽玲等[6]认为，IL-10表达水平在活动性结核病患者血清及肺泡液中异常增高，且其能增加INF-γ含量，促使T细胞增殖。而ADA为机体嘌呤类核苷代谢过程所需的一种重要酶物质，能催化腺苷发生不可逆性脱氧基反应。傅钰等学者[7]研究证实，ADA表达水平变化对于TBM临床诊断具有重要意义，其浓度高低可用于评估脑神经损伤程度、预后效果等。在刘婷等[8]研究中，ESAT-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ联合诊断可将灵敏度提升至89.1%。而本研究结果显示，ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA联合诊断准确度高于各指标单独诊断，且TBM不同时期、不同病情程度间具有明显差异(P<0.05)，有力佐证联合检测ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA在TBM临床诊断中具有可行性，且有助于评估病情。

综上可知，联合检测ESAT-6、INF-γ、IL-10、ADA可有效提高结核性脑膜炎诊断准确度，评估病情严重程度，对制定有效干预方案具有指导意义。

[1]刘卫国,刘传宝,王永亮,等.脑脊液单核细胞内结核分枝杆菌早期分泌性抗原检测对结核性脑膜炎早期诊断评价[J].中华医院感染学杂志,2016,26(14):3135.

[2]张昆南,文 安,杨 赟,等.ELISA法检测浓缩脑脊液ESAT-6对结核性脑膜炎的诊断价值[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2014,21(5):360.

[3]张春晓,鲁广建,王永亮.脑脊液单核细胞早期分泌性抗原靶-6联合脑脊液阿拉伯糖甘露糖脂抗体对结核性脑膜炎的诊断价值研究[J].实用心脑肺血管病杂志,2015,23(7):15.

[4]中华医学会.临床诊疗指南(结核病分册)[M].北京:人民卫生出版社,2005.52-55.

[5]马江涛,吴文苑,张立军,等.ESAT-6、IL-8和INF-γ在结核性脑膜炎早期诊断中的应用[J].中国卫生检验杂志,2014,24(14):2027.

[6]魏丽玲,姚棉璇,曾 琼,等.结核性脑膜炎脑脊液IL-17与IL-10的表达[J].中国医师杂志,2016,18(5):731.

[7]傅 钰,王永斌,何军兰,等.联合检测脑脊液中腺苷脱氨酶和结核杆菌DNA对结核性脑膜炎的诊断价值[J].临床内科杂志,2014,31(9):625.

[8]刘 婷,向延根,范任华,等.ESAT-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ在结核性脑膜炎辅助诊断中的意义[J].中国卫生检验杂志,2016,26(10):1420.

1007-4287(2017)02-0197-02

赵玉(1981-)，女，硕士研究生，主治医师，研究方向为中枢神经系统感染性疾病的诊断与治疗。

2016-06-18)

*通讯作者