血清IL⁃17和MMP⁃7检测在肝细胞癌诊断中的作用

彭莉，李丹

（1.沈阳市中心血站质量控制科，沈阳 110044；2.中国医科大学附属第一医院消化内科，沈阳 110001）

血清IL⁃17和MMP⁃7检测在肝细胞癌诊断中的作用

彭莉1，李丹2

（1.沈阳市中心血站质量控制科，沈阳 110044；2.中国医科大学附属第一医院消化内科，沈阳 110001）

目的 探讨血清白细胞介素17（IL⁃17）和基质金属蛋白酶7（MMP⁃7）检测在肝细胞癌诊断中的价值。方法 选取中国医科大学附属第一医院消化内科就诊的肝细胞癌患者52例（HCC组），肝硬化患者32例（LC组）；中国医科大学附属第一医院体检中心体检的正常人群36例（对照组）。采用ELISA方法检测血清IL⁃17和MMP⁃7水平，评估2者的诊断效能并分析其相关性。结果 与对照组及LC组比较，HCC组血清IL⁃17和MMP⁃7水平显著增高（均P＜0.001）；与对照组比较，LC组IL⁃17和MMP⁃7水平显著增高（均P＜0.05）。血清IL⁃17和MMP⁃7的ROC曲线下面积分别为0.901（95%CI：0.847～0.954）和0.845（95%CI：0.772～0.918）。诊断HCC血清IL⁃17的灵敏度和特异度分别为90.4%、77.9%，血清MMP⁃7的灵敏度和特异度分别为86.5%、76.5%，2者联合诊断的灵敏度和特异度为98.7%、94.8%。HCC组血清IL⁃17和MMP⁃7水平正相关（r=0.513，P＜0.01）。结论IL⁃17和MMP⁃7参与肝细胞癌的发生发展过程，血清IL⁃17和MMP⁃7可作为肝细胞癌诊断的有效标志物。

白细胞介素17；基质金属蛋白酶7；肝细胞癌；诊断

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类健康，降低患者生活质量，死亡率在我国居恶性肿瘤第二位，在世界范围内居第三位［1］。近年来，HCC的基础研究、早期诊断和治疗取得了很大进展，但患者的总体生存率仍不足5%［2］。目前，HCC的诊断主要依靠影像学检查、病理学检查和血清标志物甲胎蛋白（α⁃feto⁃protein，AFP）的筛查。AFP是目前常用的HCC筛查的血清标志物，灵敏度和特异度相对较低。流行病学调查［3］显示，30%HCC患者血清AFP在正常范围内，HCC诊断的假阳性率可达40%。因此，寻找有效的早期诊断标志物是提高HCC患者生存率的重要手段。有研究［4］报道由辅助性T17细胞分泌的白细胞介素17（interleukin⁃17，IL⁃17）通过促进肿瘤血管生成而促进多种肿瘤生长和转移。基质金属蛋白酶7（matrix metalloproteinase⁃7，MMP⁃7）通过降解细胞外基质参与肿瘤新生血管形成、浸润和远处转移等过程［5］。本研究通过检查外周血中的IL⁃17和MMP⁃7水平，探讨IL⁃17和MMP⁃7 2者的相关性及其在HCC中的诊断价值，为HCC的早期诊断、临床治疗和预后提供新的思路和方法。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择2010年3月至2015年6月中国医科大学附属第一医院消化内科就诊的52例HCC患者（HCC组），其中男41例，女11例，年龄36～74岁。所有HCC患者均经临床和病理确诊，未接受化疗、放疗及生物学治疗。32例肝硬化（liver cirrhosis，LC）患者（LC组），其中男26例，女6例，年龄33～71岁。选择中国医科大学附属第一医院体检中心体检的36例健康人作为对照组，男29例，女7例，年龄31～68岁，均无心、肝、肾和肺等脏器疾病。所有研究对象均排除其他肿瘤病史，均签署知情同意书。3组年龄和性别差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 血清IL⁃17和MMP⁃9检测

抽取患者空腹静脉血5 mL，3 000 r/min离心10 min，收集血清，-80℃储存备用。血清IL⁃17和MMP⁃7测定采用ELISA方法（R&D公司），操作方法严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学分析

应用SPSS 17.0统计学软件，数据采用x±s表示，各组指标比较采用Mann⁃WhitneyU检验。相关分析采用Pearson相关性检验。绘制受试者工作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲线评估各指标的诊断效能（灵敏度和特异度）。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血清IL⁃17和MMP⁃7水平比较

与对照组及LC组比较，HCC组血清IL⁃17和MMP⁃7水平显著增高（均P＜0.001）；与对照组比较，LC组IL⁃17和MMP⁃7水平显著增高（P分别为＜0.001、0.016）。见表1。

表1 3组血清IL⁃17和MMP⁃7水平比较Tab.1 Comparison of serum IL⁃17 and MMP⁃7 levels among three groups

2.2 血清IL⁃17和MMP⁃7的诊断效能分析

血清IL⁃17和MMP⁃7的ROC曲线下面积分别为0.901（95%CI：0.847～0.954）和0.845（95%CI：0.772～0.918），见图1。血清IL⁃17的最优截断值为53.75 pg/mL时，诊断HCC的灵敏度和特异度为90.4%和77.9%。血清MMP⁃7的最优截断值为3.40 ng/mL时，诊断HCC的灵敏度和特异度为86.5%和76.5%。2者联合诊断的灵敏度和特异度为98.7%和94.8%。

图1 血清IL⁃17和MMP⁃7的ROC曲线Fig.1 ROC curves of serum IL⁃17 and MMP⁃7

2.3 HCC患者血清IL⁃17和MMP⁃7的相关性分析

HCC患者血清IL⁃17和MMP⁃7正相关（r= 0.513，P＜0.01）。

3 讨论

目前研究［6］已经证实，在多种实体肿瘤中，炎症是重要的诱发因素，随着肿瘤的发展，炎症影响肿瘤的宿主免疫反应。HCC的发生和发展过程中存在一定的免疫功能障碍，主要表现为免疫逃逸和细胞因子的分泌紊乱，且随病情进展而逐渐加重。IL⁃17由Th17分泌的具有促炎作用的细胞因子，通过与其特异性受体结合，发挥促炎症、免疫应答和造血等功能。有研究［7⁃10］发现在多种恶性肿瘤组织（胃癌、乳腺癌、结直肠癌和肺癌）中IL⁃17表达显著增高，且与肿瘤血管生成呈显著正相关。血管生成是肿瘤恶性生物学特征之一，目前最重要的促血管生成的因子——血管内皮生长因子（vascular endothe⁃lial growth factor，VEGF）在多种肿瘤新生血管内皮细胞增殖和迁徙的作用已经得到证实。LIU等［11］研究发现IL⁃17通过促进VEGF分泌间接影响肿瘤发展过程。ZHANG等［12］用流式细胞技术证实肝癌患者肿瘤组织中Th17细胞的阳性率明显高于正常组织且伴有高IL⁃17的表达。本研究结果表明HCC组血清IL⁃17水平显著高于LC组和对照组，推测患者外周血IL⁃17水平升高是由于肿瘤组织产生的IL⁃17释放入血所致，故认为IL⁃17可作为诊断HCC有价值的肿瘤标志物。

ZHANG等［13］报道IL⁃17通过调节MMP⁃7的活性而促进肿瘤细胞上皮间质转化过程。MMP⁃7属于基质溶解素，对基底膜及相关屏障有广谱的降解功能。研究［14］发现MMP⁃7的高表达发生于上皮来源的肿瘤，其高表达与肿瘤细胞的发生、浸润、转移和复发等密切相关。NAKAMURA等［15］报道MMP⁃7通过与胰岛素样生长因子结合蛋白相互作用，抗细胞凋亡，促进肿瘤细胞增殖和生长。ITO等［16］证实抑制MMP⁃7活性可减弱肿瘤血管生成活性。本结果显示HCC组血清MMP⁃7显著高于LC组和对照组，与以往研究结果一致。

利用ROC曲线评估血清IL⁃17和MMP⁃7的诊断效能，ROC曲线下的面积值越接近1，表示指标的诊断效能越好。本研究结果显示，HCC患者血清IL⁃17和MMP⁃7的ROC曲线下面积分别为0.901和0.845，表示血清IL⁃17的诊断效能高于血清MMP⁃7。2者联合诊断的灵敏度和特异度可达到98.7%和94.8%，且显著相关。因此，IL⁃17和MMP⁃7可作为HCC诊断的血清标志物。

综上所述，血清IL⁃17和MMP⁃7在HCC患者呈现高水平，提示2者可能在HCC的发生发展中起重要作用，联合检测IL⁃17和MMP⁃7可能对患者的早期诊断和指导治疗具有重要意义。今后还有待于进一步扩大样本，深入探讨IL⁃17和MMP⁃7在HCC中的作用机制。

［1］何海华，杨志奇，孙振纲，等.IL⁃10、IL⁃17及IL⁃18在肝细胞肝癌中的表达特点及其临床意义［J］.标记免疫分析与临床，2016，23（2）：152-153.DOI：10.11748/bjmy.issn.1006⁃1703.2016.02.010.

［2］MONTELLA L，PALMIERI G，ADDEO R，et al.Hepatocellular car⁃cinoma：will novel targeted drugs really impact the next future?［J］. World J Gastroenterol，2016，22（27）：6114-6126.DOI：10.3748/ wjg.v22.i27.6114.

［3］AHN DG，KIM HJ，KANG H，etal.Feasibilityof α⁃fetoproteinas a di⁃agnostic tool for hepatocellular carcinoma in Korea［J］.Korean J In⁃tern Med，2016，31（1）：46-53.DOI：10.3904/kjim.2016.31.1.46.

［4］KUANG DM，PENG C，ZHAO Q，et al.Tumor⁃activated monocytes promote expansion of IL⁃17⁃producing CD8+T cells in hepatocellu⁃lar carcinoma patients［J］.J Immunol，2010，185（3）：1544-1549. DOI：10.4049/jimmunol.0904094.

［5］王梦洁，孙苏平，钱科卿，等.结直肠癌患者血清IL⁃17和TGF⁃β浓度及其相关性的初步研究［J］.中国肿瘤临床，2013，40（13）：767-769，778.DOI：10.3969/j.issn.1000⁃8179.2013.13.005.

［6］王拱辰，施广霞.肝细胞癌免疫逃逸机制的研究进展［J］.胃肠病学和肝病学杂志，2012，21（10）：975-980.DOI：10.3969/j. issn.1006⁃5709.2012.10.028.

［7］WU X，YANG T，LIU X，et al.IL⁃17 promotes tumor angiogenesis through Stat3 pathway mediated upregulation of VEGF in gastric cancer［J］.Tumour Biol，2016，37（4）：5493-5501.DOI：10.1007/ s13277⁃015⁃4372⁃4.

［8］COFFELT SB，KERSTEN K，DOORNEBAL CW，et al.IL⁃17⁃pro⁃ducing γδ T cells and neutrophils conspire to promote breast cancer metastasis［J］.Nature，2015，522（7556）：345-348.DOI：10.1038/ nature14282.

［9］LI YX，ZHANG L，SIMAYI D，et al.Human papillomavirus infec⁃tion correlates with inflammatory Stat3 signaling activity and IL⁃17 level in patients with colorectal cancer［J］.PLoS One，2015，10（2）：e0118391.DOI：10.1371/journal.pone.0118391.

［10］LI Q，HAN Y，FEI G，et al.IL⁃17 promoted metastasis of non⁃small⁃cell lung cancer cells［J］.Immunol Lett，2012，148（2）：144-150. DOI：10.1016/j.imlet.2012.10.011.

［11］LIU J，DUAN Y，CHENG X，et al.IL⁃17 is associated with poor prognosis and promotes angiogenesis via stimulating VEGF produc⁃tion of cancer cells in colorectal carcinoma［J］.Biochem Biophys Res Commun，2011，407（2）：348-354.DOI：10.1016/j.bbrc.2011. 03.021.

［12］ZHANG JP，YAN J，XU J，et al.Increased intratumoral IL⁃17⁃pro⁃ducing cells correlate with poor survival in hepatocellular carcino⁃ma patients［J］.J Hepatol，2009，50（5）：980-989.DOI：10.1016/ j.jhep.2008.12.033.

［13］ZHANG Q，LIU S，PARAJULI KR，et al.Interleukin⁃17 promotes prostate cancer via MMP7⁃induced epithelial⁃to⁃mesenchymal tran⁃sition［J］.Oncogene，2016.［Epub ahead of print］DOI：10.1038/ onc.2016.240.

［14］OKAYAMA H，KUMAMOTO K，SAITOU K，et al.CD44v6，MMP⁃7 and nuclear Cdx2 are significant biomarkers for prediction of lymph node metastasis in primary gastric cancer［J］.Oncol Rep，2009，22（4）：745-755.DOI：10.3892/or_00000496.

［15］NAKAMURA M，MIYAMOTO S，MAEDA H，et al.Matrix metallo⁃proteinase⁃7 degrades all insulin⁃like growth factor binding pro⁃teins and facilitates insulin⁃like growth factor bioavailability［J］. Biochem Biophys Res Commun，2005，333（3）：1011-1016.DOI：10.1016/j.bbrc.2005.06.010.

［16］ITO TK，ISHII G，CHIBA H，et al.The VEGF angiogenic switch of fibroblasts is regulated by MMP⁃7 from cancer cells［J］.Onco⁃gene，2007，26（51）：7194-7203.DOI：10.1038/sj.onc.1210535.

（编辑 武玉欣）

Clinical Value of Serum IL⁃17 and MMP⁃7 in Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma

PENG Li1，LI Dan2
（1.Department of Quality Control，Shenyang Blood Center，Shenyang 110044，China；2.Department of Gastroenterology，The First Hospital，China Medical Universi⁃ty，Shenyang 110001，China）

Objective To evaluate the significance of serum interleukin⁃17（IL⁃17）and matrix metalloproteinase⁃7（MMP⁃7）in the diagnosis of hepatocellular carcinoma（HCC）.Methods A total of 52 patients with HCC（HCC group），32 patients with liver cirrhosis（LC group）and 36 healthy controls（control group）were enrolled for the study，and all samples were collected from The First Hospital of China Medical University. Serum levels of IL⁃17 and MMP⁃7 were determined using ELISA method.The diagnostic performance and their correlation was evaluated.Re⁃sults Serum levels of IL⁃17 and MMP⁃7 in HCC group were significantly higher than those in LC group（allP＜0.001）and control group（all P＜0.001）.Both of them in LC group were higher than control group（allP＜0.05）.The area under ROC of serum IL⁃17 and MMP⁃7 were 0.901（95%CI：0.847⁃0.954）and 0.845（95%CI：0.772⁃0.918）.The sensitivity of serum IL⁃17 and MMP⁃7 in the diagnosis of HCC was 90.4%and 86.5%，respectively，and the specificity of the same markers was 77.9%and 76.5%，respectively.Combined detection of the two markers improved sensitivity to 98.7%and specificity to 94.8%.Serum IL⁃17 was positively correlated to MMP⁃7（r=0.513，P＜0.01）.Conclusion IL⁃17 and MMP⁃7 are involved in the progress of HCC，and serum IL⁃17 and MMP⁃7 may be useful markers in the diagnosis of HCC.

interleukin⁃17；matrix metalloproteinase⁃7；hepatocellular carcinoma；diagnosis

R735.7

A

0258-4646（2017）03-0248-03

10.12007/j.issn.0258⁃4646.2017.03.014

彭莉（1976-），女，副主任医师，硕士. E-mail：m15204017926@163.com

2016-09-21

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