退白颗粒与NB-UVB对白癜风患者IL-6、CD4+、Th17影响研究*

2017-01-18杨凤元

陕西中医 2017年1期

关键词：黑素细胞白癜风皮损

蒙坚, 黄熙,杨凤元

桂林医学院第一附属医院皮肤科(桂林541001)

退白颗粒与NB-UVB对白癜风患者IL-6、CD4+、Th17影响研究*

蒙坚, 黄熙,杨凤元

桂林医学院第一附属医院皮肤科(桂林541001)

目的：分析退白颗粒与窄谱中波紫外线(Narrow band ultraviolet B，NB-UVB)对白癜风患者IL-6、CD4+、Th17等调节作用。方法：将110例白癜风患者，按照随机原则将其均分为观察组和对照组，另以50例健康者做为健康组。观察组给予退白颗粒口服联合NB-UVB照射治疗，对照组给予NB-UVB照射治疗，观察两组的临床疗效。结果：观察组的临床有效率83.64%显著高于对照组56.37%，P<0.05。治疗后，观察组IL-6水平、CD8+、Th17细胞的百分比显著低于对照组，TGF-β水平、CD4+细胞的百分比及CD4+/CD8+显著高于对照组。观察组不良反应发生率12.72%与对照组10.91% 差异不显著。结论：退白颗粒联合NB-UVB治疗白癜风患者，可以调节外周血免疫细胞，影响细胞因子表达，提高患者的免疫功能，发挥较好的治疗作用，值得临床应用。

白癜风是临床上常见的一种后天性进展性色素脱失性皮肤病，由于皮肤表皮黑素细胞被破坏、功能消失而产生的皮肤黏膜白斑，随着病情的进展会造成毛发的色素脱失；病理学检查可见皮损区表皮、毛囊部黑色素细胞及黑色素颗粒缺失[1-2]。近年来，越来越多的中药制剂被用于皮肤病及自身免疫性疾病的治疗，且有较好的临床疗效，因此中西医结合治疗越来越受到白癜风患者的欢迎。本研究运用退白颗粒联合NB-UVB治疗白癜风患者，对上述相关指标进行分析，报告如下。

资料与方法

1 一般资料选取2012年10月至2015年10月在我院皮肤科就诊的白癜风患者110例，随机均分为观察组：55例，其中男21例，女34例，平均年龄(28.5±6.3)岁；病程4月～5年，平均病程(2.9±2.8)年；局限型16例，节段型12例，肢端型11例，散发型16例；皮损面积8～240cm2，平均(67.4±18.2)cm2；进展期31例，稳定期24例。对照组：55例，其中男23例，女32例，平均年龄(26.9±7.4)岁；病程6月～4.5年，平均病程(3.1±2.5)年；局限型17例，节段型15例，肢端型11例，散发型12例；皮损面积6～260cm2，平均(69.1±20.4)cm2；进展期29例，稳定期26例。两组患者在年龄、性别、病程、皮损面积、病期等方面的差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。此外，另外选取50例来我院体检中心体检的健康人做为健康组，其中男30例，女20例，年龄16～67岁，平均年龄(29.1±5.7)岁。三组年龄、性别之间的差异无统计学意义，具有可比性。本研究经过我院中心医学伦理委员会批准与认可，且所有入选患者均签署知情同意书。

2 研究方法药物、主要试剂及仪器:药物：退白颗粒：主要药物成分有：白蒺藜30 g，白芷、何首乌、补骨脂、鸡血藤、菟丝子各15 g，当归、黄芪、丹参、红花、乌梢蛇、陈皮、黑豆衣各10 g。

2.1 仪器及试剂:流式细胞仪，型号FACS Calibur ，美国BD公司生产；系统光疗仪，型号UV100L，徳国Waldmann公司生产；日光紫外线模拟器，型号SUV-1000，上海Sigma公司生产；酶标仪，型号anthos201O型，奥地利产；白癜风表皮分离仪，型号BY-II型，上海跃进医疗器械厂生产；高速离心机，型号TGL-168，上海安亭科学仪器厂生产。人IL-6ELISA试剂盒,上海西唐生物科技有限公司生产。

2.2 治疗方法:观察组给予退白颗粒口服联合NB-UVB照射治疗。退白颗粒服用方法：加水200 ml冲服，早晚各100 ml。NB-UVB照射治疗：用系统光疗仪照射患处，NB-UVB波长为311 nm，初始剂量为0.4～0.6J/ cm2，其中面部0.4 J/cm2，躯干0.5 J/cm2，四肢0.6 J/cm2；以后每次剂量增加10%～20%，直到患者出现皮肤红斑反应后，按照该剂量维持治疗；每周3次；照射时应该对眼睛、外生殖器及正常的皮肤进行必要防护。对照组：仅给予NB-UVB照射，照射方法及时间同观察组。两组患者的治疗时间均为3个月。

2.3 标本采集:分别抽取治疗前、后两组患者及健康对照者清晨空腹外周血5 ml,每次采集的样本均分为两份，一份以3000次/min离心15 min后取血清用于细胞因子测定，一份用于流式细胞仪分析。

3 观察指标观察两组患者的临床疗效，疗效评定标准[3]：无效：白斑缩小的面积很小或无变化，皮损处恢复正常肤色的面积占原有皮损面积的比值<10%；好转：白斑部分消退或缩小的面积较大，皮损处恢复正常肤色的面积占原有皮损面积的10%～49%；显效：白斑大部分消退，皮损处恢复正常肤色的面积占原有皮损面积的比值>50%；痊愈：白斑完全消退，皮损处恢复正常肤色的面积占原有皮损面积的比值≥50%。临床有效率=(显效例数+痊愈例数)/总例数×100%。

观察患者外周血中IL-6、TGF-β的含量，采用酶联免疫吸附试剂盒测定IL-6、TGF-β的含量。

观察患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的检测结果：运用流式细胞仪，按照试剂盒上的操作要求检测两组患者的CD4+、CD8+、Th17细胞的百分比，然后利用功能软件计算CD4+/CD8+T细胞比值。

由于光疗法照射时间长可能会对患者产生光老化、色素沉着等不良反应，因此治疗结束后，应观察两组患者不良反应的发生情况；此外由于观察组联合运用退白颗粒，退白颗粒属于中成药，定期进行血、尿常规及肝肾功能等常规检查。

结果

1 观察组、对照组患者的临床疗效比较观察组痊愈25例，显效21例，好转9例，无效0例,对照组痊愈18例，显效13例，好转17例，无效7例，观察组临床有效率46(83.64%)显著高于对照组31(56.37%)，差异具有统计学意义(P<0.05)。

2 健康组及观察组、对照组治疗前后外周血中IL-6、TGF-β的含量变化的比较见表1。

表1 健康组及观察组、对照组外周血中IL-6、

注：与治疗前比较，#P<0.05；与对照组治疗后比较，*P<0.05；与健康组比较，∆P<0.05

3 健康组与观察组、对照组外周血中T淋巴细胞亚群的检测结果的比较见表2。

表2 健康组及观察组、对照组外周血中T淋巴细胞亚群的检测结果±s)

注：与治疗前比较，#P<0.05；与对照组治疗后比较，*P<0.05；与健康组比较，∆P<0.05

4 不良反应观察组和对照组的光不良反应基本一致，患者主要表现为：照射后轻度的自觉皮肤烧灼感、刺痛感及瘙痒感；观察组部分患者会出现轻度恶心、呕吐及上腹部不适症状；观察组患者治疗前后的血、尿常规、肝肾功能均未见显著变化。按照患者出现皮肤不适症状及胃肠道症状两方面对患者的不良反应进行分析，结果观察组不良反应发生率12.72%与对照组10.91%差异无统计学意义(P>0.05)。

讨论

白癜风是临床上常见的一种皮肤病，由于其病因及发病机制至今尚未得到完全阐释，所以目前尚未有统一的治疗方案，就其研究现状而言，自身免疫机制是多数专家、学者公认的发病机制之一[4]。因此临床上对于白癜风的治疗多从免疫机制角度入手，常用的治疗方法是NB-UVB照射治疗，通过刺激促黑激素产生、促细胞因子分泌、促黑素细胞增殖及黑素生成以及对移行和增殖的黑素细胞发挥保护作用等而发挥治疗作用[5]。但近年来研究发现[6]，NB-UVB照射治疗白癜风仍然存在不足，多数患者需要长期进行光照治疗，长期光照可能会产生光老化、色素沉着等不良反应。因此临床上目前多采用联合中成药或中药汤剂疗法治疗白癜风[7]。

中医学认为，白癜风的发病是机体内外因素互相作用的结果，内因为肝脾肾虚，多由肝血虚、肾阳虚、肾气不足、致令机体阴阳失衡，气血失和，在此基础上湿热风邪乘虚而入，客入肌肤，闭阻经络血脉，肌肤不得温煦，皮肤毛发失养致黑色素脱失而成白斑[8]。因此治疗上应该养血益肤、驱风通络；本研究中运用退白颗粒联合NB-UVB治疗，退白颗粒的作用机制如下：当归、黄芪益气补血，白蒺藜、乌梢蛇、白芷、菟丝子祛风发散通络；鸡血藤、补骨脂、何首乌、丹参、红花、陈皮，滋养肝肾、理气活血；黑豆衣补肾养血、祛风调气。通过联合运用退白颗粒，减少了NB-UVB的照射剂量，从而降低了NB-UVB照射可能引起肿瘤的风险。此外，研究发现补骨脂、白蒺藜等能够提高皮肤对于NB-UVB照射的敏感性，加速黑色素的生物合成[9]；当归、丹参等能明显改善局部微循环，促进黑色素运转和弥散，促进皮损部位黑色素的再生[10]。因此退白颗粒与NB-UVB联合运用可以显著提高临床治疗效果。本研究结果中观察组的临床有效率83.64%显著高于对照组56.37%，与盛国荣等[11]研究结果相近。

白癜风是一种T细胞介导的自身免疫相关性疾病[12]。TGF-β是一种促生长因子，参与许多生理病理过程，在维持机体免疫平衡中起着重要作用，在许多疾病发病的急性阶段中，其合成会明显减少，TGF-β在白癜风中的作用机理在于CD4+CD25+调节性T细胞产生的膜性TGF-β与未知的受体结合，从而传递细胞接触-依赖性抑制信号，抑制免疫活性细胞的增殖，调节细胞表型及抑制淋巴细胞等，进而导致黑素细胞自身抗原的耐受性破坏，形成白癜风[13]。本次研究中观察组TGF-β水平治疗后显著高于对照组，笔者推断与退白颗粒的免疫调节作用相关，但具体机制尚不明确且当归、丹参等能明显改善局部微循环，促进黑色素运转和弥散，促进皮损部位黑色素的再生，从而改善观察组治疗情况，增加其治疗有效率。

此外，白癜风发病过程中Th17细胞分泌的IL-17A作用于表皮角质形成细胞及真皮成纤维细胞，促进IL-6的大量分泌，使IL-6在血液和局部微环境中的浓度显著增高，作用于黑素细胞，IL-6能促进黑素细胞表面的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达，ICAM-1是中性白细胞与黑素细胞黏附的必需因子，IL-6通过增加效应细胞的迁移及其与靶细胞间的黏附，引起黑素细胞功能失调，进而导致白癜风。退白颗粒对小鼠的体液免疫及T细胞介导的免疫反应有一定的调节作用；CD3+T细胞和CD4+T细胞对于白癜风发病起到免疫抑制性调节作用，通过实验研究发现去除CD4+T细胞的小鼠体内CD3+T细胞数量增加了10倍，并且超过一半的小鼠出现了白癜风的体征。因此本研究中治疗后，观察组及治疗组IL-6水平、CD8+、Th17细胞的百分比较治疗前降低，表明NB-UVB照射治疗可以抑制IL-6对黑素细胞的损伤，并通过调节T细胞免疫调节机体免疫功能，进而改善白癜风症状。治疗后，观察组IL-6水平、CD8+、Th17细胞的百分比显著低于对照组,CD4+细胞的百分比及CD4+/CD8+显著高于对照组，表明NB-UVB联合退白颗粒对抑制IL-6分泌，Th细胞分泌功能优于单用NB-UVB照射治疗。此外，观察组的不良反应发生率与对照组差异无统计学意义，可见联合治疗的安全性尚可，这一结果再次表明了中医药在治疗白癜风方面的优势。

综上所述，运用退白颗粒联合NB-UVB治疗白癜风患者，可以调节患者的外周血免疫细胞，影响细胞因子的表达，从而提高患者的免疫功能，发挥较好的治疗作用，值得临床应用。

[1] 魏亚东.白癜风丸配合吡美莫司软膏治疗白癜风的临床研究[J]. 陕西中医, 2015，36(10):1400-1401.

[2] 牟宽厚,李盼.白癜风皮肤组织角质形成细胞释放警报素分子的研究[J].陕西医学杂志,2014，43(10):1275-1277.

[3] 吴蓓玲，孙洁，杨晓红，等.卡介苗多糖核酸联合中药对白癜风患者T细胞亚群及Fas/FasL系统表达的调节.中华皮肤杂志，2012,45(6)：426-428.

[4] 王卫亮,陈燕,刘奉彬,等. NB-UVB、曲安奈德、白癜风颗粒三联疗法治疗后白癜风患者外周血及皮损组织中病情相关指标的评估[J]. 海南医学院学报,2016,22(8):825-828.

[5] 赵玉凤.Th17细胞在白癜风发病中的作用研究进展[J].中国全科医学,2012,15(20):2256-2258.

[6] 陈鹏，蒋献.窄谱中波紫外线治疗皮肤病的作用机制[J].国际皮肤性病学杂志，2007，3(1):33-35.

[7] 梁津宁. Th17细胞及其相关细胞因子在白癜风发病机制中作用的研究[D].滨州医学院,2011.

[8] 房欣,乔树芳.白癜风免疫学机制与中药对其作用的研究进展[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2013,12(6):398-403.

[9] 许兆毅，张峻岭，张丹丹，等．中医药联合NB-UVB治疗白癜风的研究进展[J].中国皮肤性病学杂志，2014,28(4):415-417.

[10] 夏毓．中药内服联合NB-UVB照射治疗白癜风60例临床观察[J].中国皮肤性病学杂志，2014,28(10)：1067-1068．

[11] 盛国荣,丁晓云,刘海琴，等. 退白汤联合NB-UVB对寻常型白癜风患者IL-6和TGF-β表达水平的影响[J]. 中药药理与临床,2015,31(4):207-211.