连翘中具有抗菌活性的苯乙醇苷类化学成分研究△

姜醒，鲁丽敏，张春蕾，王兴焱，孙琦，王佳天，苑光军

(黑龙江中医药大学 佳木斯学院，黑龙江 佳木斯 154007)

·基础研究·

连翘中具有抗菌活性的苯乙醇苷类化学成分研究△

姜醒，鲁丽敏，张春蕾，王兴焱，孙琦，王佳天，苑光军*

(黑龙江中医药大学 佳木斯学院，黑龙江 佳木斯 154007)

目的：研究连翘中具有抗菌活性的苯乙醇苷类化合物，探讨连翘抗菌药效物质基础。方法：采用有机溶剂提取药材，不同极性有机溶剂萃取提取液，抗菌活性跟踪结合各种色谱法，获得活性化合物。与文献报道谱学数据对比确定化合物的结构。结果：从该药材中分离获得9个化合物，分别鉴定为6′-O-(顺式-1，4-二羟基环己乙酰基)-类叶升麻苷(1)，4-O-鼠李糖基-7S，8R-7′，8′-赤式-蒜芥茄脂素(2)，毛花球花苷A (3)，黄花马缨丹苷B (4)，石蚕苷B (5)，紫茎女贞苷J (6)，厚朴苷F (7)，松果菊苷(8)，异厚叶车前苷 (9)。化合物1、6、8对金黄色葡萄球菌(ATCC 33591)生长具有中等强度抑制作用，MIC值分别为8.0、16.0、4.0 μg·mL-1。结论：8个苯乙醇苷类化合物(1，3～9)和1个木脂素类化合物(2)系首次从该植物中获得。

连翘；苯乙醇苷类化合物；抗菌活性

连翘为木犀科 (Oleaceae) 植物连翘Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl 的干燥成熟果实，又名落翘，《中华人民共和国药典》2015版收载[1]。连翘在全国范围内均有种植，野生多生于河边，商品药材以野生为主，有“老翘”、“青翘”之分。连翘主要分布于秦岭、太行山一带，主产于陕、晋、川等地。其味苦，性微寒，归肺、心、小肠经，具有清热解毒、消肿散结、疏散风热等功效，可以与金银花、牡丹皮、栀子、大黄等多种中药配伍，如复方银翘散、凉隔散等，多数用于疮、痈、瘰疬、热毒的治疗，为“疮家之圣药”。连翘中主要的成分为苯乙烯及其苷类、黄酮类、香豆素类、酚酸类等多种成分，具有很强的抗菌、抗炎、抗病毒等作用[2]。以往研究表明苯乙醇苷类是连翘主要的抗菌活性成分[3-4]，已经作为先导化合物应用于寻找新药[5]。本文继续寻找连翘中具有抗菌活性的苯乙醇苷类化合物，结果从该植物中首次分离得到9个苯乙醇苷类化合物并进行了抗菌活性研究。

1 仪器与材料

BRUKER AV500型核磁共振仪(德国布鲁克公司)，溶剂峰为内标；岛津 LC-6AD (日本岛津公司)；岛津Shim-pack PREP-ODS制备色谱柱(250 mm×25 mm，日本岛津公司)；所用试剂为色谱纯或分析纯。

金黄色葡萄球菌ATCC 33591、ATCC 33591，大肠埃希菌(ATCC 25922)，粪肠球菌(ATCC 29212)，购于中国医学科学院生物技术研究所。

样品于2013年6月购于河北省安国中药材集散中心，经黑龙江中医药大学赵喜副教授鉴定为木犀科植物连翘Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl的干燥成熟果实。

2 提取、分离

甲醇作为提取溶剂进行回流提取药材(8 kg)，提取物减压回收后分散于水中，先后采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，分别得到石油醚部分(300 g)、乙酸乙酯部分(500 g)、正丁醇部分(350 g)。其中，乙酸乙酯部分在质量浓度为100 μg·mL-1时显示出抗菌活性；因此，选择硅胶柱色谱法对乙酸乙酯部分进行下一步分离，洗脱剂采用三氯甲烷-甲醇溶剂系统(100∶1～1∶1)，极性由低到高进行梯度洗脱。在薄层色谱法的跟踪检测下，共收集到了10个流分(Fr.1～Fr.10)。Fr.3部分(17.2 g)，先后采用硅胶柱色谱法和高效液相色谱法(反相柱：流动相为乙腈-水溶剂系统)进行分离纯化，分别得到化合物1(10 mg)和2(5 mg)。Fr.6 部分(15 g)先后采用硅胶和高效液相柱色谱法进行分离纯化，分别得到化合物3(12 mg)、4(8 mg)、5(3 mg)。Fr.7 部分(20 g) 先后采用硅胶和高效液相柱色谱法进行分离纯化，分别得到化合物6(353 mg)，7(206 mg)和8(62 mg).Fr.9部分 (10 g) 采用中压制备色谱和高效液相色谱法进行分离纯化，得到化合物9(8 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末。ESI-MS：m/z779[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：acetylcyclohexyl：1.80 (2H，m，H-2，6)，1.54 (2H，m，H-2，6)，1.68 (4H，m，H-3，5)，3.53 (1H，m，H-4)，2.49 (2H，s，H-7)；glycosyl：4.43 (1H，d，J=8.3 Hz，H-1′)，3.44 (1H，m，H-2′)，3.86(1H，t，J=9.0 Hz，H-3′)，5.03 (1H，t，J=9.5 Hz，H-4′)，3.77 (1H，m，H-5′)，4.24 (1H，dd，J=11.7，2.7 Hz，H-6′a)，4.15 (1H，dd，J=11.7，5.1 Hz，H-6′b)；aglycone：6.71 (1H，d，J=2.4 Hz，H-2″)，6.70 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5″)，6.60 (1H，dd，J=8.3，2.0 Hz，H-6″)，3.99 (1H，m，H-αa)，3.74 (1H，m，H-αb)，2.83 (2H，m，H-β)；caffeoyl：7.09 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2‴)，6.81 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5‴)，6.99 (1H，dd，J=8.3，1.9 Hz，H-6‴)，6.31 (1H，d，J=16.1 Hz，H-α)，7.63 (1H，d，J=15.6 Hz，H-β)；rhamnosyl：5.21 (1H，d，J=1.5 Hz，H-1″″)，3.94 (1H，m，H-2″″)，3.59 (1H，m，H-3″″)，3.32 (1H，m，H-4″″)，3.61 (1H，d，J=2.9 Hz，H-5″″)，1.13 (3H，d，J=6.4 Hz，H-6″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：acetylcyclohexyl：70.6 (C-1)，36.1 (C-2，6)，31.6 (C-3，5)，70.7 (C-4)，48.5 (C-7)，172.7 (C-8)；glycosyl：104.4 (C-1′)，76.3 (C-2′)，81.5 (C-3′)，73.2 (C-4′)，73.9 (C-5′)，63.9 (C-6′)；aglycone：131.8 (C-1″)，117.4 (C-2″)，146.4 (C-3″)，145.1 (C-4″)，116.6 (C-5″)，121.5 (C-6″)，37.0 (C-7″)，72.8(C-8″)；caffeoyl：127.9 (C-1‴)，115.6 (C-2‴)，147.2 (C-3‴)，150.3 (C-4‴)，116.8 (C-5‴)，123.5 (C-6‴)，148.4 (C-7‴)，114.9 (C-8‴)，168.3 (CO)，103.4 (C-1″″)，72.6(C-2″″)，70.8 (C-3″″)，74.1 (C-4″″)，72.3 (C-5″″)，18.8 (C-6″″)。以上核磁数据与文献报道的一致[6]，所以化合物1鉴定为6′-O-(cis-1，4-dihydroxycyclohexanacetyl)-acteoside，为首次从该植物中分离得到。

化合物2：白色粉末。ESI-MS：m/z537[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：7.05 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，7.09 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，6.93 (1H，dd，J=8.3，2.0，H-6)，5.62 (1H，d，J=5.9 Hz，H-7)，3.49 (1H，m，H-8)，3.87 (1H，m，H-9a)，3.79 (1H，m，H-9b)，3.81 (3H，s，3-OMe)，6.97 (1H，br s，H-2′)，6.91 (1H，br s，H-6′)，4.59 (1H，d，J=5.9 Hz，H-7′)，3.69 (1H，m，H-8′)，3.55 (1H，dd，J=11.5，4.2 Hz，H-9′a)，3.40 (1H，dd，J=11.2，6.4 Hz，H-9′b)，3.91 (3H，S，3′-OMe)，5.36 (1H，d，J=1.5 Hz，H-1″)，4.08 (1H，dd，J=3.2，1.7 Hz，H-2″)，3.87 (1H，m，H-3″)，3.49 (1H，m，H-4″)，3.78 (1H，m，H-5″)，1.24 (3H，d，J=6.4 Hz，H-6″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：138.9 (C-1)，111.6 (C-2)，152.4 (C-3)，146.7 (C-4)，119.9 (C-5)，119.3 (C-6)，89.1 (C-7)，55.8 (C-8)，65.3 (C-7)，56.8 (3-OMe)，137.4 (C-1′)，112.9 (C-2′)，145.6 (C-3′)，149.3 (C-4′)，129.8 (C-5′)，116.9 (C-6′)，75.8 (C-7′)，77.7 (C-8′)，64.5 (C-9′)，57.1 (3′-OMe)，101.7 (C-1″)，72.3 (C-2″)，72.5 (C-3″)，74.1 (C-4″)，71.1 (C-5″)，18.3 (C-6″)。以上核磁数据与文献报道的一致[6]，所以化合物2鉴定为4-O-rhamnosyl-7S，8R-7′，8′-erythro-sisymbrifolin，为首次从该植物中分离得到。

化合物3：白色粉末。ESI-MS：m/z257[M+1]+；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycon：6.72 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.71 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.59 (1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，4.07 (1H，m，H-αa)，3.74 (1H，m，H-αb)，2.82 (1H，m，H-β)；glucosyl：4.41 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)，3.43 (1H，dd，J=7.9，9.1 Hz，H-2′)，3.87 (1H，t，J=9.1 Hz，H-3′)，4.95 (1H，t，J=9.5 Hz，H-4′)，3.55 (1H，m，H-5′)，3.70 (1H，H-6′a)，3.63 (1H，H-6′b)；rhamnosyl：5.27 (1H，d，J=1.7 Hz，H-1″)，3.96 (1H，dd，J=1.7，3.2 Hz，H-2″)，3.79 (1H，dd，J=3.2，9.5 Hz，H-3″)，3.48 (1H，t，J=9.5 Hz，H-4″)，3.66 (1H，H-5″)，1.18 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6″)；xylopentaose：4.41 (1H，d，J=7.7 Hz，H-1‴)，3.04 (1H，dd，J=7.7， 9.0 Hz，H-2‴)，3.26 (1H，t，J=9.0 Hz，H-3‴)，3.39 (1H，m，H-4‴)，3.75(1H，H-5‴a)，3.10 (1H，dd，J=11.2，10.4 Hz，H-5‴b)；caffeoyl：7.09 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2″″)，6.82 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5″″)，6.98 (1H，dd，J=8.3，2.0 Hz，H-6″″)，6.28 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α′)，7.60 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β′)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：aglycon：131.42 (C-1)，117.09 (C-2)，146.10 (C-3)，144.64 (C-4)，116.29 (C-5)，121.25 (C-5)，72.20 (C-α)，36.54 (C-β)；glucosyl：104.15 (C-1′)，76.31 (C-2′)，80.64 (C-3′)，70.43 (C-4′)，75.92 (C-5′)，62.28 (C-6′)；rhamnosyl：102.35 (C-1″)，72.10 (C-2″)，72.27 (C-3″)，83.64 (C-4″)，68.70 (C-5″)，18.41 (C-6″)；xylopentaose：106.52 (C-1‴)，75.71 (C-2‴)，78.03 (C-3‴)，70.96 (C-4‴)，67.05 (C-5‴)；caffeoyl：127.65 (C-1″″)，115.36 (C-2″″)，146.75 (C-3″″)，149.76 (C-4″″)，116.52 (C-5″″)，123.37 (C-6″″)，114.55 (C-α′)，148.20 (C-β′)，168.14 (C=O)。以上核磁数据与文献报道的一致[7]，所以化合物3鉴定为trichosanthoside A，为首次从该植物中分离得到。

化合物4：白色粉末。ESI-MS：m/z741[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycone：6.74 (1H，d，J=1.7 Hz，H-2)，6.72 (1H，d，J=7.9 Hz，H-5)，6.62 (1H，dd，J=7.9，1.7 Hz，H-6)，4.09 (1H，m，H-αa)，3.75 (1H，m，H-αb)，2.83 (2H，m，H-β)；glucosyl：4.55 (1H，d，J=7.6 Hz，H-1′)，3.68 (1H，dd，J=7.6，9.4 Hz，H-2′)，3.93 (1H，t，J=9.4 Hz，H-3′)，4.94 (1H，t，J=9.4 Hz，H-4′)，3.60 (1H，m，H-5′)，3.61 (1H，dd，J=12.0，5.0 Hz，H-6′a)，3.75 (1H，dd，J=12.0，3.8 Hz，H-6′b)；xylopentaose：4.64 (1H，d，J=7.4 Hz，H-1″)，3.26 (1H，dd，J=7.4，8.9 Hz，H-2″)，3.37 (1H，dd，J=8.9，8.9 Hz，H-3″)，3.58 (1H，m，H-4″)，3.20 (1H，dd，J=11.0，2.5 Hz，H-5″a)，3.91 (1H，dd，J=11.0，5.0 Hz，H-5″b)；apiosyl：5.34 (1H，d，J=3.2 Hz，H-1‴)，3.99 (1H，d，J=3.2 Hz，H-2‴)，3.77 (1H，d，J=9.8 Hz，H-4‴a)，4.14 (1H，d，J=9.8 Hz，H-4‴b)，3.53 (2H，br s，H-5‴)；caffeoyl：7.08 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2″″)，6.82 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5″″)，6.98 (1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-6″″)，6.31 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α″″)，7.63 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：aglycone：132.9 (C-1)，117.5 (C-2)，147.5 (C-3)，145.8 (C-4)，117.2 (C-5)，122.1 (C-6)，72.3 (C-α)，36.2 (C-β)；glucosyl：103.5 (C-1′)，82.7 (C-2′)，83.6 (C-3′)，71.3 (C-4′)，76.0 (C-5′)，62.8 (C-6′)；xylopentaose：105.9 (C-1″)，76.2 (C-2″)，77.9 (C-3″)，71.5 (C-4″)，67.5 (C-5″)；apiosyl：112.3 (C-1‴)，78.8 (C-2‴)，81.8 (C-3‴)，75.2 (C-4‴)，65.6 (C-5‴)；caffeoyl：124.1 (C-1″″)，115.6 (C-2″″)，149.9 (C-3″″)，147.6 (C-4″″)，117.1(C-5″″)，123.2 (C-6″″)，116.1 (C-α″″)，148.5 (C-β″″)，169.2 (C=O)。以上核磁数据与文献报道的一致[8]，所以化合物4鉴定为fucatoside B，为首次从该植物中分离得到。

化合物5：白色粉末。 ESI-MS：m/z925[M+Na]+；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：caffeoyl：7.06 (1H，s，H-2)，6.79 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5)，6.96 (1H，dd，J=8.1，1.2 Hz，H-6)，7.65 (1H，d，J=15.7 Hz，H-7)，6.29 (1H，d，J=15.7 Hz，H-8)；phenylethylalcohol：6.72 (1H，s，H-2)，6.68 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.58 (1H，dd，J=1.2，8.0 Hz，H-6)，3.99 (1H，m，H-αa)，3.75 (1H，m，H-αb)，2.81 (2H，m，H-β)：glycosyl：4.39 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)，3.39 (1H，H-2′)，3.77 (1H，H-3′)，5.01 (1H，t，J=9.9 Hz，H-4′)，3.70 (1H，m，H-5′)，3.49 (1H，dd，J=11.4，5.6 Hz，H-6′a)，3.77 (1H，H-6′b)；rhamnosyl I：4.63 (1H，d，J=1.4 Hz，H-1″)，3.85 (1H，H-2″)，3.69 (1H，H-3″)，3.37 (1H，H-4″)，3.61 (1H，H-5″)，1.22 (3H，d，J=6.1 Hz，H-6″)；rhamnosyl II：5.49 (1H，d，J=1.4 Hz，H-1‴)，3.96 (1H，dd，J=1.4，3.2 Hz，H-2‴)，3.66 (1H，H-3‴)，3.29 (1H，t，J=8.6 Hz，H-4‴)，3.55 (1H，H-5‴)，1.08 (3H，d，J=6.1 Hz，H-6‴)；arabinosyl：4.31 (1H，d，J=7.3 Hz，H-1″″)，3.60 (1H，H-2″″)，3.51 (1H，H-3″″)，3.79 (1H，H-4″″)，3.55 (1H，H-5″″a)，3.87 (1H，H-5″″b)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：caffeoyl：127.7 (C-1)，115.1 (C-2)，147.2 (C-3)，150.1 (C-4)，116.4 (C-5)，123.1 (C-6)，147.9 (C-7)，114.5 (C-8)，167.7 (C-9)；phenylethylalcohol：131.3 (C-1)，117.0 (C-2)，147.1 (C-3)，144.9 (C-4)，116.3 (C-5)，121.1 (C-6)，72.8 (C-α)，36.5 (C-β)；glycosyl：104.2 (C-1′)，75.9 (C-2′)，82.2 (C-3′)，70.1 (C-4′)，74.5 (C-5′)，67.4 (C-6′)；rhamnosyl I：102.0 (C-1″)，71.8 (C-2″)，71.9 (C-3″)，73.9 (C-4″)，69.9 (C-5″)，17.9 (C-6″)；rhamnosyl II：101.8 (C-1‴)，82.8 (C-2‴)，72.1 (C-3‴)，73.9 (C-4‴)，70.3 (C-5‴)，18.5 (C-6‴)，arabinosyl 107.3 (C-1″″)，72.6 (C-2″″)，74.2 (C-3″″)，69.8 (C-4″″)，67.3 (C-5″″)。以上核磁数据与文献报道的一致[9]，所以化合物5鉴定为poliumoside B，为首次从该植物中分离得到。

化合物6：白色粉末。ESI-MS：m/z793[M+Na]+；1H-NMR (MeOD，500 MHz)δ：6.68 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.63 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.55 (1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，2.79 (2H，t，J=7.4 Hz，H-7)，3.96 (1H，m，H-8a)，3.74 (1H，m，H-8b)，4.34 (1H，d，J=8.0 Hz，H-1′)，3.32 (1H，m，H-2′)，3.51 (1H，m，H-3′)，3.42 (1H，m，J=9.9 Hz，H-4′)，3.55 (1H，m，H-5′)，4.50 (1H，dd，J=11.9，1.7 Hz，H-6′a)，4.34 (1H，J=11.9，6.2 Hz，H-6′b)，5.19 (1H，s，H-1″)，3.98 (1H，m，H-2″)，3.87 (1H，m，H-3″)，3.53 (1H，m，H-4″)，4.12 (1H，dd，J=9.5，6.2 Hz，H-5″)，1.25 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6″)，5.19 (1H，s，H-1‴)，3.88 (1H，m，H-2‴)，3.59 (1H，m，H-3‴)，3.41 (1H，m，H-4‴)，3.72 (1H，m，H-5‴)，1.29 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6‴)，7.04 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2″″)，6.79 (1H，d，J=8.3 Hz，H-5″″)，6.89 (1H，dd，J=8.3，1.9 Hz，H-6″″)，7.57 (1H，d，J=15.9 Hz，H-7″″)，6.29 (1H，d，J=15.9 Hz，H-8″″)；13C-NMR (MeOD，125 MHz)δ：131.4 (C-1)，117.3 (C-2)，144.7 (C-3)，146.4 (C-4)，116.7 (C-5)，121.3 (C-6)，36.8 (C-7)，72.6 (C-8)，104.7 (C-1′)，75.9 (C-2′)，83.6 (C-3′)，70.6 (C-4′)，75.5 (C-5′)，64.9 (C-6′)，103.3 (C-1″)，72.6 (C-2″)，73.1 (C-3″)，81.3 (C-4″)，68.5 (C-5″)，18.8 (C-6″)，102.5 (C-1‴)，73.2 (C-2‴)，72.5 (C-3‴)，73.9 (C-4‴)，70.6 (C-5‴)，17.9 (C-6‴)，127.9 (C-1″″)，115.4 (C-2″″)，146.9 (C-3″″)，149.8 (C-4″″)，116.4 (C-5″″)，123.5 (C-6″″)，147.4 (C-7″″)，115.0 (C-8″″)，169.3 (C-9″″)。以上核磁数据与文献报道的一致[10]，所以化合物6鉴定为ligupurpuroside J，为首次从该植物中分离得到。

化合物7：白色粉末。ESI-MS：m/z785[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：7.31 (1H，d，J=1.8 Hz，H-2)，7.21 (1H，overlap，H-5)，6.82 (1H，dd，J=7.8，1.2 Hz，H-6)，3.06 (2H，t，J=7.2 Hz，H-β)，4.39 (1H，m，H-αa)，3.82 (1H，dt，J=9.6，7.8 Hz，H-αb)，5.46 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，4.20 (1H，dd，J=7.8，2.4 Hz，H-2′)，5.19 (1H，t，J=2.4 Hz，H-3′)，5.51 (1H，dd，J=9.6，2.4 Hz，H-4′)，4.86 (1H，ddd，J=9.6，5.4，1.8 Hz，H-5′)，4.59 (1H，overlap，H-6′a)，4.12 (1H，dd，J=11.4，5.4 Hz，H-6′b)；glucosyl： 4.98 (1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)，4.06 (1H，dd，J=8.4，7.8 Hz，H-2″)，4.25 (1H，dd，J=9.6，8.4 Hz，H-3″)，4.27 (1H，dd，J=9.6，9.0 Hz，H-4″)，3.94 (1H，m，H-5″)，4.53 (1H，dd，J=11.4，1.8 Hz，H-6″a)，4.38 (1H，overlap，H-6″b)；rhamnosyl：5.68 (1H，br s，H-1‴)，4.57 (1H，overlap，H-2‴)，4.69 (1H，dd，J=9.6，3.0 Hz，H-3‴)，4.33 (1H，t，J=9.6 Hz，H-4‴)，4.78 (1H，m，H-5‴)，1.70 (3H，d，J=6.0 Hz，H-6‴)，7.54 (1H，d，J=1.2 Hz，H-2″″)，7.21 (1H，overlap，H-5″″)，7.11 (1H，dd，J=8.4，1.2 Hz，H-6″″)，7.97 (1H，d，J=15.6 Hz，H-7″″)，6.58 (1H，d，J=15.6 Hz，H-8″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：130.9 (C-1)，117.8 (C-2)，147.8 (C-3)，145.9 (C-4)，116.8 (C-5)，120.8 (C-6)，36.6 (C-β)，71.8 (C-α)；glucosyl：100.5 (C-1′)，74.1 (C-2′)，65.6 (C-3′)，70.9 (C-4′)，72.1 (C-5′)，69.6 (C-6′)，105.8 (C-1″)，75.4 (C-2″)，78.4 (C-3″)，71.7 (C-4″)，78.6 (C-5″)，62.9 (C-6″)；rhamnosyl：97.8 (C-1‴)，72.6 (C-2‴)，72.8 (C-3‴)，74.3 (C-4‴)，69.9 (C-5‴)，18.8 (C-6‴)，126.9 (C-1″″)，116.1 (C-2″″)，147.0 (C-3″″)，150.8 (C-4″″)，116.8 (C-5″″)，122.3 (C-6″″)，146.7 (C-7″″)，114.8 (C-8″″)，166.9 (C-9″″)。以上核磁数据与文献报道的一致[11]，所以化合物7被鉴定为magnoloside F，为首次从该植物中分离得到。

化合物8：白色粉末。ESI-MS：m/z785[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycone：6.73 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，6.69 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.58 (1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，2.81 (2H，t，J=7.4 Hz，H-7)，4.04(1H，m，H-8a)，3.75 (1H，m，H-8b)；glucosyl (glc)：4.40 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)，3.41 (1H，dd，J=7.9，9.2 Hz，H-2′)，3.83 (1H，t，J=9.2 Hz，H-3′)，5.01 (1H，dd，J=9.9，9.3 Hz，H-4′)，3.78 (1H，m，H-5′)，3.92 (1H，dd，J=11.5，2.5 Hz，H-6′a)，3.66 (1H，m，H-6′b)；rhamnosyl：5.19 (1H，d，J=1.8 Hz，H-1″)，3.93 (1H，dd，J=3.3，1.8 Hz，H-2″)，3.57 (1H，dd，J=9.6，3.3 Hz，H-3″)，3.30 (1H，m，H-4″)，3.57 (1H，m，H-5″)，1.09 (3H，d，J=6.2 Hz，H-6″)；caffeoyl：6.28 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α‴)，7.61 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β‴)，7.07 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2‴)，6.79 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5‴)，6.98 (1H，dd，J=8.3，2.1 Hz，H-6‴)；6′-O-glc：4.34 (1H，d，J=7.7 Hz，H-1″″)，3.26 (1H，dd，J=9.0，7.8 Hz，H-2″″)，3.48 (1H，m，H-3″″)，3.55 (1H，m，H-4″″)，3.34 (1H，m，H-5″″)，3.84 (2H，m，H-6″″)；4Glc-O-6′-O-glc：4.37 (1H，d，J=7.9 Hz，H-1″″′)，3.23 (1H，dd，J=8.9，7.9 Hz，H-2″″′)，3.38 (1H，m，H-3″″′)，3.35 (1H，m，H-4″″′)，3.34 (1H，m，H-5″″′)，3.86 (1H，m，H-6″″′a)，3.68 (1H，m，H-6″″′b)；13C-NMR(CD3OD，125 MHz)δ：aglycone：131.8 (C-1)，117.5 (C-2)，146.4 (C-3)，144.9 (C-4)，116.7 (C-5)，121.6 (C-6)，36.9 (C-7)，72.7 (C-8)；glucosyl：104.5 (C-1′)，76.4 (C-2′)，81.9 (C-3′)，71.1 (C-4′)，75.0 (C-5′)，69.8 (C-6′)；rhamnosyl：103.3 (C-1″)，72.6 (C-2″)，72.3 (C-3″)，74.1 (C-4″)，70.7 (C-5″)，18.6 (C-6″)；caffeoyl：114.9 (C-α‴)，148.5 (C-β‴)，168.8 (C=O)，127.9 (C-1‴)，115.7 (C-2‴)，147.1 (C-3‴)，150.2 (C-4‴)，116.9 (C-5‴)，123.5 (C-6‴)；6′-O-Glc：104.6 (C-1″″)，75.2 (C-2″″)，76.4 (C-3″″)，80.7 (C-4″″)，76.8 (C-5″″)，62.1 (C-6″″)；4Glc-O-6′-O-Glc：104.8 (C-1″″′)，75.1 (C-2″″′)，78.1 (C-3″″′)，71.5 (C-4″″′)，78.4 (C-5″″′)，62.6 (C-6″″′)。以上核磁数据与文献报道的一致[12]，所以化合物8被鉴定为echinacoside，为首次从该植物中分离得到。

化合物9：白色粉末。ESI-MS：m/z769[M-1]-；1H-NMR (CD3OD，500 MHz)δ：aglycone：6.69 (1H，d，J=1.9，H-2)，6.64 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5)，6.55 (1H，dd，J=8.1，1.9 Hz，H-6)，2.81 (2H，m，H-7)，3.96 (1H，m，H-8a)，3.73 (1H，m，H-8b)；caffeoyl：7.04 (1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)，6.79 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5′)，6.88 (1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H-6′)，7.58 (1H，d，J=15.9 Hz，H-7′)，6.29 (1H，d，J=15.9 Hz，H-8′)；glucosyl：4.46 (1H，d，J=7.7 Hz，H-1″)，3.47 (1H，dd，J=8.9，7.7 Hz，H-2″)，3.62 (1H，dd，J=8.9，8.9 Hz，H-3″)，3.46 (1H，H-4″)，3.54 (1H，H-5″)，4.52 (1H，dd，J=11.7，1.7 Hz，H-6″a)，4.36 (1H，dd，J=11.7，5.9 Hz，H-6″b)；rhamnosyl-I：4.95 (1H，brs，H-1‴)，3.91 (1H，H-2‴)，3.73 (1H，H-3‴)，3.43 (1H，H-4‴)，3.99 (1H，H-5‴)，1.21 (3H，d，J=6.0 Hz，H-6‴)；rhamnosyl-II：4.99 (1H，brs，H-1″″)，3.91 (1H，H-2″″)，3.74 (1H，H-3″″)，3.44 (1H，H-4″″)，3.99 (1H，H-5″″)，1.24 (3H，d，J=6.0 Hz，H-6″″)；13C-NMR (CD3OD，125 MHz)δ：aglycone：131.3 (C-1)，117.3 (C-2)，146.2 (C-3)，144.9 (C-4)，116.8 (C-5)，121.5 (C-6)，36.8 (C-7)，72.6 (C-8)；caffeoyl：127.8 (C-1′)，115.4 (C-2′)，146.9 (C-3′)，149.7 (C-4′)，116.8 (C-5′)，123.4 (C-6′)，147.5 (C-7′)，115.1 (C-8′)，169.3 (C-9′)；glucosyl：102.9 (C-1″)，80.3 (C-2″)，87.4 (C-3″)，70.8 (C-4″)，75.4 (C-5″)，64.7 (C-6″)；rhamnosyl-I：103.9 (C-1‴)，72.6 (C-2‴)，72.5 (C-3‴)，74.1 (C-4‴)，70.9 (C-5‴)，18.0 (C-6‴)；rhamnosyl-II：103.1 (C-1″″)，72.6 (C-2″″)，72.4 (C-3″″)，73.7 (C-4″″)，70.3 (C-5″″)，18.2 (C-6″″)。以上核磁数据与文献报道的一致[13]，所以化合物9被鉴定为isocrassifolioside，为首次从该植物分离得到。

4 活性测定

采用二倍稀释法(将待测样品分别设定为64、32、16.0、4.0、2.0 μg·mL-1)对分离到的化合物分别进行金黄色葡萄球菌ATCC 33591、ATCC 33591，大肠埃希菌(ATCC 25922)，粪肠球菌(ATCC 29212)抑菌活性测试。结果表明化合物1、6、8对金黄色葡萄球菌(ATCC 33591)生长具有中等强度抑制作用，MIC值分别为8.0、16.0、4.0 μg·mL-1。

5 讨论

本文报道从连翘干燥果实中分离鉴定了9个化合物，均为首次从该植物中分离得到，并发现其中的3个化合物具有抑制金黄色葡萄球菌(ATCC 33591)生长的作用。连翘具有清热解毒的功效，已经制成包括双黄连在内的多种制剂。本文的研究成果进一步明确了连翘清热解毒的药效物质，为该药的进一步开发奠定了理论基础。

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AntibacterialPhenylethanoidGlycosidesfromFruitsofForsythiasuspensa

JIANG Xing，LU Limim，ZHANG Chunlei，WANG Xingyan，SUN Qi，WANG Jiatian，YUAN Guangjun*

(iamusiCollege，HeilongjiangUniversityofChineseMedicine，Jiamusi154007，China)

Objective：To Study on the antibacterial phenylethanoids from the fruits ofForsythiasuspensa.Methods：The plant materials were extracted with organic solvent.The extract was extracted by different polarity organic solvents again.Compounds were obtained by comprehensive chromatography.The structures were identified by NMR.Results：Nine compounds were isolated and identified from the fruits ofF.suspensa，including 6′-O-(cis-1，4-dihydroxycyclohexanacetyl)-acteoside (1)，4-O-rhamnosyl-7S，8R-7′，8′-erythro-sisymbrifolin (2)，trichosanthoside A (3)，fucatoside B (4)，poliumoside B (5)，ligupurpuroside J (6)，magnoloside F (7)，echinacoside (8)，and isocrassifolioside (9).Compounds1，6，8showed antibacterial activity againstStaphylococcusaureuswith MICs of 8.0，16.0 and 4.0 μg·mL-1，respectively.Conclusion：Eight phenylethanoide glycosides (1，3-9) and a neolignan (2) were obtained from the plant firstly.

Forsythiasuspensa；phenylethanoide glycosides；antibacterial activity

黑龙江省自然基金项目 (H201464)

] 苑光军，副教授，研究方向：中草药药效物质；Tel：(0554)6103868，E-mail：yuanguangjun@sina.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.5.010

2016-08-01)

*[