依普利酮片的有效成分检测

任 红

（吉林省药物研究院，吉林 长春 130061）

由辉瑞/法玛西亚公司联合进行开发的依普利酮片是一种新型的具有选择性阻断醛固酮受体的阻断剂，也是第一个获得上市准许的醛固酮受体选择性阻断剂[1]。依普利酮对醛固酮受体的选择性很高，避免了相互作用在孕激素受体和雄激素受体上，因此采用该种药品可以避免或减少各种不良反应的发生，在临床上应用的前景良好。依普利酮片良好的降血压作用和持久的作用特性也能够有效的控制高血压、预防心血管疾病对靶器官的损害，减轻心血管由于醛固酮受体受到的不利影响[2]。本文通过采用HPLC法对依普利酮片的有效成分进行测定，进而能够能依普利酮片的质量进行有效的控制。现报告如下。

1 仪器与试剂

仪器：采用日本岛津公司生产的LC-10AT高效液相色谱仪和德国赛多利斯股份公司生产的Sartorius BS 21S电子天平[3]。

试剂：采用本院提供的纯度为99.8%的依普利酮对照品、依普利酮原料药品以及本院提供的规格为25 mg的依普利酮片。色谱纯为乙腈，而分析纯为除乙腈外的其他试剂。

2 方法与结果

2.1 确定检测波长

取依普利酮片溶解稀释制成含量为10 μg/ml的溶液，采用200～400 nm的波长用紫外-可见分光光度法扫描处理好的溶液。结果发现在波长为244 nm时本产品的吸收度最大。

2.2 试验色谱条件与系统的适用性

在色谱柱柱温为20℃，乙腈与水的比例为30:70，液体流速为1.0 ml/min，检测波的波长为244 nm，进样20 μl的条件下，计算依普利酮峰的理论板数结果大于2000。

2.3 线性实验

精密地称量适量依普利酮对照品进行溶解稀释，分别制成20.144 μg/ml、60.432 μg/ml、100.720 μg/ml、141.008 μg/ml与201.440 μg/ml的溶液，每种溶液分别取20 μl，将去取出的溶液倒入液相色谱仪中并记录结果色谱图，并得到以C（依普利酮浓度）和A（峰面积）为变量的线性回归方程为A=8721.3C+355.01（r=0.9999）。通过实验结果可知在20.144～201.44 μg/ml的依普利酮浓度范围内时，峰面积和样品浓度有良好的线性关系。

2.4 空白试验

向100 ml的量瓶中置入精密称取的适量的空白辅料，溶解稀释至量瓶的刻度线处，取适量的滤液按照“2.7样品测定”的操作方法记录结果的色谱图。结果发现空白辅料对测定结果无干扰。

2.5 精密度与稳定性

取批号相同的供试品制成溶液，先进性6次的重复性进样，此时测出的依普利酮含量的RSD=0.38%；同样取这个批号的供试品制成溶液，在0 h、2 h、4 h、6 h和8 h分别进样，测得RSD=0.22%。检测结果发现在8 h之内依普利酮供试品有良好的稳定性。

2.6 回收率实验

分别向100 ml的量瓶中置入9份按照处方精密称取共140 mg空白辅料，在其中3份中加入精密称取的20 mg依普利酮对照品，其中3份则加入精密称取的25 mg依普利酮对照品，最后3份则加入精密称取的30 mg依普利酮对照品。按照同样的方法配制供试品的溶液。结果测得平均回收率为99.1%，RSD为0.65%。

2.7 样品测定

取20片本次试验的依普利酮片，研磨并精密地称取适量粉末置入容量大小为25 ml的量瓶中，溶解稀释至刻度线，向25 ml量瓶中置入精密称取的5 ml的滤液，并稀释至刻度，用作供试品。随后精密地量取20 μl该溶液注入液相色谱仪记录结果色谱图；此外按照同种方法测定依普利酮对照品。测得所测得3个批次的依普利酮的含量值为99.3%、99.2%和99.5%，RSD为0.6%、0.6%和0.8%。

3 讨 论

分别采用高效液相色谱法（HPLC）和紫外-可见分光光度法检测依普利酮片的含量有基本一致的测量结果，但HPLC法结果更准确且有较好的重现性。在温度为40℃±2℃，RH75%±5%的条件下将本次测定的依普利酮片进行6个月的加速实验，在温度为25℃±2℃，RH60%±10%的条件下留样12个月进行长期考察，均发现依普利酮片中有关物质以及溶液的含量和pH值变化不明显，表明在这两种情况下贮存依普利酮片有较好的稳定性。

综上所述，运用HPLC法能够有效的检测依普利酮片的有效成分，操作简便，结果可靠，可应用在控制依普利酮片的质量上，因此采用此种方式不失为一种行之有效的方法，值得应用。

[1]杜明荦,连 莹.HPLC法测定依普利酮片含量及有关物质[J].医药论坛杂志,2017,(7).28

[2]陈 静,潘春燕,王 璐,等.人血浆中依普利酮的LC-MS/MS测定研究[J].药物分析杂志,2016,(11):1925-1930.