高效液相色谱法测定胃乐胶囊中硫酸阿托品含量

李德潮

（广西医科大学制药厂，广西 南宁 530021）

高效液相色谱法测定胃乐胶囊中硫酸阿托品含量

李德潮

（广西医科大学制药厂，广西 南宁 530021）

目的 建立测定胃乐胶囊中硫酸阿托品含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法 色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4．6 mm，5 m），流动相为0．05 mol／L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH至2．8）－乙腈（90∶10），柱温为30℃，流速为1．0 mL／min，检测波长为210 nm。结果 硫酸阿托品质量浓度在10．0～100．0 g／mL范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率为98．88%，RSD为0．50%(n＝6)。结论 该方法准确、灵敏、重复性好，可作为胃乐胶囊的质量控制方法。

高效液相色谱法；胃乐胶囊；硫酸阿托品；含量测定

胃乐胶囊为复方制剂，由氢氧化铝、白及、颠茄流浸膏等组方，具有行气止痛、收敛生肌、促进溃疡愈合的功效，临床用于治疗胃胀闷疼痛、嗳气泛酸、恶心呕吐、食少、疲乏无力、大便不畅等疾病，收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂(第十七册)》。处方中颠茄流浸膏的主要有效成分为硫酸阿托品，为解痉药，可解除平滑肌痉挛、镇痛等[1]，是胃乐胶囊止痛功效的主要组分。其现行质量标准中无颠茄流浸膏主要成分的定量分析。为提高胃乐胶囊的质量标准，笔者参考文献[2－5]，采用高效液相色谱(HPLC)法测定硫酸阿托品含量，操作简单、结果准确可靠，现报道如下。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪（515泵，美国Waters公司）；天平（德国Sartorius公司）；台式超声波振荡仪。硫酸阿托品对照品（中国食品药品检定研究院，批号为100040－201312）；胃乐胶囊（广西医科大学制药厂，批号分别为20141101，20141201，20150101）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件[3]及系统适用性试验

色谱柱：Kromasil C18柱（250 mm×4．6 mm，5 μm）；流动相：0．05 mol／L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH至2．8）－乙腈（90∶10）；流速：1．0 mL／min；检测波长：210 nm；柱温：30℃；进样量：10 μL。理论板数以硫酸阿托品峰计算不低于4 000。在此色谱条件下，对照品溶液与供试品溶液在相同保留时间处有相同的色谱峰，供试品溶液有效峰与杂峰能很好分离，分离度大于2．0，拖尾因子不超过1．05，阴性对照品溶液与对照品溶液及供试品溶液在相同保留时间处无相应色谱峰，色谱图见图1。

2．2 溶液制备

精密称取120℃干燥至恒重的硫酸阿托品对照品10．0 mg，置100 mL容量瓶中，加流动相溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取胃乐胶囊20粒，取药粉，研细，精密称取4．0 g，置具塞三角瓶中，加流动相溶液20．0 mL，称重，超声30 min，完全溶解，放冷，称重，用流动相溶液补足质量，充分摇匀，用微孔滤膜（0．45 μm）滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按胃乐胶囊的处方比例及制备工艺，制成缺颠茄流浸膏的制剂，按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液。

2．3 方法学考察

线性关系考察：精密吸取对照品溶液 1．0，2．0，4．0，6．0，8．0，10．0 mL，置10 mL容量瓶中，加流动相溶液稀释至刻度，摇匀，得10．0，20．0，40．0，60．0，80．0，100．0 μg／mL的系列标准溶液，分别进样10 μL，以硫酸阿托品峰面积（A）为纵坐标、对照品质量浓度（C，μg／mL）为横坐标进行线性回归，得回归方程 A＝54 960 C－26 758，r＝0．999 5（n＝6）。结果表明，硫酸阿托品质量浓度在10．0～100．0 μg／mL范围内与峰面积线性关系良好。

图1 高效液相色谱图

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液5．0 mL，置10 mL容量瓶中，加流动相溶液稀释至刻度，摇匀，精密吸取10 μL，重复进样6次，测定峰面积。结果的 RSD为0．68%（n＝6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液（批号为20141201），分别于 0，2，4，6，8，12，16 h时进样。结果的 RSD为 0．64（n＝7），表明供试品溶液在 12 h内稳定。

重复性试验：取本品（批号为20141101）适量，按拟订方法分别制备5份供试品溶液，进样测定。结果的RSD为0．59%（n＝5），表明该方法重复性良好。

加样回收试验：精密称取样品(批号为20141201，含量以0．143 mg／g计）3．0 g 6份，分别置20 mL容量瓶中，再分别精密加入硫酸阿托品对照品溶液 1．0，4．0，7．0 mL，按拟订方法制备6份供试品溶液，测定硫酸阿托品的含量，计算回收率，结果见表1。

2．4 样品含量测定

取本品3批，测定硫酸阿托品含量。结果批号为20141101，20141201，20150101的样品中硫酸阿托品的含量分别为0．143，0．143，0．144 mg／g。

表1 硫酸阿托品加样回收试验结果（n＝6）

3 讨论

胃乐胶囊为复方制剂，含颠茄流浸膏成分较少，要尽可能地提取完全硫酸阿托品，才能准确地定量检测。参考文献[3－6]，试验了2种提取方法：用氨溶液溶解样品，然后用乙酸乙酯萃取；用超声波振动提取。结果用第2种方法提取硫酸阿托品更完全。同时，试验分别采用10，20，30，45，60 min进行超声提取，结果提取30 min后硫酸阿托品提取率趋于恒定，故确定30 min为超声提取时间。

试验中发现，流动相及流动相成分比例对本法测定含量有较大影响。试用了水－甲醇、磷酸五氢钠溶液－乙腈、水－缓冲盐－乙腈等，经反复多次试验，选用磷酸二氢钠溶液－乙腈为流动相较合适；同时，试验中改变流动相中磷酸二氢钠与乙腈的比例，结果发现乙腈量减少，洗脱时间会相应延长，且峰形拖尾严重，检测灵敏度降低明显；磷酸二氢钠量减少，样品中硫酸阿托品峰与其他峰分离不好。本研究中选定的流动相及成分比例比较合适，分离度好且保留时间适宜。

本研究中建立的HPLC法测定胃乐胶囊中硫酸阿托品的含量，能有效分离色谱峰，精密度、重复性及线性关系良好，回收率满意，方法可行，可作为胃乐胶囊的质量控制方法。

[1]肖培根．新编中药志[M]．北京：化学工业出版社，2002：402．

[2]李晓燕，吕 杰．高效液相色谱法测定硫酸阿托品注射液的含量[J]．中国药业，2009，18（13）：29－30．

[3]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：396－397．

[4]刘益庆，陈乃江．高效液相色谱法测定维U颠茄铝镁片中硫酸阿托品含量[J]．中国药业，2011，20（10）：35－36．

[5]黄东亮，黄小玲．超声波提取颠茄草有效成分莨菪碱的技术[J]．中国药业，2002，11（10）：58－59．

[6]韩忠刚，冯 华，罗秀琼．HPLC色谱法测定颠茄浸膏片中硫酸阿托品的含量[J]．中医药导报，2008，14（9）：82－83．

Determination of Atropine Sulfate in Weile Capsules by HPLC

Li Dechao
（Pharmaceutical Factory of Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，China 530021）

Objective To establish an HPLC method for the determination of atropine sulfate in Weile Capsules．M ethods The chromatographic column was the Kromasil C18column（250 mm×4．6 mm，5 μm）at the temperature of 30℃，with 0．05 mol／L sodium dihydrogen phosphate solution（adjusting pH to 2．8 with phosphoric acid）－acetonitrile（90∶10）as the mobile phase and detected with UV 210 nm and the flow rate of 1．0 mL／min．Results The Atropine Sulfate in the range of 10．0－100．0 μg／mL showed good linear relatiomship with the peak area，the average recovery rate was 98．88%，RSD＝0．50%(n＝6)．Conclusion This method is accurate，sensitice and reproducible，which can be used for the determination of atropine sulfate in Weile Capsules．

HPLC；Weile Capsules；atropine sulfate；content determination

李德潮（1972－），男，高级工程师，主要从事质量标准和制剂开发研究工作，（电话）0771－5350239。

2015－02－05；

2015－07－13)

R284．1；R286．0

A

1006－4931(2016)02－0068－02