紫外－可见分光光度法测定不同产地罗汉果中多糖含量

彭 瑾，张 蓉，彭 梅

（1．中国人民解放军第三军医大学新桥医院，重庆 400037； 2．贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州 贵阳 550002）

紫外－可见分光光度法测定不同产地罗汉果中多糖含量

彭 瑾1，张 蓉1，彭 梅2

（1．中国人民解放军第三军医大学新桥医院，重庆 400037； 2．贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州 贵阳 550002）

目的 为寻找新的罗汉果培育地提供参考。方法 以 D－无水葡萄糖作为对照品，采用紫外－可见分光光度法于480 nm波长处对10批罗汉果多糖的含量进行测定，分析不同产地罗汉果多糖的含量。结果 不同产地罗汉果多糖的含量差异较大，广西三江县的罗汉果多糖含量为福建上杭县的2倍。结论 多糖含量的分析结果验证了广西北部地区为罗汉果的道地产地。栽培于江西南部南康市的罗汉果多糖含量也较高，该地区也可初步作为罗汉果栽培的重点地区进行深入考察验证。

罗汉果；多糖；紫外－可见分光光度法

罗汉果为葫芦科植物罗汉果 Siraitia grosvenorii（Swingle）C．Jeffrey ex A．M．Lu et Z．Y．Zhang的干燥果实[1]。植物分布于广西、广东、贵州、江西、湖南南部等地区，主产于广西，味甘、性凉，归肺、大肠经，具有清热润肺，利咽开音、润肠通便的功效，用于肺热燥咳、咽痛失音、肠燥便秘等。现代研究表明，罗汉果具有祛痰止咳[2]、保肝[3]、增强免疫力[4]、抗氧化[5]等活性，且多与罗汉果甜味物质（如糖或糖苷类化合物）有关[5]。但2010年版《中国药典(一部)》仅对罗汉果皂苷V作了规定，并未界定罗汉果多糖的含量。多糖是罗汉果中重要的活性成分，具有抗癌、抗氧化等活性[6]。笔者利用紫外－可见分光光度法对10批栽培罗汉果样品中多糖的含量进行了测定，分析了罗汉果产地和多糖含量之间的关系，为开发罗汉果提供必要的科学依据。现报道如下。

1 仪器与试药

10批栽培罗汉果药材的来源信息见表1，经贵阳中医学院王悦芸副教授鉴定为葫芦科植物罗汉果 Siraitia grosvenorii（Swingle）C．Jeffrey ex A．M．Lu et Z．Y．Zhang的干燥果实。759S型紫外－可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）；AB104－S／FACT型电子天平（梅特勒－托利多仪器＜上海＞有限公司，d＝0．000 1 g）；水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）。D－无水葡萄糖对照品（批号为110833－201205，中国食品药品检定研究院）；苯酚、浓硫酸等试剂均为分析纯。

表1 10批罗汉果的来源

2 方法与结果

2．1 溶液制备[7]

用超声提取。取10批干燥的罗汉果粉末各约1．0 g，各加入50℃热水30 mL，超声提取3次，每次5 min，合并3次的提取液，减压浓缩，加入95%乙醇使罗汉果多糖沉淀，离心20 min，过滤得沉淀，将沉淀溶解于水后滤除不溶物，回收残留的乙醇，转移到100 mL容量瓶里，加水定容，即得供试品溶液。精密称取在100℃干燥至恒重的 D－无水葡萄糖对照品10．1 mg，用蒸馏水溶解，转液至100 mL容量瓶中，定容，即得0．10 g／L的对照品溶液。

2．2 换算因子测定

精密称取罗汉果多糖30．0 mg，置100 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容。精密吸取配制好的多糖溶液2．0 mL，置25 mL容量瓶，蒸馏水定容后，吸取1．0 mL，置10 mL比色管中，加入1 mL新配制的5%苯酚和5 mL浓硫酸，摇匀，静置30 min，在480 nm波长处扫描，按下式计算换算因子(f)，f＝W／（C×D）。式中，W为罗汉果多糖的质量（mg）；C为罗汉果多糖中葡萄糖的质量浓度（g／L）；D为罗汉果多糖的稀释倍数。经计算得换算因子 f为3．41，RSD为1．44%。

2．3 方法学考察

标准曲线绘制：精密量取质量浓度为 0．10 g／L的对照品溶液0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2 mL，分别置试管中，补加蒸馏水至体积为2 mL，分别取新配制5%的苯酚溶液 1 mL，摇匀后迅速加入 5 mL的浓硫酸，摇匀后沸水加热20 min，取出冷却至室温，以相应的试剂为空白对照。在480 nm波长处测定吸光度，以对照品溶液中 D－无水葡萄糖的质量浓度（C，μg／mL）为横坐标、吸光度（A）为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程A＝33．42 C＋0．059，r＝0．999 7(n＝6)。结果表明，D－无水萄葡糖质量浓度在10．10～60．60 μg／mL范围内与吸光度具有良好的线性关系。

精密度试验：精密量取1．0 mL同一 D－葡萄糖对照品溶液，于480 nm波长处扫描，连续重复测定吸光度6次。结果的 RSD＝1．27%（n＝6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别在放置0，15，30，45，60，90 min后测定吸光度。结果的 RSD＝2．41%（n＝6），表明供试品溶液在2．0 h内稳定。

重复性试验：取同一批药材的供试品溶液，采用与稳定性试验相同的方法制备6份平行测定3次。结果的RSD＝0．95%（n＝6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：取已知含量为55．08 mg／g的罗汉果样品约1．0 g，按已知样品含量的80%，100%，120%加入对照品，依法测定。计算回收率，结果见表2。

表2 D－无水葡萄糖加样回收试验结果（n＝6）

2．4 样品含量测定

取10批罗汉果药材，按供试品溶液方法对各批药材平行测定3次，计算得罗汉果多糖含量，见表3。

表3 不同产地栽培罗汉果中多糖含量测定结果（n＝3）

3 讨论

糖类成分在天然药物中分布十分广泛，占植物干重的80%～90%。如人参、灵芝、刺五加等都含有大量的糖类，也是其有效成分。由于糖类在生物合成及在细胞间的识别、受精、胚胎形成、细胞增殖、肿瘤细胞转移等许多基本生命过程中具有重要作用，对糖类的研究一直十分活跃[8]。目前已知多糖具有抗菌[9]、抗氧化[10]、抗癌[11]等多种活性，作为天然的高效药物，在癌症、艾滋病等重大疾病的治疗药物研究中具有广泛的应用前景[12]。

本研究结果显示，广西三江县的罗汉果中多糖含量最高。虽然罗汉果在多个地区均有栽培，但其对自然环境的要求比较特殊，结合其地理分布及采集地区，在广西北部（三江县、永福县、融安县）、广东北部（乳源县、连山县）栽培的罗汉果多糖含量高于云南、福建等地的样本，同时也验证了广西北部地区为罗汉果的道地产地。该结果与样本收集地的地理位置、土质及地理气候环境的差异也有一定关系。此外，栽培于江西南部南康市的罗汉果多糖含量也较高，结合罗汉果的市场供需状况及多糖含量，该地区可作为罗汉果培育地区，值得进一步考察验证。

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：197．

[2]刘 晶，孙 瑜．罗汉果及罗汉果提取物药理作用的研究[J]．黑龙江科技信息，2013（5）：99．

[3]Pan MH，Yang JR，Tsai ML，et al．Anti－inflammatory effect of Momordica grosvenori Swingle extract through suppressed LPS－induced upregulation of iNOS and COX－2 in murine macrophages[J]．J Funct Foods，2009，1（2）：145－152．

[4]肖 刚，王 勤．罗汉果甜苷对小鼠实验性肝损伤保护作用的研究[J]．中国药房，2008，19（3）：163－165．

[5]张 静，吴友良，张婵娟，等．罗汉果药理活性研究进展[J]．中国药业，2010，19（20）：84－86．

[6]Lin GP，Jiang T，Hu XB，et al．Effect of Siraitia grosvenorii polysaccharide on glucose and lipid of diabetic rabbits induced by feeding high fat／high sucrose chow[J]．Exp Diabetes Res，2007，2007（1）：67 345．

[7]李 俊，黄锡山，张艳军，等．超声波法提取罗汉果多糖的工艺研究[J]．中药材，2007，30（4）：475－477．

[8]Boons GJ．Carbohydrate Chemistry[M]．London：Blackie Academic＆Professional，1998：1．

[9]Zhu HJ，Sheng K，Yan EF，et al．Extraction，purification and antibacterial activities of a polysaccharide from spent mushroom substrate[J]．Int J Biol Macromol，2012，50（3）：840－843．

[10]Ji P，Wei YM，Xue WX，et al．Characterization and antioxidative activities of polysaccharide in Chinese angelica and its processed products[J]．Int J Biol Macromol，2014，67：195－200．

[11]Fan LP，Ding SD，Ai LZ，et al．Antitumor and immunomodulatory activity of water－soluble polysaccharide from Inonotus obliquus[J]．Carbohyd Polym，2012，90（2）：870－874．

[12]隋玉荣 ．多糖类药物的研究进展[J]．天津药学，2013，25（2）：41－43．

Contents Determination of Polysaccharides in Siraitia Grosvenorii（Swingle）from Different Regions by UV M ethod

Peng Jin1，Zhang Rong1，Peng Mei2
（1．Department of Pharmacy，Xinqiao Hospital of The Third Military Medical University，Chongqing，China 400037；2．The Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences，Guiyang，Guizhou，China 550002）

Objective To analyze the contents of polysaccharides in Siraitia grosvenorii（Swingle）from different regions and provide a reference for looking for new cultivation．M ethods The contents of polysaccharides in 10 samples were evaluated with D－glucose as standard material by Ultraviolet－Visible spectrophotometry at 480 nm．Results The contents of polysaccharides in Siraitia grosvenorii（Swingle）from different regions had significant difference．The sample from Sanjiang city of Guangxi province was twice as large as Shanghang cityof Fujian province．Conclusion According totheresults of the contentsof polysaccharides，thenorth of Guangxi province was the best origin of Siraitia grosvenorii（Swingle），and the sample from Nankang city of Jiangxi province also has higher contents of polysaccharides，the region can also be as a focus areas of cultivation of Siraitia grosvenorii（Swingle）for further research．

Siraitia grosvenorii（Swingle）；polysaccharides；Ultraviolet－Visible Spectrophotometry

彭瑾（1985－），女，重庆人，大学本科，药师，主要从事药品调配及评价工作，（电子信箱）530955177＠qq．com；彭梅（1985－），女，硕士研究生，助理研究员，主要从事天然产物化学研究工作，本文通讯作者，（电子信箱）573278625＠qq．com。

2015－03－30；

2015－06－29)

R284．1；R282．71

A

1006－4931(2016)02－0051－03