露源胶囊中枸杞子、女贞子的薄层色谱鉴别研究

徐芳琴，马晨超，曹金一，杨志福，石小鹏，文爱东

（中国人民解放军第四军医大学西京医院药剂科，陕西 西安　710032）

露源胶囊中枸杞子、女贞子的薄层色谱鉴别研究

徐芳琴，马晨超，曹金一，杨志福，石小鹏，文爱东

（中国人民解放军第四军医大学西京医院药剂科，陕西 西安710032）

目的 改进露源胶囊的薄层色谱（TLC）鉴别方法。方法 采用TLC法对主要成分枸杞子和女贞子进行定性鉴别。结果 薄层色谱斑点清晰，在与对照药材或对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点，阴性样品无干扰。结论 该方法操作简便，专属性高，重复性好，可作为露源胶囊的质量控制方法。

露源胶囊；质量标准；薄层色谱法；枸杞子；女贞子

露源胶囊是第四军医大学西京医院根据验方研制的院内制剂［兰制字（2011）F68044号］，由当归、何首乌、枸杞子、女贞子等8味中药组方，具有活血养血、滋补肝肾的功效。枸杞子味甘，性平，具有滋补肝肾、益精明目之功效，用于虚劳精亏、腰膝酸痛、眩晕耳鸣、内热消渴、血虚萎黄、目昏不明，为方中君药；女贞子味甘、苦，性凉，具有补益肝肾、明目、清虚热的功效，主治头晕目眩、须发早白、视物昏花、阴虚发热，亦为方中君药。该制剂所含药味种类众多，成分复杂，现行质量标准中仅有当归和制何首乌的薄层色谱（TLC）鉴别，不能完全满足质量控制的要求。本试验中对该制剂的质量标准进行了完善和提高，新增枸杞子和女贞子的薄层鉴别项，提高了现行质量标准对产品的可控性［1］。

1　仪器与试药

1.1仪器

KQ-250DE型超声波提取器（北京亚欧德鹏科技有限公司）；ZF-2型紫外光灯分析仪（上海市安亭电子仪器厂）；HH-2型数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）；UPDR-11-20型优普超纯水机（四川优普超纯科技有限公司），硅胶G薄层板（厚度0.20～0.25 mm，青岛海洋化工厂分厂）；硅胶G薄层板（自制）。

1.2试药

枸杞子对照药材（批号为121232-201102）、女贞子对照药材（批号为121041-200703），均购自中国药品生物制品检定所；露源胶囊（第四军医大学第一附属医院药品制剂科提供，批号分别为140802，140803，140804）；乙酸乙酯、三氯甲烷、甲酸、甲醇、环己烷、甲苯及丙酮均为分析纯，水为实验室自制纯化水。

2　方法与结果

2.1枸杞子的TLC鉴别［2-5］

2.1.1溶液制备

参照2010年版《中国药典（一部）》枸杞子鉴别方法，取本品10粒，加水35 mL，加热煮沸15 min，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯15 mL振摇提取，分取乙酸乙酯液，浓缩至1 mL，作为供试品溶液。取枸杞子对照药材0.5 g，按供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。取阴性对照样品1.5 g，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.1.2展开系统选择

照2010年版《中国药典（一部）》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10 μL，用硅胶G薄层板考察了2种展开系统的分离效果，展开剂选择乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸（3∶2∶1）和甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）。结果显示，苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）的分离效果较好，见图1。

2.1.3方法学考察

专属性试验：依照处方取除枸杞子以外的药材，按照样品制备工艺制成阴性对照样品，照2.1.1项下方法制备阴性对照品溶液。结果显示，阴性对照品溶液无干扰，专属性良好，见图1。

图1　露源胶囊中枸杞子专属性TLC图谱

耐用性试验：考察不同来源的薄层板（硅胶G板，包括自铺的和青岛海洋化工厂提供的）。结果显示，2种硅胶G板结果相同，但青岛海洋化工厂的薄层板分离效果较自制板好，斑点更清晰，说明拟订的鉴别方法耐用性较好，见图2。

图2　露源胶囊中枸杞子耐用性TLC图谱

重复性试验：按拟订鉴别方法对3批样品（批号分别为140802，141003，141204）进行枸杞子的鉴别检测。结果3批供试品色谱中，在与枸杞子对照药材色谱相应位置上，均显相同颜色的斑点，表明拟订的枸杞子鉴别方法重复性良好，见图3。

图3　露源胶囊中枸杞子重复性TLC图谱

2.2女贞子的TLC鉴别［6-10］

2.2.1溶液制备

参照2010年版《中国药典（一部）》女贞子鉴别方法，取本品20粒加三氯甲烷20 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL溶解，作为供试品溶液。取女贞子对照药材0.5 g，按供试品溶液制备方法制备对照药材溶液。取阴性对照样品3.0 g，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2.2.2展开系统选择

照2010年版《中国药典（一部）》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10 μL，用硅胶G薄层板考察了2种展开系统的分离效果，展开剂为三氯甲烷-甲醇-甲酸（40∶1∶1）和环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）。结果显示，展开剂环己烷-丙酮-乙酸乙酯的分离效果较好，见图4。

2.2.3方法学考察

专属性试验：依照处方取除女贞子外的药材，按照样品制备工艺制成阴性对照样品，照2.2.1项下供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。结果显示，阴性对照品溶液无干扰，方法专属性较好，见图4。

图4　露源胶囊中女贞子TLC图谱

耐用性试验：考察不同来源的薄层板（硅胶G板，包括自铺的和青岛海洋化工厂提供的）。结果显示，2种硅胶G板结果相同，但青岛海洋化工厂的薄层板分离效果较自制板好，斑点更清晰，说明拟订的鉴别方法耐用性较好，见图5。

图5　露源胶囊中女贞子耐用性TLC图谱

重复性试验：按拟订的鉴别方法对3批样品（批号分别为140802，141003，141204）进行女贞子的鉴别检测。结果3批供试品色谱中，在与女贞子对照药材色谱相应位置上，均显相同颜色的主斑点，说明拟订的枸杞子鉴别方法重复性良好，见图6。

图6　露源胶囊中女贞子重复性TLC图谱

3　讨论

薄层色谱是中药鉴别、中药成方制剂质量标准主要的研究和控制手段之一，其研究质量对中药成方制剂新药项目的质量标准有重要意义［11］。根据药物的分子结构与理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来鉴别药物，是检验工作的首要任务，是杂质检查和含量测定的前提。因此，药物鉴别在药物质量检查中有着至关重要的地位。另外，TLC法是药物鉴别最基本、简便，使用最广泛的方法，分别在化学药品、抗生素、中药材、中成药及基层药品的鉴别检查中起重要作用［12］。

枸杞子、女贞子经过处理提取制样后，依照2015年版《中国药典》薄层色谱法试验，分别比较了2个展开系统的分离效果［13］。结果显示，枸杞子以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）为展开系统，薄层效果斑点清晰，分离度好；女贞子以环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）为展开系统，薄层效果斑点清晰，分离度好［14］。

本试验结果还表明，枸杞子、女贞子的TLC法的专属性强、耐用性和重复性好，结果均较满意［15］。因此，将该方法作为本制剂的TLC法纳入露源胶囊的质量标准中，符合《军队医疗机构制剂质量标准提高技术要求》。

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［2］常吉梅，常娟.芪柴护肝颗粒的制备与质量控制［J］.中国实用医药，2012，7（3）：251-252.

［3］刘莉，齐洋.杞菊地黄胶囊薄层鉴别方法的研究［J］.黑龙江医药，2014，27（3）：517-519.

［4］陈芳，殷杨，宋愿智.调经祛斑片质量标准研究［J］.现代中医药，2014，34（1）：87-89.

［6］黎丽，吴其当，黄锦威，等.糖安胶囊的薄层鉴别研究［J］.北方药学，2014，11（4）：9.

［7］栾兰，肖永庆，李丽，等.女贞子饮片质量评价研究［J］.中国药事，2013，27（7）：715-717.

［8］范梅娟.强力健身胶囊定性定量方法的研究［J］.药物分析杂志，2012，32（4）：697-700.

［9］牛倩倩，陈梦钰，焦海胜.健肾Ⅱ号胶囊质量标准研究［J］.中华中医药学刊，2016，34（7）：1 781-1 783.

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［11］李向军，王超，王永，等.中药薄层色谱影响因素分析及应用［J］.中国药业，2011，20（14）：13-15.

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［13］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2015：46，249.

［14］周军，张茉，王杰.益肺清化膏质量标准研究［J］.天津药学，2015，27（4）：10-13.

［15］陶善斌，汪电雷.穿黄消炎胶囊的质量控制研究［J］.安徽医药，2013，17（6）：932-934.

Identification of Lycium barbarumL and Ligustrum lucidum Ait in Luyuan Capsules by TLC

Xu Fangqin，Ma Chenchao，Cao Jinyi，Yang Zhifu，Shi Xiaopeng，Wen Aidong
（Department of Pharmacy，Xijing Hospital Affiliated to the Fourth Military Medical University，Xi′an，Shaanxi，China710032）

ObjectiveTo improve the TLC method for the identification of Luyuan Capsules.MethodsThe two chief herbs in the preparation，Lycium barbarum L and Ligustrum lucidum Ait were identified by TLC qualitatively.ResultsThe spots of the TLC were clear，and the main spots of the same color were the same in those control drugs.The negative samples had no interference.Conclusion The method is simple，high specific with good repeatability，which can be used as the quality control method of the Luyuan Capsules.Key words：Luyuan Capsules；quality standard；TLC；Lycium barbarum L；Ligustrum lucidum Ait

R284.1；R286.0

A

1006-4931（2016）20-0057-03

徐芳琴（1975-），女，陕西岐山人，汉族，大学本科，主管药师，研究方向为临床药学，（电话）029-84771625（电子信箱）xfq750274＠sina.com；石小鹏，副主任药师，硕士研究生导师，研究方向为临床药理学与药事管理学，本文通讯作者，（电话）029-84775471。

（2016-07-13）