银黄消痤胶囊对兔耳痤疮模型抗角化作用的实验研究*

连莉阳 王 军 李治牢 王晓莉

陕西中医药大学附属医院皮肤科(咸阳 712000)



·实验研究·

银黄消痤胶囊对兔耳痤疮模型抗角化作用的实验研究*

连莉阳 王 军△李治牢 王晓莉

陕西中医药大学附属医院皮肤科(咸阳 712000)

目的：探讨银黄消痤胶囊治疗寻常痤疮的作用机理。方法：将 60只雄兔随机分为空白组、模型组、银黄大、银黄中、银黄小及阳性对照组，每组各10只，后5组建立兔耳痤疮模型，造模成功后，前两组用纯净水灌胃,后四组分别用银黄消痤胶囊大、中、小剂量及珍珠暗疮片混悬液灌胃。2周后取兔耳痤疮标本作组织学切片, 光镜下观察皮损病理变化。结果：银黄大剂量组和阳性对照组均可明显改善皮损角化过程，与模型组比较有显著性差异，且银黄大剂量组疗效优于对照组。结论：银黄消痤胶囊治疗寻常痤疮机理是减轻皮损角化及真皮炎症。

寻常痤疮是一种由多因素引起的毛囊、皮脂腺的慢性炎症性皮肤病，好发于青春期男女颜面、颈胸等部位，由于本病病程慢性，且具有一定的损容性，故对患者的身心健康产生一定影响。现代研究认为粉刺的形成与雄激素水平增高、毛囊导管角化异常、皮脂分泌过多、感染等因素有关。体内雄激素水平升高或雌、雄激素比例失调，雄激素相对升高，可使皮脂腺腺体增殖，且合成、分泌皮脂增加；毛囊内寄生菌如痤疮丙酸杆菌可分解甘油三酯，产生的游离脂肪酸刺激毛囊及皮脂腺开口处上皮，使之增生及角化过度，皮脂排出不畅，形成粉刺。中药银黄消痤胶囊是我院制剂科研制的治疗粉刺、面疮、脂溢性皮炎、酒糟鼻的有效药物，经临床使用，疗效显著，为进一步探讨该药物治疗本病的作用机制，我们通过模拟兔耳痤疮模型, 观察该药物对上皮角化、毛囊内角化物质、毛囊、皮脂腺扩张程度以及真皮层炎细胞浸润的改善程度，从而为临床治疗提供实验依据。

1 材 料

1.1 动 物 健康雄性家兔60只,体重(2.3±0.2) kg, 标准饲料喂养。西安交通大学医学院实验动物中心提供，合格证号：scxk(陕)2014- 003。

1.2 药物与器材 银黄消痤胶囊(陕西中医药大学附属医院制剂科，批准文号:陕药制字Z 20160003)；复方珍珠暗疮片(国药准字 Z44021584)。黑色糊状煤焦油购自咸阳市焦化厂；橄榄油,市售。BX- 51 型 olympus 光学显微镜；江苏无锡朗伽 LOGENE- 1 形态学图像分析仪。

2 方 法

将60只雄兔随机抽取10只以橄榄油涂于双耳内侧面作为空白组，其余50只按文献[1]方法于每只家兔双耳内侧面耳管开口处, 约3cm× 3cm范围,外涂煤焦油每日1次,每次0.4ml,连续2周,制备动物痤疮模型。两周后将上述造模雄兔随机分为模型组、银黄消痤胶囊大、中、小剂量组和复方珍珠暗疮片阳性对照组共5组,每组10只。每日灌饲药物2次,每次5ml,给药剂量为小剂量组0.3 g/kg、中剂量组0.6g/kg和大剂量组 1.2g/kg,分别相当于成人临床等效剂量的3倍、6倍和12倍，阳性对照药为复方珍珠暗疮片，给药剂量0.67 g/kg,相当于成人临床剂量6倍,模型对照组和空白对照组给予等量纯净水灌饲，每日2次，每次5ml，连续给药2周，末次给药后24h在各组兔耳造模处用 1 cm 打孔器取下同一部位皮损，标本以 10%福尔马林固定,石蜡包埋、压平、蜡块平切，HE 染色，在显微镜下观察其角化程度。

3 结 果

光镜下正常组兔耳表皮组织为 2～4 层(A)；模型组病理示: 表皮增厚至9-10层,角化过度，真皮浅层可见大量淋巴细胞等炎细胞浸润，毛囊上皮不规则增厚, 毛囊腔中充满粉红色角化物质(B-C)；毛囊口及毛囊扩张明显, 且单个皮脂腺增大(D-E)；与空白对照组比较有显著性差异。治疗2 周后,银黄大剂量组疗效显著，组织病理示：兔耳表皮变薄约5-6层,真皮浅层炎细胞数目显著减少, 毛囊内少量角化物质, (F) 毛囊扩张程度明显减轻, 皮脂腺缩小(G-H)， 与模型组比较有显著性差异，且疗效优于珍珠暗疮片组，而银黄小剂量组病理示：表皮仍较厚，毛囊角化明显, 真皮层炎细胞较多, 毛囊扩张, 内部充满角化物, 皮脂腺未见明显缩小，与模型组比较无显著性差异，具体结果见表1、2。

实验性粉刺的组织学评分标准 ①表皮增厚程度0:与正常组相同(0分);+ :细胞层数4-5层(1分);++ :细胞层数6-7层(2分);+ + + :细胞层数8-9层(3分)。②毛囊内角化物质多少:0:与正常组相同(0分);+ :角化物质增多,但不致密,且为未充满毛囊(1分);+ + :角化物质致密,但未充满毛囊;或角化物质不致密,但充满毛囊(2分);+ + + :角化物质致密,充满毛囊(3分)。③炎细胞浸润程度0:与正常组相同(0分);+ :局灶性炎细胞浸润,细胞散在(1分);+ + :局灶性炎细胞浸润,细胞较密集,或出现多个浸润灶(2分);+ + + :弥漫性炎细胞浸润(3分)。④毛囊扩张程度:0:与正常组相同(0分);+ :轻度扩张(1分);+ + :中度扩张(2分);+ + + :高度扩张(3分)。

表1 银黄消痤胶囊对兔耳痤疮模型角化作用的影响

表2 银黄消痤胶囊对兔耳痤疮模型角化作用的影响

A 空白组；B模型组炎细胞浸润、毛囊角栓；C模型组表皮增厚；D模型组毛囊扩张；E模型组皮脂腺增大；F银黄大剂量组；G银黄大剂量组毛囊；H银黄大剂量组皮脂腺

图1 各组皮下组织(HE染色×200)

4 讨 论

银黄消痤胶囊处方以《医宗金鉴·外科心法要诀》中枇杷清肺饮为基础加减化裁而成，全方由金银花、黄芩、枇杷叶、黄连、连翘、野菊花、薏苡仁、白花蛇舌草、丹参、赤芍、川芎、生大黄、白芷、生甘草等十余味药物组成, 方中金银花、黄芩、枇杷叶为君药，清肺泄热解毒；黄连、连翘、白花蛇舌草、野菊花、薏苡仁清热解毒、健脾利湿为臣药，丹参、赤芍、川芎、凉血活血解毒，生大黄通腑泻热，使湿热火毒从下而走，而达釜底抽薪之效[2-3]；白芷辛温，归大肠、肺胃经，散风除湿，消肿止痛，同时佐制诸药苦寒；甘草调和诸药，上方共凑清热解毒、活血散结之功效。药理研究表明：金银花、黄连、黄芩[4]等中药具有广谱抗病原微生物、抗过敏、抗炎等作用，并能增加巨噬细胞的吞噬功能,减少炎性渗出；白花蛇舌草在体内能刺激网状内皮系统增生和增强白细胞吞噬能力而抗菌消炎、调节免疫；丹参活血化瘀，改善微循环，减轻上皮角化，有效成分丹参酮则抗炎、抑菌、拟生理雌激素对抗雄激素，从而抑制皮脂分泌。银黄消痤胶囊大剂量组和阳性对照组对表皮增厚、毛囊内角化物质、毛囊扩张程度以及真皮层炎细胞浸润均有不同程度的减轻作用,大剂量组优于阳性对照组。

[1] 顾丽贞，王彦云，李多娇.清热暗疮片对兔耳痤疮模型抗角化作用及血流变的影响[J].中成药,2004, 26(3): 326-327.

[2] 杨红莲,段玉红,胡锡琴.黄连“健胃”、“败胃”的研究进展[J].陕西中医,2016,37(7):934.

[3] 王超玲,文颖娟.对《兰室秘藏》中便秘用药规律的探析[J].陕西中医,2016,37(7): 919.

[4] 彭 成.中药药理学[M].北京:中国中医药出版社，2012：67.

(收稿2016-08-10；修回2016-09-05)

Experimental study on Chinese medicine Yinhuang capsule of eliminating acne in rabbit ear

First Affiliated Hospital of Shannxi College of Traditional Chinese Medicine(Xi’an 712000)

Lian Liyang Wang Jun Li Zhilao et al

Objective: To observe the anti-comedone effect of Yinhuang capsule of eliminating acne. Methods: Using the coal tar daubing to the area nearby the opening of male rabbit ear canal daily for two weeks. Then they were randomly divided into Yinhuang high dose ,middle dose, low dose ,and model groups，control groups , fedding with the drug solution, and water for two weeks. Results: Observing the pathological changes on the rabbit ear ,they were similar to the findings of acne in human beings under optic microscope .The high dose and control group were markedly alleviated symptoms after 4 weeks , but there is a little change in the other groups .Conclusions: Yinhuang capsule of eliminating acne could reduce the hair follicles keratinous plug and dermal inflammation.

Acne vulgaris @ Yinhuang capsule Animal experimentation

*陕西中医药大学青年基金项目(2015QN15)

陕西中医药大学附属医院院内制剂课题(2014-45)

△陕西中医药大学附属医院病理科(咸阳 712000)

寻常痤疮 @银黄消痤胶囊 动物实验

R758.73

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2016.12.052