吉兰-巴雷综合征患者血清C3d水平检测

邢春叶 孙 鹏 乔宝俊 孔庆霞 王玉忠 郝延磊(通讯作者)

济宁医学院附属医院 1)神经内科 2)创伤骨科 济宁 272000



吉兰-巴雷综合征患者血清C3d水平检测

邢春叶1)孙 鹏2)乔宝俊1)孔庆霞1)王玉忠1)郝延磊1)(通讯作者)

济宁医学院附属医院 1)神经内科 2)创伤骨科 济宁 272000

目的 了解吉兰-巴雷综合征(GBS)患者血清中C3d水平，以及C3d与GBS的相关性。方法 应用ELISA方法检测GBS患者及对照组血清C3d水平，分析C3d水平与病程、四肢肌力MRC评分的相关性。结果 GBS患者急性期C3d水平显著高于对照组，C3d水平与病程无线性相关，C3d水平与GBS患者MRC评分无线性相关。结论 C3d参与GBS发病过程。

吉兰-巴雷综合征；C3d；血清

吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barré syndrome，GBS)是神经系统发病率相对较高、致残疾较重的自身免疫性疾病[1]。目前，GBS的具体发病机制尚不清楚。注射用丙种球蛋白和血浆置换是治疗GBS的主要方法[2]，但治疗后，15%～18%的患者留有严重残疾，2%～3%死亡[3]。因此，需对GBS的发病机制进一步研究以寻找更有效的治疗方法。补体在GBS发病过程中起重要作用[4-5]。C3d是补体蛋白C3不再酶解的最小片段，是增强抗体应答的高效分子佐剂[6]。C3d在GBS中的研究报道很少。本研究通过检测GBS患者急性期血清中C3d水平，探讨C3d在GBS发病过程中的作用，以及C3d与GBS的相关性，以指导GBS的进一步诊治。

1 对象和方法

1．1 研究对象 选取2014-05—2016-05在我院住院的22例GBS患者。纳入标准：(1)年龄>18岁；(2)符合Asbury 1990年修订的GBS临床诊断标准[7]及2010年中国吉兰-巴雷综合征诊治指南[8]；(3)病程2周内；(4)排除既往诊断为其他周围神经病变的患者。GBS组男12例，女10例，平均年龄(52.4±11.5)岁。另选取我院健康体检中心健康者22例为对照组，男12例，女10例，平均年龄(51.6±8.7)岁。2组年龄及性别差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1．2 血清C3d检测 GBS患者入院后第1天抽取空腹静脉血5 mL，对照组抽取空腹静脉血5 mL，1 200 r/min离心取上清，-80 ℃冰箱保存，以ELISA法检测C3d水平。操作步骤严格按照试剂盒(美国Abcam公司)说明书进行。C3d ELISA KIT购自美国Abcam公司。

1．3 临床资料 收集患者的性别、年龄、病程，对四肢肌力进行MRC(Medical Research Council)[9-10]评分。MRC评分：根据双侧6组肌群的肌力进行评分，分别为肩外展、前臂屈曲、腕伸展、大腿屈曲、膝伸展、足背屈，每组肌群的肌力按0～5级评定，评分从0(完全麻痹)～60(正常)。所有参加试验的临床医生均参加统一的量表评定培训以保证评定标准的一致性，由2位神经科主治医师分别进行评分，结果取平均值。

2 结果

2．1 2组血清C3d水平比较 GBS组急性期血清C3d水平(379.64±215.28)μg/(Eq·mL)，对照组为(110.82±100.27)μg/(Eq·mL)。GBS患者急性期血清C3d水平显著高于对照组(P<0.05)。

2．2 GBS患者血清C3d与病程的相关性分析 GBS患者病程(5.07±3.65)d，血清C3d水平与病程之间无线性相关。见图1。

图1 GBS患者血清C3d水平与病程的相关性分析

2．3 GBS患者血清C3d与MRC评分的相关性分析 GBS患者MRC评分36.91±18.07，其与血清C3d间并无线性相关。见图2。

图2 GBS患者血清C3d水平与MRC评分的关系

3 讨论

GBS又称急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病，首发症状常为四肢远端对称性无力，很快加重并向近端发展，或自近端开始向远端发展，可累及躯干和脑神经，严重者可累及肋间肌和膈肌可导致呼吸麻痹。GBS是一种自身免疫性疾病，确切病因未明，一般认为由多种因素共同导致，如感染因素、免疫因素、遗传因素、微量元素的代谢异常等。近年来，有关GBS的发病机制取得重大进展。GBS患者周围神经活检及尸检结果均提示，补体在GBS的发病过程中起重要作用。

血清补体蛋白C3是补体系统中含量最高的成分，也是补体激活途径的中心成分，在补体活化的经典途径、替代途径及甘露醇聚糖结合途径中均发挥枢纽作用。C3d片段是补体C3的裂解片段，被认为是C3分子α链不能被蛋白酶再裂解的最小片段，始终与抗原共价结合。在完成损伤细胞的修复后，C3和补体系统的其他成分均消失，C3d仍然黏附在靶细胞上，因此可作为补体活化的一个标记物[11]。GBS患者急性期周围神经活检发现C3d沉积在有髓纤维的施万细胞膜表面[12]。

本研究结果显示，GBS急性期患者血清C3d水平显著高于对照组，表明C3d参与GBS发病过程。C3d是补体活化的标记物，GBS急性期C3d显著高于对照组，提示GBS急性期补体活化显著高于对照组。GBS动物实验显示，疾病急性期补体沉积显著增加[13]。本研究结果提示，C3d水平与病程无线性相关。发病时间并不是影响C3d水平的唯一因素，C3d可能受多种因素的影响。下一步需对GBS疾病的不同阶段C3d水平进一步研究，以了解C3d在GBS发病过程中的演变过程。了解补体激活的时机对补体抑制剂的应用有很大的指导作用。

运动障碍是GBS最主要的临床特征，表现为急性或亚急性起病的进行性、迟缓性、两侧基本对称的肢体瘫痪[2]。脊髓前角或周围神经运动纤维受累时表现为运动障碍，若周围神经感觉纤维受累则表现为感觉异常。本研究结果显示，GBS患者血清中C3d水平与四肢肌力MRC评分无线性相关。C3d水平高低不能反映四肢肌力受损情况。四肢肌力影响到患者日常生活，补体激活水平不能反映疾病严重程度。

综上，GBS患者血清C3d水平显著高于正常人，C3d参与GBS发病过程。

[1] Hughes RA，Cornblath DR．Guillain-Barre syndrome[J]．Lancet，2005，366(9 497)：1 653-1 666．

[2] Wakerley BR，Yuki N．Guillain-Barre syndrome[J]．Expert Rev Neurother，2015，15(8)：847-849．

[3] Hughes RA，Rapha⊇l JC，Swan AV，et al．Intravenous immunoglobulin for Guillain-Barré syndrome[J]．Cochrane Database Syst Rev，2006，6(6)：1 176-1 231．

[4] Phongsisay V，Susuki K，Matsuno K，et al．Complement inhibitor prevents disruption of sodium channel clusters in a rabbit model of Guillain-Barré syndrome[J]．J Neuroimmunol，2008，205(1/2)：101-104．

[5] Hafer-Macko CE，Sheikh KA，Li CY，et al．Immune attack on the Schwann cell surface in acute inflammatory demyelinating polyneuropathy[J]．Ann Neurol，1996，39(5)：625-635．

[6] Mohan RR，Gorham RD，Morikis D．A theoretical view of the C3d：CR2 binding controversy[J]．Mol Immunol，2015，64(1)：112-122．

[7] Asbury AK，Cornblath DR．Assessment of current diagnostic criteria for Guillain-Barré syndrome[J]．Ann Neurol，1990，27(Suppl)：S21-S24．

[8] 中华医学会神经病学分会神经肌肉病学组，中华医学会神经病学分会肌电图及临床神经电生理学组，中华医学会神经病学分会神经免疫学组．中国格林-巴利综合症诊治指南[J]．中华神经科杂志，2010，43(8)：583-586．

[9] Kleyweg RP，van der Meche FG，Schmitz PI．Interobserver agreement in the assessment of muscle strength and functional abilities in Guillain-Barré syndrome[J]．Muscle Nerve，1991，14(11)：1 103-1 109．

[10] Sung EJ，Kim DY，Chang MC，et al．Prediction of Functional Outcome in Axonal Guillain-Barre Syndrome[J]．Ann Rehabil Med，2016，40(3)：481-488．

[11] Pfaltz K，Mertz K，Rose C，et al．C3d immunohistochemistry on formalin-fixed tissue is a valuable tool in the diagnosis of bullous pemphigoid of the skin[J]．J Cutan Pathol，2010，37(6)：654-658．

[12] Willison HJ，Halstead SK，Beveridge E，et al．The role of complement and complement regulators in mediating motor nerve terminal injury in murine models of Guillain-Barré syndrome[J]．J Neuroimmunol，2008，201-202：172-182．

[13] Yuki N．Guillain-Barré syndrome and anti-ganglioside antibodies：a clinician-scientist's journey[J]．Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci，2012，88(7)：299-326．

(收稿2016-07-18)

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A

1673-5110(2016)23-0057-03