美沙酮替代治疗者乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染情况及其基因型的流行情况分析*

贺林华，周志强

（1.湖南司法警官职业学院执行系，湖南 长沙 410131；2.湖南省脑科医院病室戒毒科，湖南 长沙 410007）

美沙酮替代治疗者乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染情况及其基因型的流行情况分析*

贺林华1，周志强2

（1.湖南司法警官职业学院执行系，湖南 长沙 410131；2.湖南省脑科医院病室戒毒科，湖南 长沙 410007）

目的了解美沙酮替代治疗人群的乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染状况及其基因型流行情况。方法选取2013年1月-2016年1月湖南省疾控中心具有静脉吸毒史的美沙酮门诊治疗者血清，采用酶联免疫吸附法进行HBV表面抗原和抗HCV抗体的检测，采用聚合酶链反应荧光探针法检测HBV DNA和HCV RNA载量。采用HBV和HCV基因分型检测试剂盒鉴定HBV和HCV基因型。并对美沙酮门诊治疗者进行问卷调查。结果美沙酮门诊治疗组及对照组中，男性血清HBV、HCV，以及HBV合并HCV的阳性检出率与女性比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。美沙酮门诊治疗组及对照组中，多个性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率高于单个性伴侣或无性伴侣，差异有统计学意义（P＜0.05）。美沙酮门诊治疗组及对照组中，不同年龄组血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率不同（P＜0.05），＞45岁人群的阳性检出率最高。美沙酮门诊治疗者在不同性别、年龄及性伴侣个数的中，HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率均较对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。美沙酮门诊治疗组中，静脉注射吸毒者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率均高于口吸毒品者，差异有统计学意义（P＜0.05）。582例研究对象中，HBV成功分型104例，检测结果显示，B型72例（69.23%），C型11例（10.58%），B/C混合型13例（12.50%），非B非C型8例（7.69%）。HCV成功分型389例，检测结果显示，1a型24例（6.17%），2a型21例（5.40%），6a型184例（48.58%），1b型32例（8.22%），3a型45例（11.57%）；3b型38例（9.77%），以及一定程度的混合感染。结论 美沙酮门诊在治组较对照组具有高HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率；美沙酮门诊治疗人群中，HBV和HCV的易感因素为多个性伴侣、高龄及静脉注射吸毒，而性别不是HBV和HCV的易感因素。该人群中HBV感染以B型为主，HCV感染以6a型为主。

美沙酮；基因型；HBV；HCV；感染

毒品问题是严重的社会问题，毒品的泛滥更导致各种血源性病毒感染。美沙酮社区维持治疗是目前国内外最常用的针对海洛因等阿片类毒品依赖者，采取的一种替代治疗方法，是国际公认的治疗海洛因成瘾最有效的方法[1]。在海洛因等阿片类毒品依赖人群中，有相当一部分人存在各类血行传播疾病，如乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）及丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）。为了解美沙酮门诊治疗人群的HBV和HCV感染率及其基因分型，本研究选取治疗者进行血清学标志物检测、问卷调查及基因分型研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1研究对象

选取2013年1月-2016年1月湖南省疾病控制中心具有静脉吸毒史的美沙酮门诊治疗者，采用统一规定使用的社区药物治疗。纳入标准：①年龄≥18岁；②具有静脉吸毒史；③参与美沙酮维持治疗（methadone maintence treatment，MTT）≥6个月；④有完全民事行为能力；⑤本地户籍或常驻≥6个月的外籍人员；⑥签署知情同意；⑦自愿申请戒毒者。排除标准：①非首次接受美沙酮治疗；②年龄＜18岁；③拒不合作者。另选取580例在省疾控中心进行体检的健康志愿者作为对照组，男性380例，女性200例。本研究通过中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心伦理委员会伦理审核。

1.2实验方法

1.2.1样本收集采集外周静脉血10 ml，离心分离血浆存于肝素抗凝管，置入-80℃冰箱冷冻保存，用于检测HCV抗体、乙型肝炎表面抗原，以及病毒核酸。

1.2.2HBV和HCV感染指标检测及判定采用酶联免疫吸附法检测抗HCV抗体、HBV表面抗原，由山东艾德康全自动酶联免疫分析仪检测，试剂由厦门英科新创科技有限公司提供。采用聚合酶链反应荧光探针法检测HBV DNA和HCV RNA载量，由7300基因扩增仪（美国ABI公司）进行扩增，试剂由厦门英科新创科技有限公司提供。操作方法和结果判定均严格按照试剂盒说明书进行。HBV表面抗原和/或HBV DNA阳性判定为HBV感染；抗HCV抗体和/或HCV RNA阳性判定为HCV感染。

1.2.3问卷调查由经过培训的美沙酮专科医生根据吸毒者的特征，对上述符合条件者进行问卷调查并登记备案。问卷调查在单独安静的房间内采用一对一的方式进行。调查内容包括年龄、性别、民族、吸毒方式、受教育程度、性行为及性伴侣情况、吸毒时间、毒品滥用及参加维持治疗情况等。

1.2.4HBV和HCV基因分型采用HBV和HCV基因分型检测试剂盒（上海之江生物科技有限公司），检测方法严格按试剂盒操作说明进行。测序结束之后，应用美国国家生物技术信息中心病毒基因分型工具及MEGA 4.0软件，对核苷酸序列进行系统分析以鉴定HBV和HCV基因型。

1.3统计学方法

应用Epi Data 3.10软件对调查表和实验数据进行录入并建立数据库，采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，用t检验；计数资料以率表示，用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1一般情况

美沙酮门诊治疗组582例，对照组580例，两组在年龄、性别方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗组平均受教育程度、固定收入、体重与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），其中治疗组平均受教育程度较对照组偏低，有固定收入者较对照组所占比例少，体重较对照组轻。见表1。

表1　两组一般情况比较

2.2两组不同性别患者HBV、HCV检出情况

美沙酮门诊治疗者男性与女性血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），对照组男性与女性血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明在美沙酮门诊治疗人群及对照组中，性别不是HBV、HCV的易感因素。美沙酮门诊治疗组血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为22.51%、69.93%和16.15%，对照组血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为15.34%、2.24%和1.38%，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），说明美沙酮门诊治疗者HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率均较对照组高。见表2。

2.3两组不同性伴侣患者HBV、HCV检出情况

美沙酮门诊治疗组均有性行为，其中多个性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为25.28%、76.31%和16.40%，单个性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为13.97%、50.35%和15.38%，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），美沙酮门诊治疗组多个性伴侣人群血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率高于单个性伴侣人群。对照组多个性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为27.10%、6.54%和3.74%，单个性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为13.11%、1.29%和1.03%，无性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为10.71%、1.19%和0.00%，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），对照组多个性伴侣血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率高于无性伴侣人群及单个性伴侣人群。美沙酮门诊治疗组与对照组不同性伴侣个数HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），美沙酮门诊治疗组均较对照组高。见表3。

2.4两组不同年龄患者HBV、HCV检出情况

美沙酮门诊治疗组人群以25岁～45岁的中壮年为主，不同年龄组血清HBV、HCV、HBV合并HCV的阳性检出率不同，差异有统计学意义（P＜0.05），美沙酮门诊治疗组＞45岁的人群血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率最高分别为62.96%、87.04%和46.30%。对照组人群年龄构成与美沙酮门诊治疗组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），不同年龄组血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率不同，差异有统计学意义（P＜0.05），对照组＞45岁人群血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率最高分别为42.23%、5.80%和4.35%。美沙酮门诊治疗组与对照组不同年龄HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），美沙酮门诊治疗组均较对照组高。见表4。

2.5美沙酮门诊治疗者不同吸毒方式HBV、HCV检出情况

582例吸毒者中，静脉注射吸毒者369例（63.40%），口吸毒品者213例（36.60%）。美沙酮门诊治疗组中，静脉注射吸毒者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为31.17%、80.76%和19.78%；口吸毒品者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率分别为16.43%、51.17%和9.86%，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），静脉注射吸毒者阳性检出率均高于口吸毒品者。见表5。

2.6美沙酮门诊治疗者HBV和HCV基因分型

582例研究对象中，HBV RNA阳性者131例，进行HBV分型检测结果显示，成功分型104例，B型72例（69.23%），C型11例（10.58%），B/C混合型13例（12.50%），非B非C型8例（7.69%）。

582例研究对象中，HCV RNA阳性者407例，进行HCV分型检测结果显示，成功分型389例，1a型24例（6.17%），2a型21例（5.40%），6a型184例（48.58%），1b型32例（8.22%），3a型45例（11.57%），3b型38例（9.77%），以及一定程度的混合感染。1b/ 3a混合型11例（2.83%），1b/3b混合型10例（2.57%），2a/3a混合型3例（0.77），2b/3a混合型5例（1.29%），1a/1b混合型2例（0.51%），6a/2a混合型6例（1.54%），3a/1a混合型3例（0.77%），6a/3b混合型5例（1.28%）。

表2　两组不同性别患者HBV、HCV检出情况

表3　两组不同性伴侣患者HBV、HCV检出情况

表4　两组不同年龄患者HBV、HCV检出情况

表5　美沙酮门诊治疗者不同吸毒方式HBV、HCV检出情况

3 讨论

在我国，海洛因等阿片类毒品的滥用已成为严重威胁人民群众健康的社会问题。吸毒人群是传染病感染的极危险的社会传染源群体。本研究调查显示，美沙酮门诊治疗组平均受教育程度偏低，有固定收入者较对照组所占比例少，体重较对照组轻，与国内其他报道相符[2]。美沙酮门诊治疗者和对照组中，男性与女性血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明在美沙酮门诊治疗人群中，性别不是HBV和HCV的易感因素，与牟怀德等[3]研究结果一致。随着性伴侣个数增加，HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率呈上升趋势，与李淇坪等[4]研究结果一致，提示性行为可增加美沙酮门诊治疗人群HBV和HCV感染率。血清HBV、HCV、HBV合并HCV的阳性检出率在＞45岁的人群的阳性检出率最高，说明高龄组有较大的HBV和HCV感染风险。美沙酮门诊治疗者在不同性别、年龄及性伴侣个数的研究中，HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率均较对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。美沙酮门诊治疗组中静脉注射吸毒者血清HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率均高于口吸毒品者，差异有统计学意义（P＜0.05），与文献报道相符。SANDERSBUELL[5]、ZHANG等[6]研究显示，注射吸毒人群中，HCV的总体感染率为61.4%，互相感染的主要原因是共用针管。

HBV基因型可分为A～H8型。有报道指出，在我国2a型在北方多见，1b型在南方多见[7-8]，D型一般可见于新疆、西藏等少数民族地区，而E、F、G、H等基因型在我国范围内尚未发现[9]。HBV的不同基因型具有不同的生物学特性，包括致病力及对抗病毒药物的治疗反应等[10]，其中以B型死亡人数和死亡率均最高。本研究发现，582例研究对象中，HBV RNA阳性者131例。进行HBV分型检测结果显示，成功分型104例，B型72例（69.23%），C型11例（10.58%），B/C混合型13例（12.50%），非B非C型8例（7.69%）。说明本省美沙酮门诊治疗者以B型居多，临床上亦可对这一结果进行针对性治疗及研发相关药物。HCV基因型可分为1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a和6a。JU等[11]研究表明，6a型和3型多见于静脉吸毒人群。YAN等[12]报道，中国西南部吸毒人群HCV感染以3b和6a为主要基因型。本研究发现，582例研究对象中，HCV RNA阳性者407例。进行HCV分型检测结果显示，成功分型389例，1a型24例（6.17%），2a型21例（5.40%），6a型184例（48.58%），1b型32例（8.22%），3a型45例（11.57%）；3b型38例（9.77%）并存在一定程度的混合感染。表明本省美沙酮治疗人群中HCV感染基因型以6a型为主。本研究中出现的少量混合型感染，如1b/3a混合型、1b/3b混合型、2a/3a混合型等，可能与人口流动和吸毒习惯相关。

综上所述，本研究对本省美沙酮门诊治疗者HBV和HCV感染情况，以及HBV、HCV在吸毒人群中主要的优势基因型分布进行分析，发现美沙酮门诊治疗组较对照组具有高HBV、HCV及HBV合并HCV的阳性检出率。其中多个性伴侣、高龄及静脉注射吸毒是HBV和HCV的易感因素，而性别不是HBV和HCV的易感因素。美沙酮门诊治疗人群中，HBV感染以B型为主，HCV感染以6a型为主。本研究结果可为相关人群疾病的预防及控制提供数据支持，亦可对研究乙型肝炎及丙型肝炎的流行、HBV和HCV感染的分子生物学机制，以及对疾病的防控提供参考。本研究发现，吸毒人群HBV、HCV及HBV合并HCV感染率明显高于普通人群，大部分吸毒人员免疫力处于低下状态，并且对HBV、HCV的传播途径缺乏了解，不能有效抵御HBV及HCV的侵袭。若出现HCV合并HBV感染更易导致肝硬化发生，需要引起足够重视[13]。在进行美沙酮药物治疗的同时，需要逐步由单一的提供美沙酮进行药物治疗调整为同时提供宣传教育、心理咨询，以及就业培训等的综合治疗[14]。例如重庆市在38家美沙酮门诊中，设立专门的心理干预室，对吸毒者家庭和社会功能的恢复起积极作用[15]。专业人员对美沙酮药物维持治疗点的患者进行连续性健康教育，实行有效干预措施，能最大程度上减少社会危害[16]。

[1]陈弘,唐文革,陈宗良,等.重庆市美沙酮维持治疗工作评价与思考[J].现代医药卫生,2016,32(12):1836-1838.

[2]郝晓茜.277例美沙酮替代治疗者艾滋病、丙型肝炎感染调查[J].青海医药杂志,2009,39(6):75-76.

[3]牟怀德,陈霞,吴薇,等.乐山市美沙酮门诊吸毒人群HIV、HCV、梅毒和HSV-2感染状况调查分析[J].现代预防医学,2011,38(17): 3550-3552.

[4]李淇坪,赵敖,肖谭玲,等.佛山市顺德区首次美沙酮门诊吸毒人群HIV、HBV、HCV和梅毒感染状况调查[J].中国药物依赖性杂志, 2015,24(2):144-148.

[5]SANDERS-BUELL E,RUTVISUTTINUNT W,TODD C S,et al. Hepatitis cgenotype distribution and homology among geographically disparateinjecting drug users in Afghanistan[J].J Med Virol, 2013,85(7):1170-1179.

[6]ZHANG M,SUN X D,MARK S D,et al.Rapid transmission of hepatitis C virus among young injecting heroin users in southernChina[J].Int J Epidemiol,2003,33(1):1-7.

[7]李小宁,杨正海,李静.不同基因型丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3对端粒酶活性的研究[J].中国临床药理学与治疗学,2015,20(2):128-131.

[8]马琳媛,张鹏,陈倩,等.干扰素α-2b联合利巴韦林治疗后慢性丙型肝炎患者外周血细胞数量的变化及其临床意义[J].吉林大学学报（医学版）,2015,41(3):599-605.

[9]游晶,庄林,陈红英,等.乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究进展[J].世界华人消化杂志,2007,15(9):921-928.

[10]纪冬,刘妍,王耀,等.慢性乙型肝炎患者血清HBV全长序列分析及复制力评价[J].解放军医学杂志,2009,36(6):670-674.

[11]JU W,YANG S,FENG S,et al.Hepatitis C virus genotype andsubtype distribution in Chinese chronic hepatitis C patients: nationwide spread of HCV genotypes 3 and 6[J].Virol J,2015, 12(1):109.

[12]YAN Z,FAN K,WANG W,et al.Changing pattern of clinical epidemiology on hepatitis C virus infection in southwest China[J]. Hepat Mon,2012,12(3):196-204.

[13]李淇坪,赵敖,肖谭玲,等.佛山市顺德区首次美沙酮门诊吸毒人群HIV、HBV、HCV和梅毒感染状况调查[J].中国药物依赖性杂志,2015,24(2):144-148.

[14]LIN C Q,WU Z Y,ROU K M,et al.Challenges in providing services in methadone maintenance therapy clinics in China:serviceproviders'perceptions[J].Int J Drug Policy,2010,21(3):173-178.

[15]吴小容,吕立平,李东,等.重庆市南岸区美沙酮维持治疗病人综合调查研究[J].中国药物滥用防治杂志,2015,21(2):76-78.

[16]毛肖丽,潘燕,陈飞琼.社区美沙酮药物维持治疗点患者102例HIV/AIDS连续性健康教育效果观察[J].齐鲁护理杂志,2012,18(15): 112-114.

（童颖丹 编辑）

Prevalence of hepatitis B virus and hepatitis C virus infections and genotypes in Methadone replacement therapy*

Lin-hua He1,Zhi-qiang Zhou2
(1.Department of Implementation,Hunan Judicial Police Vocational College,Changsha, Hunan 410131,China;2.Department of Detoxification,Hunan Brain Hospital, Changsha,Hunan 410007,China)

Objective To investigate the infection status and genotype epidemic condition of HBV and HCV among drug users using Methadone replacement therapy.Methods Serum samples were collected from the patients with intravenous drug use from January 2013 to January 2016,who were treated in Methadone clinics in the Centers for Disease Control and Prevention in our province.ELISA was applied to detect HBV surface antigen and anti-HCV antibody.PCR-fluorescence probe method was applied to detect HBV DNA andHCV RNA load.HCV and HBV genotyping detection kits were applied to identify genotypes of HBV and HCV.A questionnaire survey was conducted in the drug users receiving Methadone replacement therapy. Results There was no statistical difference in the positive rate of HBV,HCV or HBV combined with HCV between male and female(P＞0.05).The positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV in the drug users with multiple sexual partners were significantly higher than those in the drug users with single sexual partner or without sexual partner in both Methadone-treatment and control groups(P＜0.05).In the Methadone-treatment group and the control group,the positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV were significantly different in the different-age groups,the positive rate was highest in the group older than 45 years.In the study of different sex,age and numeral sexual partners,the positive rates of HBV, HCV and HBV combined with HCV in the Methadone group were significantly higher than those in the control group(P＜0.05).In the Methadone group,the positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV in the intravenous drug users were significantly higher than those in the oral drug users(P＜0.05).HBV gene typing showed that among the 582 samples,there were 72 samples of genotype B(69.23%),11 samples of genotype C(10.58%),13 samples of mixed genotype B/C(12.50%)and 8 samples of neither genotype B or C(7.69%).HCV gene typing showed that there were 24 samples of genotype 1a(6.17%),21 samples of genotype 2a(5.40%),184 samples of genotype 6a(48.58%),32 samples of genotype 1b(8.22%),45 samples of genotype 3a(11.57%),38 samples of genotype 3b(9.77%)and a certain degree of mixed infection. Conclusions The positive rates of HBV,HCV and HBV combined with HCV in the drug users receiving Methadone treatment are higher than those in the control group.The multiple sexual partners,elder age and intravenous drug injection are the risk factors of HBV and HCV infections among the drug users taking Methadone.Sex is not a predisposing factor of HBV or HCV infection.The main genotype of HBV infection is B and the main genotype of HCV infection is 6a among the drug users using Methadone replacement therapy.

Methadone;genotype;hepatitis B virus;hepatitis C virus;infection

R512.6

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.21.013

1005-8982（2016）21-0062-06

2016-08-09

2015年湖南省教育厅科学研究项目（No：15C0897）