安神补脑胶囊中淫羊藿苷含量测定方法的研究

王爱娜，杨　艳，王　玳

（山西省食品药品检验所，山西太原030001）

安神补脑胶囊中淫羊藿苷含量测定方法的研究

王爱娜，杨艳，王玳

（山西省食品药品检验所，山西太原030001）

目的：建立安神补脑胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。方法：采用高效液相色谱法，C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.1%三氟乙酸（30∶70）；检测波长：270 nm；流速：1.0 mL/min。结果：淫羊藿苷在0.050 6～2.024 0 μg范围内有良好的线性关系（r2=0.999），平均回收率为96.4%，RSD=0.56%。结论：该方法准确、快速、简便，可用于安神补脑胶囊中淫羊藿苷的含量测定。

高效液相色谱法；安神补脑胶囊；淫羊藿苷；含量测定

安神补脑胶囊由鹿茸、制首乌、淫羊藿、干姜、甘草、大枣、维生素B1组方而成，具有生精补髓、增强脑力的功效，用于治疗神经衰弱、失眠、健忘、头晕等。为了更有效地控制产品质量，保证临床用药安全有效，本文选择淫羊藿中的淫羊藿苷作为质控指标，用高效液相色谱法（HPLC）测定其含量［1-3］。

1　仪器与试药

岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪。乙腈为色谱纯（迪马科技有限公司），水为纯化水，其余试剂均为分析纯。淫羊藿苷（购于中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号110737-200415），安神补脑胶囊（批号：100901）。

2　方法与结果

2.1色谱条件与系统适应性试验

色谱柱：方法学考察采用C18柱（日本富士填料，4.6 mm×250 mm，5 μm）。波长：参照《中国药典》2010年版一部中淫羊藿药材含量测定项下淫羊藿苷的测定波长，选择270 nm作为测定波长［4］。柱温：室温；流速：1.0 mL/min；流动相：乙腈-0.1%三氟乙酸（30∶70）。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于5 000。

2.2供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品内容物10粒，研细，取约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率33 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。供试品HPLC色谱图见图1。

图1　供试品HPLC色谱图

2.3对照品溶液的制备

取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1 mL含16 μg的溶液，即得。淫羊藿苷对照品HPLC色谱图见图2。

图2　淫羊藿苷对照品HPLC色谱图

2.4专属性试验

取处方中除淫羊藿外的全部药味，按本品工艺及供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液，照上述色谱条件进行测定，结果表明阴性对照无干扰（见图3）。

图3　阴性对照（缺淫羊藿）HPLC色谱图

2.5线性范围的考察

精密吸取淫羊藿苷对照品溶液（0.101 2 mg/mL）0.5 μL、1 μL、2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL分别注入液相色谱仪，测定其峰面积，以峰面积值为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线，测得回归方程为Y=21 745X-485.3，r2=0.999。结果表明，进样量在0.050 6～2.024 0 μg范围内，淫羊藿苷峰面积值与进样量有良好的线性关系。

2.6精密度考察

精密吸取同一份供试品溶液（100901），重复进样6次，峰面积分别为237 794、237 124、237 617、237 627、238 021、237 371，RSD=0.14%。结果表明仪器精密度良好。

2.7重复性试验

取同批样品（100901），依法平行测定6份，计算淫羊藿苷的含量分别为6.913 mg/g、6.924 mg/g、6.951 mg/g、6.839 mg/g、6.999 mg/g、7.005 mg/g，平均含量为6.94 mg/g，RSD=0.89%。结果表明该方法的重复性良好。

2.8稳定性试验

取同一份供试品溶液（100901），分别在制备后0 h、4 h、9 h、13 h、27 h依法测定淫羊藿苷的峰面积分别为232 880、242 774、239 954、240 608、238 015，RSD=1.6%。结果表明供试品溶液在27 h内基本稳定。

2.9准确度试验

取本品（100901）约0.25 g，精密称定，分别精密加入对照品适量，按上述方法制备供试品溶液，依法测定，以下列公式计算回收率，结果见表1。结果表明该方法具有良好的回收率，准确度好。

表1　加样回收率试验结果

2.10耐用性实验

仪器改用Waters2695-2996型液相色谱仪，色谱柱使用菲罗门C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）柱及岛津LC-20AT液相色谱仪，色谱柱使用极限系列AQ-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）柱，均能达到很好的分离效果。

2.11样品测定

按上述含量测定方法，分别对不同企业6批样品进行测定，结果见表2。

表2　6批样品含量测定结果

3　讨论

通过对6批样品中淫羊藿苷的含量进行测定，结果表明，不同批次含量差别较大，这可能与不同产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量高低有关，也考虑到可能是不同制剂工艺在药物制备过程对有效成分的影响不同。本方法重现性好，精密度高，能准确测定安神补脑胶囊中淫羊藿苷的含量，可用于评价该制剂的质量。

［1］冯胜民，朱山寅.RP-HPLC法测定安神补脑液中淫羊藿苷的含量［J］.中国新药杂志，2006，15（7）：544-575.

［2］罗淑萍，郭炎荣，杨青.SPE-HPLC法同时测定安神补脑液中二苯乙烯苷和淫羊藿苷的含量［J］.中国药师，2013，16（10）：1 493-1 494.

［3］王宝全，赵庆华，刘忠良，等.不同厂家安神补脑液中淫羊藿苷含量考察［J］.实用医药杂志，2011，28（2）：140-141.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：306.

（编辑：梁葆朱）

Determination of icariin in Anshen Bunao capsule by HPLC

Wang Aina，Yang Yan，Wang Dai
（Shanxi Institute For Food and Drug Control，Taiyuan Shanxi 030001）

Objective：The method for determining icariin in Anshen Bunao capsule was established.Methods：HPLC was conducted on Packing C18column（4.6 mm×250 mm，5 μm）with the mobile phase of acetonitrile and 0.1%trifluoroacetic acid（30∶70）.Detection wavelength was at 270 nm and flow rate was 1.0 mL/min.Results：The linear range of icariin was 0.050 6～2.024 0 μg（r2=0.999），and the average recovery was 96.4%（RSD=0.56%）.Conclusion：The method is simple，rapid，accurate and can be used in the determination of icariin in Anshen Bunao capsule.

HPLC；Anshen Bunao capsule；icariin；determination

R286

A

1671-0258（2016）05-0029-03

王爱娜，硕士，主管药师，E-mail：wangandhh2@126.com