饲料中添加裂殖壶菌粉对凡纳滨对虾脂质沉积和血清生化成分的影响

钟国防 焦建刚 华雪铭 李玲玉 刘嘉航

（上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室， 上海 201306）

饲料中添加裂殖壶菌粉对凡纳滨对虾脂质沉积和血清生化成分的影响

钟国防 焦建刚 华雪铭 李玲玉 刘嘉航

（上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室， 上海 201306）

以健康的凡纳滨对虾（Litopenaeus Vannamei）［初重（5.81±0.24） g］为研究对象， 研究裂殖壶菌粉（Extractedand-dried microfungi Schizochytrium sp.， EDMS）对凡纳滨对虾脂质转运、沉积以及血清生化成分的影响。在饲料中分别添加0、0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的裂殖壶菌粉， 制成5组（基础组、EMDS05、EMDS10、EMDS15、EMDS20）等氮等能饲料。将750尾健康的凡纳滨对虾随机分成5组（为每组3个平行， 每个平行45尾虾），养殖时间45d。结果表明， 随着饲料中DHA水平的提高， 肌肉中水分、粗脂肪和粗蛋白质含量均无显著改变（P＞0.05）， 但灰分随着添加量的增加呈现上升趋势， 且EMDS20组显著高于基础组和EMDS05组（P＜0.05）；肌肉和肝胰脏中高不饱和脂肪酸（HUFA）含量显著升高（P＜0.05）， 血清总甘油三酯（TG）含量显著升高（P＜0.05）， 总胆固醇（TC）含量保持稳定（P＞0.05）， EDMS15组高/低密度脂蛋白（HDL/LDL）显著高于其他各组（P＜0.05）；超氧化物歧化酶（SOD）呈现先下降后升高的趋势， 其中EMDS10组（1.0%添加组）显著低于其他各组（P＜0.05）；丙二醛（MDA）含量显著升高（P＜0.05）。综上所述， 饲料中添加EDMS促进了凡纳滨对虾肌肉中n-3 HUFA的沉积，同时也提高了虾体脂质过氧化压力。

凡纳滨对虾； 裂殖壶菌； 高不饱和脂肪酸； 脂质过氧化

脂类作为重要的营养素， 除为鱼类提供生长发育所需的脂肪及必需脂肪酸以外， 还是脂溶性维生素吸收的良好载体［1］。鱼油是配合饲料脂类的主要来源， 近年来鱼油产量的下降， 减少或者替代鱼油的研究成为热点， 玉米油、亚麻油和椰子油等在鱼类饲料中的应用研究有见报道［2］。但植物油脂缺乏花生四烯酸 （Arachidonic acid， ARA）、二十碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid， EPA）和二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid， DHA）等长链不饱和脂肪酸（Long-chain unsaturated fatty acid， LC-UFA）， 长期大量使用会影响鱼虾脂肪酸组成。Kim等［3］用不同的植物油脂替代鱼油饲养罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）发现， 植物油实验组肌肉中DHA沉积显著低于鱼油组。甲壳动物由于缺乏合成长链脂肪酸的能力， 只能通过食物获取［4］， 因而饲料中对高不饱和脂肪酸（Highly unsaturated fatty acid， HUFA）有更高的需求， 要通过添加含有HUFA的藻类、菌类等［5—7］或者合成DHA等才能满足需求。微藻、菌类因具有天然抗脂质过氧化体系， 是植物油脂替代鱼油时补充高度不饱和脂肪酸的良好选择［8］。

凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）是当前世界上养殖产量最高的三大优良品种之一， 它具有生长快、抗病能力强等优点， 养殖经济效益显著。从2001年以来， 我国养殖南美白对虾面积和产量一直居于对虾养殖的首位， 其养殖量已达到我国对虾养殖量的70%以上， 同时也已成为世界上养殖规模最大产量最高的对虾品种， 具有极高的经济价值。裂殖壶菌（Schizochytrium limacinum）是属于破囊壶菌科（Thraustochytrium）的一类海洋真菌， 菌体含70%的油脂（90%以上为甘油三酯）， 油脂中含有30%以上的DHA［9］， 是生物发酵生产DHA的工程菌。裂殖壶菌体具有抗氧化活性， 能防止油脂氧化［10］， 饲料中添加裂殖壶菌能促进斑点叉尾（Lctalurus punctatus）［11，12］、海鲷（Sparus aurata）［13］、大西洋鲑（Salmo salar）［14］等鱼类的生长。裂殖壶菌作为生物饵料的营养强化剂或直接饲喂幼体［15，16］也能取得良好的效果。本实验以凡纳滨对虾为研究对象， 研究裂殖壶菌对其脂肪转运及沉积和血清生化成分的影响， 为凡纳滨对虾功能性饲料的开发提供数据和理论支持。

1 材料与方法

1.1 实验饲料

饲料配方及营养组成见表 1。参考Samocha等［17］对凡纳滨对虾DHA需求量的研究， 分别按0、0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的水平加入裂殖壶菌粉（Extracted-and-dried microfungi Schizochytrium sp.，EDMS: 粗蛋白质19.26%， 粗脂肪33.71%， 水分0.94%， 灰分8.98%， DHA 18%）， 配制成基础组、EDMS05组、EDMS10组、EDMS15组和EDMS20组5种实验饲料， 饲料中DHA的含量分别为: 19.5、42.1、59.7、80.1和93.1 mg/kg （实测值）。饲料原料购自上海农好饲料有限公司， 原料经粉碎后过80目筛， 用绞肉机制粒（粒径1.2 mm， 粒长5 mm）， 风干后-20℃储存备用。

表 1 饲料配方及营养组成表（风干基础）Tab. 1 Ingredients and proximate compositions of experimental diets （DM basis， %）

1.2 养殖管理

选择健壮且体型匀称的对虾在上海海洋大学滨海养殖基地的水泥池（5 m×2 m×1.5 m）中暂养两周， 称取750尾虾［均重: （5.81±0.24） g］随机放入15个网箱（2 m×1.2 m×1.2 m）中， 每个网箱45尾。实验共分5个实验组， 每组3个平行。每天投喂两次（05:00和18:00）， 日投饲量为虾体重的3%—5%， 每两周取样称重调整投饲量， 每周测定水质指标并换水1/3， 养殖期间水温21—28℃， 盐度为（4.2±0.2）‰，溶解氧4.5—12 mg/L， 氨氮0—0.2 mg/L， 亚硝酸盐0—0.1 mg/L。养殖实验持续45d［18］。

1.3 样品采集

养殖试验结束后， 停食24h取样， 每尾虾称重后，每平行取10尾虾的血淋巴液， 用肝素钠（125 U/mL）防止凝固。同一平行的血淋巴液混合放入两个2 mL离心管中， 离心（10min， 8000 r/min， 4℃）分离血清备用。取肝胰脏和肌肉置于-20℃冰箱中保存待测。

1.4 测定指标和方法

血清生化指标测定: 总甘油三酯（Total triglycerides， TG， 氧化酶法）、总胆固醇（Total cholesterol， TC， 氧化酶法）、高/低密度脂蛋白（直接法）使用迈瑞公司（深圳， 中国）BS-300型生化分析仪测定；丙二醛（Methane dicarboxylic aldehyde， MDA， TBA法）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase， SOD，黄嘌呤氧化酶法）用南京建成生物工程研究所购试剂盒测定， （酶活定义为每毫升反应液中SOD抑制率达50%时所对应的SOD量为1个亚硝酸盐单位）。

肌肉营养成分测定: 水分测定用105℃常压干燥法， 粗灰分测定用550℃灼烧法， 粗蛋白质测定用杜马斯燃烧法［19］， 粗脂肪测定用氯仿-甲醇法［20］， 每个样品测3个重复。

脂肪酸测定: 在粗脂肪样品加入浓度为0.5 mg/mL的十九烷酸（西格玛奥德里奇公司， 美国）0.5 mL， 真空干燥后， 用三氟化硼-甲醇法进行甲酯化， 甲酯化样品用气质联用GC-MS测定（7890A GC和5975C GC/MS， 安捷伦公司， 美国）。色谱柱为非极性毛细管柱（L=30 m， ID=0.32 mm， DF=0.25 μm）， 载气为氦气（纯度≥99.99%）。升温程序: 40—170℃，100℃/min；170—240℃， 20℃/min；进样量1 μL。通过面积归一法计算不同脂肪酸在总脂肪酸中的含量来确定脂肪酸的组成；通过不同脂肪酸甲酯的峰面积与十九烷酸内标物的峰面积比值计算粗脂肪中各脂肪酸在干物质中的含量［某种脂肪酸含量m（单位: mg）=（S×M）/（Sc19×Mc19）×mc19/m0， S为某种脂肪酸峰面积， M为某种脂肪酸甲酯摩尔质量，Sc19为十九烷酸内标的峰面积， Mc19为十九烷酸甲酯的摩尔质量， m0为样品质量］。

1.5 数据处理

用SPSS 17.0处理数据， 用单因子方差分析（one-way ANOVA， LSD）和Duncan氏多重比较检验统计结果。所有结果使用平均值±标准差（mean±SD）表示。以P＜0.05为显著水平。

2 结果

2.1 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肌肉常规营养成分的影响

凡纳滨对虾肌肉成分如表 2所示， 随着配合饲料中EDMS水平逐渐升高， 肌肉灰分呈现上升趋势，且EMDS20组显著高于基础组和EMDS05组（P＜0.05）。但水分、粗蛋白质和粗脂肪各实验组间无显著差异（P＞0.05）。

2.2 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肌肉脂肪酸组成的影响

表 2 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肌肉常规营养成分的影响Tab. 2 Effects of dietary EDMS on muscle composition of L. vannamei （%）

由表 3可知， 在45d养殖实验后， 肌肉总脂肪中C18:0在各组中的比例呈现先下降后上升的趋势，EDMS10组显著低于EDMS05和EDMS20组（P＜0.05）， 但与基础组无显著差异（P＞0.05）；C18:2n6含量呈现逐渐下降的趋势， 且基础组显著低于实验组（P＜0.05）；EDMS10和EDMS15组的DHA含量显著高于基础组。EDMS20组的总饱和脂肪酸（Satura-ted fatty acid， SFA）显著高于EDMS10组（P＜0.05），但总多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acid，PUFA）含量显著低于EDMS10组（P＜0.05）；EDMS10组的HUFA显著高于基础组（P＜0.05）；n-3/n-6呈现先上升后下降的趋势， 且EDMS10、EDMS15和EDMS20组显著高于基础组（P＜0.05）。

表 3 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肌肉脂肪酸组成的影响（%，占总脂肪酸）Tab. 3 Effects of dietary EDMS on muscle fatty acids composition of L. vannamei （% of total fatty acids）

2.3 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肌肉脂肪酸含量的影响

由表 4可知， 在45d养殖实验后， 在肌肉脂肪酸含量中， EDMS20组的C16:0、C17:0、C18:0、C18:1n9、C20:5n3和C22:6n3含量均显著高于其他各组（P＜0.05）；EDMS10和EDMS15实验组的C18:2n6、C20:5n3和C22:6n3均显著高于基础组（P＜0.05）。HUFA和n-3/n-6含量随添加量的增加逐渐增加， 各添加组n-3/n-6均显著高于基础组（P＜0.05），但EDMS10组、 EDMS15和 EDMS20之间没有显著性差异（P＞0.05）。

2.4 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肝胰脏脂肪酸组成的影响

由表 5可知， 肝胰脏脂肪酸随着饲料中EDMS水平的上升， 呈先升高后降低的有: C17:0、 C18:0、C20:1n9， 峰值均出现在EDMS15组， 并且EDMS15组显著高于基础组（P＜0.05）；呈先下降后上升的脂肪酸有: C18:1n9、C18:2n6、C18:2n3， 且EDMS15组的C18:2n6显著低于基础组（P＜0.05）；呈逐渐上升趋势的脂肪酸有: C22:5n3， 且EDMS15组和EDMS20组显著高于基础组（P＜0.05）；呈逐渐下降趋势的脂肪酸有: C20:5n3、C20:4n6， 且EDMS20组显著低于基础组（P＜0.05）；随着饲料中EDMS水平的上升， SFA呈现逐渐上升的趋势，EDMS20组显著高于基础组（P＜0.05）， n-3/n-6随着添加量的增加逐渐升高， 各实验组均显著高于基础组（P＜0.05）；PUFA和HUFA均呈现逐渐下降的趋势， 且EDMS20组显著低于基础组（P＜0.05）。

2.5 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肝胰脏脂肪酸含量的影响

由表 6可知， 随着饲料中EDMS添加量的上升，肝胰脏脂肪酸中C16:0、C16:1n7、C17:0、C20:1n9、C20:2n6、C22:5n3呈先下降后上升的趋势， 谷值均出现在EDMS10组且显著低于EDMS20（P＜0.05）；C20:5n3、C20:4n6呈现逐渐上升的趋势， 但各实验组与基础组间没有显著性差异（P＞0.05）C22:6n3也呈上升趋势， 且EDMS20的组显著高于其他各组（P＜0.05）；EDMS20组的SFA、PUFA、HUFA和TFA均显著高于其他各组（P＜0.05）， 而n-3/n-6在各实验组之间没有显著性差异（P＞0.05）。

表 4 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肌肉脂肪酸含量的影响Tab. 4 Effects of dietary EDMS on muscle fatty acids content of L. vannamei （mg/g dried muscle）

表 5 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肝胰腺脂肪酸组成的影响（%， 占总脂肪酸）Tab. 5 Effects of dietary EDMS on Hepatopacreas fatty acids composition of L. vannamei （% of total fatty acids）

表 6 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾肝胰脏脂肪酸含量的影响（毫克每克肝胰脏，mg/g）Tab. 6 Effects of dietary EDMS on hepotopancreas fatty acids content of L. vannamei （mg/g wet hepatopancreas）

2.6 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾血清生化成分的影响

由表 7可知， 凡纳滨对虾血清中TG含量随着EDMS水平的升高而升高， EDMS20显著高于EDMS05（P＜0.05）， 但各实验组与基础组无显著差异（P＞0.05）；高/低密度脂蛋白呈现先上升后下降的趋势， 且EDMS10组和EDMS15组显著高于基础组（P＜0.05）；TC含量各实组之间无显著差异（P＞0.05）；血清中MDA含量在EDMS10组出现显著上升， 在EDMS20达到最大值， 随后稍有下降， 且EDMS10组、EDMS15组和EDMS20组显著高于EDMS05组和基础组（P＜0.05）；SOD活性呈现先下降后升高的“V”型曲线关系， 在EDMS15组有一个快速上升过程， 且EDMS20组显著高于EDMS10组（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 EDMS水平对凡纳滨对虾脂肪沉积的影响

HUFA是甲壳动物的必需脂肪酸， 饲料中不同的脂肪酸比例会导致甲壳动物肌肉中脂肪酸的积累出现差异。Forster等［21］用不同水平的豆粕替代鱼粉后， 比较鱼油和经亚麻油酸强化的豆油对凡纳滨对虾肌肉脂肪酸沉积的影响， 发现鱼油被强化豆油替代后， 低水平鱼粉组（19%和0）凡纳滨对虾全虾和肌肉中的n-3 HUFA含量显著下降（P＜0.05）， 但肌肉总脂肪含量并无显著变化（P＞0.05）。González-Félix等［22］研究饲料中不同磷脂水平与不同油脂类型对凡纳滨对虾肌肉脂肪酸组成的影响， 结果表明肌肉中ARA、EPA和DHA含量与饲料中HUFA含量呈高度正相关性（P＜0.05）。在本实验中， 随着裂殖壸菌粉（EDMS）添加量的增加， 肌肉粗脂肪含量无显著差异， 但HUFA含量逐渐升高， 与González-Félix等［22］研究结果相似。而在脂肪酸组成中，HUFA的含量呈先升高后下降趋势， 表明HUFA在肌肉脂肪酸中的相对积累速度与脂肪总量的沉积并不同步。

表 7 饲料中EDMS水平对凡纳滨对虾血清生化成分的影响Tab. 7 Effects of dietary EDMS on serum biochemical indicators of L. vannamei

甲壳动物肝胰脏既是脂肪的主要贮存部位， 又是脂肪代谢的中心器官， 其脂肪酸组成与肌肉中的脂肪酸组成有差异［23］。Sui等［24］用氢化植物油替代鱼油养殖中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）发现， 随着替代量的增加， 中华绒螯蟹肝胰脏中EPA和DHA含量显著下降（P＜0.05）， 但对肝胰脏粗脂肪含量没有显著影响（P＞0.05）。而本实验中肝胰脏粗脂肪含量随着EDMS添加量的增加先下降后升高， 与此同时HUFA含量与在脂肪酸中所占比例也同步呈现逐渐下降趋势， 与在肌肉中HUFA含量与在脂肪酸中所占比例的差异不同的原因可能是肝胰脏的高代谢频率使脂肪酸在肝胰脏中的积累较为平衡。

PUFA是类二十烷酸合成的底物， n-6 PUFA合成促炎性类二十烷酸， 而n-3 PUFA合成抗炎性类二十烷酸， 两者具有相反的生理学功能［25］。甲壳动物中， n-3 HUFA比n-6 HUFA对机体生长的促进作用更为显著， 但增加ARA在必需脂肪酸中的比例可以提高甲壳动物的存活率［26］。适宜的n-3/n-6值对凡纳滨对虾生长代谢具有重要意义。Hu等［27］发现通过调节鱼油、豆油和大豆磷脂油的不同配比来调整饲料中n-3/n-6的比值， 结果对养殖的凡纳滨对虾肌肉中的n-3/n-6比值产生了影响， 当肌肉中的n-3/n-6比值在1.5—2.0范围内时， 凡纳滨对虾的生长和存活率均无显著差异。在本实验中， 肌肉中n-3/n-6为1.20—1.68时， 凡纳滨对虾的生长（相对增重率88%—92%）和存活率（66%—69%）均无显著差异，且EDMS的添加提高了n-3 PUFA在肌肉中的比例，提升了对虾的食用价值， 对人类健康有积极作用。

3.2 EDMS水平对凡纳滨对虾脂肪转运的影响

脂肪分为胆固醇、中性脂（甘油三酯）、磷脂和游离脂肪酸。凡纳滨对虾不能在体内合成HUFA，需要从饲料中摄取。血淋巴是脂肪吸收和转运的枢纽， 甘油三酯和游离脂肪酸作为能源物质通过血淋巴在脂肪组织和肝脏之间进行转运。长链脂肪酸在血淋巴内的运输以甘油三酯为主， 且DHA可以促进脂肪分解代谢， 促使甘油三酯从肝脏运至组织被代谢供能。González-Félix研究发现在添加等量磷脂的条件下， 提高DHA的添加量可以提高凡纳滨对虾幼虾血清甘油三酯的含量［28］；胆固醇作为生物体重要的功能性物质， 是对虾生长发育不可缺少的脂类物质， 主要通过脂蛋白在血淋巴中进行转运。参加胆固醇转运的高密度脂蛋白和低密度脂蛋白具有相反的生理学功能， 高密度脂蛋白将血淋巴胆固醇运入肝脏而低密度脂蛋白反之， 两者比例的升高或降低表示血液内的胆固醇是进入肝脏参与代谢活动还是从肝脏运输到组织中沉积下来［29，30］。在本研究中， 血清总甘油三酯含量随EDMS的增加显著提高（P＜0.05）， 表明长链脂肪酸在血清中的含量增加；总胆固醇随着EDMS的增加稍有下降但并不显著， 而HDL/LDL呈现先上升后下降的趋势，说明适量的EDMS能促进血液向肝脏输送胆固醇，避免胆固醇在血管中的堆积， 提高胆固醇的利用效率， 且平衡血淋巴内的胆固醇在稳定水平。

3.3 EDMS水平对凡纳滨对虾脂质过氧化反应的影响

HUFA因为含有3个以上的双键， 极易受到超氧阴离子的攻击而发生脂质过氧化反应。MDA是脂质过氧化产物， 它在血清中的含量表示体内脂质过氧化程度。Yang 等［31］研究饲料中添加氧化鱼油对凡纳滨对虾生长和氧化应激的影响， 认为添加50—100 g/kg的氧化鱼油显著抑制了对虾增重率和特定生长率， 且血清、肌肉中的MDA含量显著上升（P＜0.05）。生物体内有天然的抗氧化机制， 如SOD能将超氧阴离子（O2-）通过歧化反应生成O2和

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动物脂代谢是一个极为复杂的过程， 也是现阶段水产动物营养学的研究热点之一［33］， 作为一种潜在的高不饱和脂肪酸的添加剂来源， 裂殖壶菌可以改变凡纳滨对虾对脂类的代谢， 并有利于提高其生产价值， 但菌粉作为一种细胞结构其成分是复杂的，对脂代谢的调节作用还需要更多的后续实验加以确定， 并为其作为水产动物营养可以使用的一种添加剂提供必要的生产验证和理论背景。fish oil with vegetable oil ［J］. Acta Hydrobiologica Sinica， 2014， 38（1）: 121—128 ［周继术， Bente E. Torstensen， Ingunn Stubhaug. 饲料中植物油替代鱼油对大西洋鲑肝细胞油酸跨膜吸收的影响. 水生生物学报，2014， 38（1）: 121—128］

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EFFECT OF EXTRACTED AND DRIED MICROFUNGI SCHIZOCHYTRIUM IN THE DIET ON FAT DEPOSITION AND SERUM BIOCHEMICAL INDEXES OF LITOPENAEUS VANNAMEI

ZHONG Guo-Fang， JIAO Jian-Gang， HUA Xue-Ming， LI Ling-Yu and LIU Jia-Hang
（Key Laboratory of Freshwater Fishery Germplasm Resources， Ministry of Agriculture， Shanghai Ocean University， Shanghai 201306， China）

To evaluate the effects of dietary extracted-and-dried microfungi Schizochytrium sp. （EDMS） on muscle nutritional composition， fatty-acid composition of muscle and hepatopancreas， and the biochemical composition of the serum of the Litopenaeus vannamei ［initial average weight of （5.81±0.24） g， mean±SE）］， five isonitrogenous（41.65%—41.86% CP， crude protein） and isocaloric （17.6 MJ/kg） diets were formulated， containing 0 （control）， 0.5%，1.0%， 1.5% and 2.0% EDMS， named as control， EDMS05， EDMS10， EDMS15 and EDMS20， respectively. Each diet was randomly fed to triplicate groups of 45 shrimps per cage for 45d. The results showed that EDMS has no effect on crude lipid and crude protein of muscle （P＞0.05）. EDMS increased the ash level and EMDS20 has significantly higher ash than EMDS05 （P＜0.05）. EDMS significantly increased the percentage and content of the essential fatty acids in muscle and hepatopancreas （P＜0.05）. The total triglyceride of serum was remarkably increased （P＜0.05） by adding EDMS and the total cholesterol of serum did not change significantly （P＞0.05） by adding EDMS. The HDL/LDL ratio in EDMS15 was significantly higher than that of the other groups （P＜0.05）. EDMS decreased superoxide dismutase（SOD） and EMDS10 has the strongest effect （P＜0.05）. EDMS significantly increased the Methane Dicarboxylic Aldehyde （MDA） in serum （P＜0.05）. These results suggest that EDMS can improve n-3 HUFA deposition in the muscle of the white shrimp and increase a risk of lipid peroxidation.

Litopenaeus vannamei； Schizochytrium limacinum； Highly unsaturated fatty acid； Lipid peroxidation

10.7541/2016.32

S963.73

A

1000-3207（2016）02-0225-10

2015-03-26；

2015-08-18

公益性行业（农业）专项: 淡水池塘工程化改造与环境修复技术研究与示范（201203083）； 水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心（ZF1206）； 上海海洋大学科技发展专项基金（A2-0209-15-200057）； 上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字（2014）第3—8号）资助 ［Supported by Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest， State Agriculture Ministry of China（201203083）； Shanghai University Knowledge Service Platform Project （ZF1206）； Shanghai Ocean University Funding Program for Development of Science and Technology （A2-0209-15-200057）； Shanghai Science and Technology Key Project for Promoting Agriculture］

钟国防（1974—）， 男， 湖南临武人； 副教授； 研究方向为动物营养与饲料科学、池塘生态养殖技术。E-mail: gfzhong@shou. edu.cn

华雪铭（1974—）， 女， 副教授； 研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail: xmhua@shou.edu.cn