清脑片对小鼠转轮及转棒平衡能力的影响

谢国旗，郝少君，苏 峰，黎丹东，张正臣



清脑片对小鼠转轮及转棒平衡能力的影响

谢国旗，郝少君，苏 峰，黎丹东，张正臣*

目的 观察清脑片对小鼠转轮平衡能力及转棒平衡能力的影响。方法 取小鼠50只，随机分为5组，即模型组，晕痛定组，大、中、小剂量清脑片组，每组10只。分别灌服大、中、小剂量清脑片混悬液、晕痛定胶囊混悬液及同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药7 d，于末次给药后第2天进行转轮实验。将小鼠放在转轮上，转速调至20 r/min，每只小鼠重复测定3次，记录小鼠在滚轴上持续运动不掉落的时间(以秒计数)，并取其最长停留时间及三次停留时间的总和作为观察指标；另取小鼠50只，按上述方法分组、给药，连续给药10 d，于末次给药后1 h进行转棒平衡实验。结果 与对照组比较，大剂量清脑片组最长停留时间明显延长(P<0.05)，中、小剂量清脑片组的最长停留时间略有延长(P>0.05)；大剂量清脑片组三次停留时间总和明显延长(P<0.05)；与对照组比较，清脑片组小鼠体重明显增加(P<0.05)；大、中、小剂量清脑片组小鼠在转棒上停留时间略有延长(P>0.05)。结论 大剂量清脑片可延长小鼠最长停留时间及三次停留时间总和，显著增加小鼠体重。

清脑片；小鼠；平衡能力；晕痛定胶囊

0 引言

目前，我国18～65岁人群中，头痛、头晕的发病率为23.8%，且80%的头痛头晕患者中，有3.68%的患者因就医而引发严重的心脑血管病及抑郁自杀行为。每年有1% (98.1万)的头痛、头晕患者死于该病引起的严重疾病。头痛、头晕的治疗药物虽然多，但效果均不理想；而西药虽见效快但持续时间短，且不良反应大。本研究自拟清脑片的主要成分为白芷、当归、川芎、勾藤、细辛、龙骨、薄荷等8味中药，具有活血、行气通窍、止痛、清利头目的功效，用于头痛、头晕、脑震荡后遗症。为验证其疗效原理，笔者观察并分析了清脑片对小鼠的转轮平衡能力及转棒平衡能力的影响[1-8]，现报道如下。

1 实验材料

1.1 药物试剂 清脑片(主要成分：白芷、当归、川芎、勾藤、细辛、龙骨、薄荷；功能主治：活血、行气通窍、止痛、清利头目，用于头痛、头晕、脑震荡后遗症的治疗；用法用量：3次/d口服，3～5片/次)，我院自制。制法：取白芷50 g、当归75 g及川芎75 g粉碎成100目细粉备用。剩余白芷、当归、川芎及其余各味药材粉碎成10目粗粉，加8倍水煎煮2次，首次2 h，二次2 h，合并煎煮液，滤过。滤液浓缩至相对密度1.15～1.30 (80 ℃)。加入上述细粉、淀粉适量，混匀，干燥成干膏，粉碎，用稀糖浆经14～16目筛制粒，50～60 ℃烘干，用14目筛整粒，加入1%硬脂酸镁混匀，压片(每片0.3 g)，包衣，制成1 000片。批号：20141125。晕痛定胶囊(河南龙都药业有限公司，批号：150309)。生理盐水(河南双鹤华利药业有限公司，批号：130909 06B)，医用乙醇(新乡市三伟消毒制剂有限公司，批号：20140105)，纯净水(新乡娃哈哈食品有限公司，批号：20130811)。

1.2 实验仪器 JM 1000电子秤，余姚记铭称重校验设备有限公司；AL204电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；HHS-21-8型电热恒温水浴锅，上海博迅实业有限公司医疗设备厂；BCD-248T型冰箱，新飞电器有限公司；ZB-200疲劳转棒仪。

1.3 实验动物 KM小鼠，雌雄各半，18～22 g，级别：SPF，转轮实验合格证号：3700920000904，转棒实验合格证号：3700920000903。提供单位：山东鲁抗医药股份有限公司，许可证号：SCXK鲁20130001。实验动物使用许可证：SYXK(豫)2015-0005。恒温23 ℃，湿度60%，人工照明12 h，白天与12 h黑夜交替，给予常规的实验室饮食，不限制饮水。

1.4 试液配制 空白组用药：蒸馏水；给药组用药：药粉+蒸馏水。配制方法：将清脑片碾碎打粉，按临床剂量的7.5、15、30倍称取药粉，均按0.1 mL/10 g的灌胃体积。储存方法：冷藏，用时隔水温热。

2 实验方法与结果

2.1 对小鼠转轮平衡能力的影响 取昆明种小鼠50只，体重18～21 g，雌雄各半，实验室正常饲养3 d，随机分为5组，即模型组、晕痛定组及大、中、小剂量清脑片组，每组10只(雌雄各半)。分别灌服大、中、小剂量清脑片混悬液(2.24、1.12、0.56 g/kg，0.22、0.11、0.056 g/mL，0.1 mL/10 g)、晕痛定胶囊混悬液(0.9 g/kg，0.09 g/mL，0.1 mL/10 g)及同体积的生理盐水(0.1 mL/10 g)，每天给药1次，连续给药7 d，于末次给药后第2天进行转轮实验。将小鼠放在转轮上，转速调至20 r/min，每只小鼠重复测定3次，记录小鼠在滚轴上持续运动不掉落的时间，并取其最长停留时间及3次停留时间的总和作为观察指标。由表1所示，与模型组比较，大剂量清脑片组及晕痛定胶囊组的最长停留时间明显延长(P<0.05)，中、小剂量清脑片组略有延长(P>0.05)；大剂量清脑片组的3次停留时间总和明显延长(P<0.05)，晕痛定组3次停留时间总和延长(P<0.01)，中、小剂量清脑片组3次停留时间略有延长，但差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 对小鼠转棒平衡能力的影响 取昆明种小鼠50只，体重18～21 g，雌雄各半，实验室正常饲养3 d，随机分为5组，即模型组、晕痛定组及大、中、小剂量清脑片组，每组10只。分别灌服大、中、小剂量清脑片混悬液(2.24、1.12、0.56 g/kg，0.22、0.11、0.056 g/mL，0.1 mL/10 g)、晕痛定胶囊混悬液(0.9 g/kg，0.09 g/mL，0.1 mL/10 g)及同体积的生理盐水(0.1 mL/10 g)，每天给药1次，连续给药10 d，于末次给药后1 h进行转棒平衡实验。先将疲劳转棒仪调整到训练状态，放上小鼠进行适应性训练10 min，然后调整疲劳转棒仪于测试状态，转速为30 r/min，将训练过的小鼠依次放在转棒上，记录小鼠在疲劳转棒仪上停留的时间。由表2可见，各组初始体重比较差异无统计学意义(P>0.05)，说明分组均匀。第10天，与模型组比较，清脑片组和晕痛定组可增加小鼠体重(P<0.05)；晕痛定组小鼠在转棒的停留时间明显延长(P<0.05)，清脑片组小鼠在转棒上停留时间略有延长，但差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

清脑片方中白芷，辛、温，具有解表散风、通窍止痛的作用，为君药。当归，辛、温，归肝、心脾经，具有补血、活血、止痛的作用；川芎，辛、温，具有活血行气、祛风止痛的功效；钩藤，性味甘、微寒，具有息风止痉、清热平肝之功效；细辛，性味辛、温，具有祛风散寒、通窍止痛的功效。四药合用为臣药。龙骨，性味甘、涩、平，归心、肝、肾经，具有镇惊安神、平肝潜阳、收敛固涩的作用，为佐药。薄荷，性味辛、凉，具有疏散风热、清利头目之功效，为使药。以上七药合用，具有活血、行气、通窍止痛、清利头目的作用，用于治疗头痛、头晕、脑震荡后遗症。临床研究显示，清脑片的疗效较好[9]；范莉莉等[10]也对其药剂进行了研究。本研究结果表明，大剂量清脑片可延长最长停留时间及3次停留时间总和，显著增加小鼠体重，大、中、小剂量清脑片仅使小鼠在转棒上停留的时间略有延长(P>0.05)，提示自拟清脑片有抗平衡失调的作用，为临床应用垫定了基础。

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

表2 清脑片对小鼠转棒平衡能力的影响(g)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

志谢：本实验在河南中医学院苗明三教授指导下完成，特此致谢！

[1] 郭连莹,王晓红,周波,等.叶酸对砷中毒小鼠脑部认知功能和运动损伤的保护作用[J].山东医药,2014,54(21):33-34.

[2] 陈永红,邹志飞,许崇辉,等.元秘-D抗疲劳作用的动物实验研究[J].食品科学,2005,26(9):482-483.

[3] 陆荣柱,陈自强,金复生.丙烯腈对大鼠神经行为功能的影响[J].工业卫生与职业病,2002,28(3):137-140.

[4] 李彦冰,耿慧春,李庭利,等.黄连阿胶汤抗焦虑作用的药效学研究[J].中医药学报,2004,32(5):21-22.

[5] 马依努尔·拜克力,陈君,阿吉艾克拜尔·艾萨.玫瑰花多酚抗小鼠躯体疲劳研究[J].中国药理学通报,2015,31(3):441-442.

[6] 孙建,罗慧英.肉苁蓉水煎剂对运动小鼠抗疲劳能力的影响[J].甘肃中医学院学报,2009,26(4):10-12.

[7] 耿秀丽，赵京生，王希东.抗眩颗粒对小鼠耳廓细静脉管径及细动脉管径的影响[J].实用药物与临床,2015,8:904-905.

[8] 王希东,郝少君,李文俊,等.抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环的影响[J].实用药物与临床,2015,6:653-655.

[9] 耿秀丽,段光明,郝少君.自制清脑片与养血清脑颗粒治疗脑震荡后头痛的效果比较[J].实用医药杂志,2013,3:238-239.

[10]范莉莉,王灵,李文俊,等.清脑片中阿魏酸的HPLC含量测定方法[J].河南中医,2015,4:909-911.

Effect of Qingnao tablet on the balance of wheel running and rotating rod of mice

XIE Guo-qi,HAO Shao-jun,SU Feng,LI Dan-dong,ZHANG Zheng-chen*(the 371 Chinese People′s Liberation Army Hospital of Xinxiang,Xinxiang 453000,China)

Objective To observe the effect of Qingnao tablets on the balance of rotating rod and wheel running of mice.Methods Fifty mice were randomly divided into 5 groups:model group,yuntongding group and high,middle-and low-dose Qingnao tablet group,10 mice in each group.High,middle and low dose of Qingnao tablet suspension,Yuntongding capsule suspension and the same volume of physiological saline were intragastrically administered for 7 d of continuous administration,once daily;all the mice were given wheel running on the second day after the last dose of medication.The mice were put in the runner,and the rotating speed was adjusted to 20 r/min,and each mice was repeated for 3 times.The time of mice rolling without falling was recorded,and the longest residence time and the sum of three residence time were recorded as the observation index.Fifty mice were grouped and administered through the same method for 10 d,and the rotating rod balance experiment was given at 1 h after the last administration.Results Compared with control group,the longest residence time in high dose Qingnao tablet group was longer (P<0.05),and the time in middle-and small-dose of Qingnao tablet group was slightly longer (P>0.05);the sum of three residence time of Qingnao tablet group was longer (P<0.05);the body weight of mice in Qingnao tablet groups increased (P<0.05);The time of mice staying on the rotating rod in Qingnao tablet groups was slightly longer (P>0.05).Conclusion High-dose Qingnao tablet can significantly prolong the longest residence time and the sum of three residence time,and increase the body weight of mice.

Qingnao tablet;Mice;Balance;Yuntongding capsule

2016-03-23

中国人民解放军第三七一医院，河南 新乡 453000

河南新乡市重点科技项目(ZG11014)

10.14053/j.cnki.ppcr.201610005

*通信作者