HBME-1、CK19和CD117在甲状腺乳头状癌表达的临床病理意义

曾 铮,李瑞平,赵 敏,魏艳华,施中元

(江苏省中西医结合医院/江苏省中医药研究院病理科 210028)



·论 著·

HBME-1、CK19和CD117在甲状腺乳头状癌表达的临床病理意义

曾 铮,李瑞平,赵 敏,魏艳华,施中元

(江苏省中西医结合医院/江苏省中医药研究院病理科 210028)

目的 通过检测HBME-1、CK19和CD117在甲状腺乳头状癌、滤泡性腺瘤和桥本甲状腺炎组织学标本的表达，探讨3种抗体在甲状腺乳头状癌鉴别诊断中的临床价值。方法 收集该科2013年1月至2015年12月85例甲状腺腺叶切除标本，进行HBME-1、CK19和CD117免疫组织化学染色，并对不同病变的染色结果进行分析。结果 HBME-1、CK19和CD117在甲状腺乳头状癌的阳性表达率分别为87.3%、98.2% 和 7.3%，三者阳性表达率在良性组与恶性组之间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，K值分别为0.582、0.551和0.874。结论 甲状腺乳头状癌与良性病变的鉴别诊断，CD117检测优于HBME-1和CK19，实际工作中适于联合使用。

甲状腺癌； 免疫组织化学； HBME-1； CK19； CD117

甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升趋势，其中大部分为乳头状癌[1]。许多实验报道使用免疫组织化学染色方法进行鉴别诊断，包括对多种抗体的联合运用，推荐HBME-1和CK19作为鉴别诊断抗体之一[2-4]。实际运用中发现有一定程度的假阳性和假阴性，现检测HBME-1、CK19和CD117在甲状腺乳头状癌、滤泡性腺瘤和桥本甲状腺炎组织学标本的表达，探讨3种抗体在甲状腺乳头状癌鉴别诊断中的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择该科2013年1月至2015年12月甲状腺腺叶切除标本85例，术后标本经组织学诊断为甲状腺乳头状癌55例，包括45例经典型和10例滤泡型；甲状腺滤泡性腺瘤15例；桥本甲状腺炎15例。所有组织学切片均经2名高年资医师重复确认。诊断标准参照WHO《内分泌器官肿瘤病理学与遗传学(2004年版)》标准。

1.2 方法 肿瘤标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm切片。抗体CD117购自Dako公司，1∶600稀释；抗体HBME-1和CK19购自迈新公司，即用型。采用Envision 2步法免疫组织化学染色法，操作步骤严格按说明书进行。

1.3 判定标准 HBME-1阳性定位于肿瘤细胞质，为淡黄色至棕黄色胞浆或周边毛刷样着色；CK19阳性呈细胞膜棕黄色线样着色；CD117阳性定位于肿瘤细胞的细胞质和细胞膜，为棕黄色胞质细胞颗粒或包膜线样着色。选取有代表性的区域，按阳性细胞数占肿瘤细胞的比例分级，<5%为阴性(-)，5%～25%为弱阳性(+)，26%～50%为中等阳性(++)，>50%为强阳性(+++)。

1.4 统计学处理 使用SPSS16.0统计软件进行数据分析，计数资料组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义；诊断学一致性检验应用Kappa一致性检验，K值越大，吻合度越高，K≥0.7表示吻合度较强，0.4≤K<0.7表示吻合度一般，K<0.4表示吻合度较弱。

2 结 果

2.1 HBME-1在3种组织标本的表达结果比较 45例经典型甲状腺乳头状癌中HBME-1阴性6例，弱阳性4例，中等阳性9例，强阳性26例。滤泡型甲状腺乳头状癌中HBME-1阴性1例，弱阳性2例，中等阳性2例，强阳性5例。15例滤泡型腺瘤，HBME-1阴性12例，弱阳性2例，中等阳性1例，强阳性0例。15例桥本甲状腺炎中HBME-1阴性9例，弱阳性6例，中等阳性0例，强阳性0例。HBME-1的阳性表达率在良性组与恶性组之间比较，差异有统计学意义(χ2=28.825，P<0.05)，一致性检验Kappa=0.582。HBME-1检测恶性组的敏感性为87.3%，特异性为70.0%。见图1～4。

图1 HBME-1在经典型甲状腺乳头状癌的表达

图2 HBME-1在滤泡型甲状腺乳头状癌的表达

图3 HBME-1在甲状腺滤泡型腺瘤的表达

图4 HBME-1在桥本甲状腺炎的表达

2.2 CK19在3种组织标本的表达结果比较 45例经典型甲状腺乳头状癌中CK19阴性1例，弱阳性3例，中等阳性6例，强阳性36例。滤泡型甲状腺乳头状癌中CK19阴性0例，弱阳性1例，中等阳性1例，强阳性8例。15例滤泡型腺瘤中CK19阴性9例，弱阳性2例，中等阳性4例，强阳性0例。15例桥本甲状腺炎中CK19阴性7例，弱阳性6例，中等阳性2例，强阳性0例。CK19的阳性表达率在良性组与恶性组之间比较，差异有统计学意义(χ2=26.826，P<0.05)，一致性检验Kappa=0.551。CK19检测恶性组的敏感性为97.8%，特异性为53.3%。见图5～8。

图5 CK19在经典型甲状腺乳头状癌的表达

图6 CK19在滤泡型甲状腺乳头状癌的表达

图7 CK19在甲状腺滤泡型腺瘤的表达

图8 CK19在桥本甲状腺炎的表达

2.3 CD117在3种组织标本的表达结果比较 45例经典型甲状腺乳头状癌中CD117阴性42例，弱阳性3例，中等阳性0例，强阳性0例。滤泡型甲状腺乳头状癌中CD117阴性9例，弱阳性1例，中等阳性0例，强阳性0例。15例滤泡型腺瘤中CD117阴性1例，弱阳性1例，中等阳性5例，强阳性8例。15例桥本甲状腺炎中CD117阴性0例，弱阳性3例，中等阳性6例，强阳性6例。CD117的阳性表达率在良性组与恶性组之间比较，差异有统计学意义(χ2=65.313，P<0.05)，一致性检验Kappa=0.874。CD117检测良性组的敏感性为96.7%，特异性为92.7%。见图9～12。

图9 CD117在经典型甲状腺乳头状癌的表达

图10 CD117在滤泡型甲状腺乳头状癌的表达

图11 CD117在甲状腺滤泡型腺瘤的表达

图12 CD117在桥本甲状腺炎的表达

3 讨 论

手术标本中甲状腺乳头状癌与桥本甲状腺炎合并存在，桥本甲状腺炎患者易患甲状腺乳头状癌。多数学者认为桥本甲状腺炎引发的甲状腺滤泡上皮改变是乳头状癌的早期事件，该观点还缺乏有力的直接证据。随着超声技术和细针穿刺细胞学的不断进步及普遍应用，越来越多的微小癌被检出，其中大多数同样合并桥本甲状腺炎。甲状腺乳头状癌的组织学诊断标准无特异性和排他性，实际运用中需要与多种良性疾病鉴别，最常见的是与桥本甲状腺炎的不典型滤泡上皮细胞鉴别。当甲状腺微小癌直径小于0.5 cm，如无典型乳头状结构，镜下表现为大量胶原组织散在分布的滤泡结构，病理医师将面对良恶性鉴别的挑战[2]。

HBME-1是间皮细胞表面微绒毛的一种抗原成分，是一种酸性氨基多聚糖蛋白，主要成分是透明质酸，有研究报道在甲状腺乳头状癌中高表达[5-6]。本研究结果显示，HBME-1在恶性组的表达率显著高于良性组，且强阳性表达病例集中于恶性组，一致性检验显示其诊断效能一般，但具有较好的敏感性，特异性不高，主要原因是桥本甲状腺炎中会有弱阳性表达，导致假阳性偏高。

CK19在甲状腺乳头状癌高表达，但在甲状腺良性病变中的表达也被学者关注[2]。本研究结果表明，CK19在良恶性组之间的表达率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，但一致性检验显示诊断效能一般，敏感性及特异性分别为97.8%和53.3%，虽然敏感性高于HBME-1，但特异性显著低于HBME-1，两者都不适合单独用于甲状腺乳头状癌的鉴别诊断。

CD117是由c-kit基因(4q11～q21)编码的Ⅲ型跨膜酪氨酸激酶受体家族成员，是白色斑点(W)位点的等位基因，已知W位点在肥大细胞、生殖细胞、黑色素细胞的分化中起重要作用。随着研究的深入，发现CD117表达于人体多种细胞中，目前CD117广泛应用于胃肠道间质肿瘤、精原细胞瘤、嫌色性肾细胞癌、腺样囊性癌等多种肿瘤的诊断与鉴别诊断中[7]。本研究结果证实，CD117在甲状腺乳头状癌的表达率较良性病变显著降低，且阳性表达病例均未出现中等及强阳性表达，其在良恶性组间的表达水平与HBME-1和CK19完全相反，两者联合可以反向验证，提高良恶性鉴别的准确性。即使单独参考CD117的表达，其与良恶性组的诊断一致性Kappa=0.874，CD117检测良性组的敏感性为96.7%，特异性为92.7%，提示其诊断价值优于HBME-1和CK19。

综上所述，甲状腺乳头状癌与良性病变鉴别诊断时，CD117诊断效能优于HBME-1和CK19，且CD117与HBME-1、CK19阳性表达率均相反，实际工作中可联合使用，提高诊断的准确性。

[1]罗胜兰，俞敏，龚巍巍．甲状腺癌的流行现况及其危险因素[J]．中国预防医学杂志，2013，29(4)：317-322．

[2]邓敏，叶顾萍，马建中，等．甲状腺乳头状癌中CK19、Galectin-3、HBME-1和TPO的表达及意义[J]．临床与实验病理学杂志，2011，27(8)：843-846．

[3]林军，应亚君，瞿海江，等．CK19、Galectin-3、HBME-1、p27及CyclinD1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义[J]．中国癌症杂志，2009，19(6)：433-438．

[4]黄悦，赵建华，樊克武．HBME-1和CK19、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中表达及诊断价值[J]．南京医科大学学报(自然科学版)，2007，27(11)：1294-1297．[5]Rahmani A,Dehghani MZ,Afshar NM,et al.HBME-1 immunostaining in reactive mesothelial versus metastatic adenocarcinoma cells in serous fluid[J].Indian J Pathol Microbiol,2011,54(3):460-463.

[6]Matos LL,Del Giglio AB,Matsubayashi CO,et al.Expression of CK-19,galectin-3,and HBME-1 in the differentiation of thyroid lesions:systematic review and DIAGNOSTIC meta-analysis[J].Journal of Clinical Oncology,2012,30(15):97-101.

[7]侯英勇，朱雄增．CD117在胃肠道间质瘤和其他肿瘤中的表达[J]．中华病理学杂志，2006，35(12)：747-749．

Expression of HBME-1,CK19 and CD117 in papillary thyroid carcinoma and its significance

ZENGZheng,LIRuiping,ZHAOMin,WEIYanhua,SHIZhongyuan

(DepartmentofPathology,JiangsuProvinceHospitalofIntegratedTraditionalChineseMedicineandWesternMedicine/JiangsuProvinceAcademyofTraditionalChineseMedicine,Nanjing,Jiangsu210028,China)

Objective To explore the value of three antibodies in the differential diagnosis of papillary thyroid carcinoma,by detecting the expression of HBME-1,CK19 and CD117 in papillary thyroid cacinoma,thyroid follicular adenoma and Hashimoto′s thyroiditis tissues.Methods Totally 85 cases were collected from January 2013 to December 2015,including papillary thyroid cacinoma,thyroid follicular adenoma and Hashimoto′s thyroiditis.They were immunohistochemical stained by HBME-1,CK19 and CD117.SPSS16.0 software was used to analyze the relationship between the staining results with different pathological changes.Results The positive rates of HBME-1,CK19 and CD117 were 87.3%,98.2%,and 7.3%,respectively.The positive expression of them in benign and malignant groups had significant difference (P<0.05) and their consistency checking Kappa were 0.582,0.551,and 0.874,respectively.Conclusion In the differential diagnosis of papillary thyroid carcinoma and benign lesions,CD117 is better than HBME-1 and CK19.It′s possible to use a combination of them in practice.

thyroid carcinoma； immunohistochemistry； HBME-1； CK19； CD117

曾铮，男，主治医师，主要从事肿瘤病理研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.009

A

1673-4130(2016)20-2825-04

2016-03-22

2016-06-06)