IFN-γ释放实验和结核抗体检测在肺结核诊断中的临床价值

范慧洁，张新丽

(河南省周口市中心医院检验科 466000)



·临床研究·

IFN-γ释放实验和结核抗体检测在肺结核诊断中的临床价值

范慧洁，张新丽△

(河南省周口市中心医院检验科 466000)

目的 探讨IFN-γ释放实验(IGRA)和结核抗体检测在肺结核诊断中的临床价值。 方法 选取2015年4月至2016年3月该院确诊的158例肺结核患者(肺结核组)及162例其他呼吸道疾病患者(对照组)为研究对象，进行IGRA实验和结核抗体检测，比较2种方法检测2组患者的阳性率结果。结果 IGRA实验和结核抗体检测在肺结核组的阳性率分别为80.38%(127/158)和50.63%(80/158)，均高于对照组，差异有统计学意义(χ2分别为6.008和132.662,P<0.05)。IGRA实验与结核抗体检测结果的符合率为44.94%，IGRA检测阳性率高于结核抗体检测，差异有统计学意义(χ2=4.516,P<0.05)。IGRA实验的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率分别为80.38%、83.95%、83.01%、81.44%、82.19%，结核抗体检测分别为50.63%、 62.96%、57.14%、56.67%和56.88%。 结论 2种检测方法为肺结核诊断提供有效的实验数据，IGRA实验具有更高的灵敏度和特异度，但费用较高，尚不能大规模应用于临床。

IFN-γ释放实验； 结核抗体； 肺结核

结核病由结核分枝杆菌引起的传染性疾病，是影响公共健康的重大问题[1]。2014年全球新增结核感染病例960万，病死率达150万[2]。肺结核作为一种最常见的结核病，早期诊断和治疗仍存在困难。现应用结核抗体检测和IFN-γ释放实验(IGRA)进行实验结果的对比分析，评估其在肺结核诊断中的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年4月至2016年3月该院确诊的158例肺结核患者为研究对象(肺结核组)，男89例，女69例，年龄17～87岁，平均年龄(57.34±16.56)岁。对照组为其他呼吸道疾病患者162例，男72例，女50例，年龄15～85岁，平均年龄(52.94±15.64)岁，包括COPD、肺气肿、慢性支气管炎等。肺结核诊断依据临床症状、体征、影像学、细菌学、血清学及抗结核疗效并参照《内科学(第8版)》诊断标准[3]。

1.2 仪器及试剂 热电酶标仪MK3购自南京贝登生物科技有限公司；结核抗体试剂有3种，即TB-CHECK试剂盒购自兰州雅华生物技术有限公司，TB-DOT试剂盒购自北京贝尔生物工程有限公司，TB-Ab试剂盒购自潍坊市生物技术有限公司；IGRA试剂盒购自北京万泰生物药业股份有限公司。

1.3 结核抗体检测 采集患者血清，TB-CHECK和TB-DOT 2种检测方法均为胶体金法，肉眼判断阴、阳性。TB-Ab采用ELISA法，使用酶标仪测出OD值，根据说明书结果判断阴、阳性。3种抗体任意一种或多种为阳性时均为结核抗体检测结果阳性。

1.4 IGRA实验 采集人体肝素抗凝静脉血4 mL以上，2 h内将全血标本轻柔颠倒混匀3～5次后依次分装到“N”、“T”、“P”3种培养管中，1毫升/管。将培养管轻柔颠倒混匀后放入37 ℃水浴箱中(22±2)h，取血浆按照说明书进行ELISA检测。每例患者3种培养血浆各1孔，校准品各双孔，空白对照1孔，分别在相应孔中加入样品稀释液20 μL(空白对照孔除外)，然后分别在相应孔中加入待测标本或校准品50 μL(空白对照孔除外)，轻轻震荡混匀，封板至37 ℃温育60 min。每孔加入酶标试剂50 μL(空白对照孔除外)，轻轻震荡混匀，封板至37 ℃温育60 min。洗板机洗板5遍，最后1次甩干，每孔加入显色剂A、B各50 μL，轻轻振荡混匀，37 ℃避光显色15 min。每孔加终止液50 μL，轻轻振荡混匀，10 min内使用酶标仪波长450 nm处，用空白孔调零后检测各孔OD值，计算判断阴阳性。

1.5 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，组间比较使用χ2检验或Fisher精确检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2种方法检测2组患者的结果比较 结核抗体检测和IGRA实验检测肺结核组的阳性率分别为50.63%(80/158)和80.38%(127/158)，均高于对照组，差异有统计学意义(χ2分别为6.008和132.662,P<0.05)。见表1。

表1 2种方法检测2组患者的结果比较[n(%)]

2.2 2种检测方法的结果比较 IGRA实验与结核抗体检测肺结核组患者的结果符合率为44.94%，IGRA实验的阳性率高于结核抗体检测，差异有统计学意义(χ2=4.516,P<0.05)，IGRA实验和结核抗体检测的灵敏度分别为80.38%和50.63%，特异度为83.95%和62.96%，阳性预测值为83.01%和57.14%，阴性预测值为81.44%和56.67%，准确率为82.19%和56.88%。见表2、3。

表2 2种检测方法的结果比较(n)

注：χ2=4.516，P=0.034。

表3 2种检测方法的性能比较(%)

3 讨 论

结核抗体主要检测血清中结核特异分泌抗原抗体、结核特异外膜抗原抗体和结核分枝杆菌抗体免疫球蛋白G(IgG)，具有简便、快速、低成本低特点，是临床常用辅助项目。IGRA实验通过检测经结核分枝杆菌特异性抗原刺激特异性效应T细胞产生的γ-干扰素(IFN-γ)水平，从而判断是否具有针对结核分枝杆菌的特异性T细胞免疫反应，具有较高的灵敏度和特异度[3-5]。

机体受结核分枝杆菌感染时，针对其不同的抗原可产生特异性的免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)和IgG抗体，而IgG是构成结核抗体的主要部分。Feng等[6]研究报道，活动性肺结核患者血清IgG阳性率在46.2%～65.7%之间，与本研究结果大致相同。血清学结核抗体检测存在假阴性和假阳性，有以下几种情况：(1)新感染患者还未在体内产生抗体或抗体水平较低，未达到检测限，导致假阴性。(2)免疫缺陷患者产生抗体的能力较低，也会造成假阴性。(3)接种疫苗或曾经感染结核但已痊愈的患者体内仍有结核抗体，检测结果为阳性，但不能认为存在结核现症感染。(4)结核分枝杆菌与其他细菌存在交叉抗原决定簇，也可导致假阳性。本研究有2种结核抗体检测采用胶体金法，人工操作和结果判读存在某种程度的人为误差，提示结核抗体检测存在一定的局限性，必须与其他检测结合。

IGRA实验的灵敏度和特异度均高于结核抗体检测，且不受卡介苗接种及机体免疫状况的影响，可用于新肺结核感染和隐匿性肺结核感染的辅助诊断[7]。IGRA实验为非创伤性体外实验，方便、快速，最低检出量为2 pg/mL，并针对特异性的结核分枝杆菌抗原，具有较高的灵敏度和特异度。张宏宇等[8]研究报道，T-SPOT TB实验在肺结核诊断方面的灵敏度和特异度均高于PPD、涂片镜检法、痰培养法和结核抗体检测，与本实验结果一致。本研究使用的是T-SPOT TB实验的优化，与美国FDA认证的同类试剂QFT具有较高的符合率，可用于结核感染的辅助诊断，但其结果不能代替痰涂片、培养或影像学等较为经典的结核分枝杆菌感染的诊断方法，也不作为临床诊断的唯一证据。

综上所述，IGRA实验优于结核抗体检测，但费用昂贵，并不适合临床结核分枝杆菌感染患者的筛查，所以结核抗体检测仍需继续开展。2种方法联合检测可减少误诊和漏诊，更好地服务于临床。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.20.058

A

1673-4130(2016)20-2931-03

2016-02-21

2016-04-15)

△通讯作者，E-mail:zhangxinli198@163.com。