云岭牛染色体G带分析

亏开兴，杨 凯，佴文惠，和霁恬，金显栋，王安奎，胡映开，和占星，张继才，黄必志

（1.云南省草地动物科学研究院，昆明 650212；2.云南省肉牛工程技术研究中心，昆明 650212；3.中国科学院昆明动物研究所遗传资源与进化国家重点实验室，昆明 650223）

云岭牛染色体G带分析

亏开兴1，2，杨 凯1，佴文惠3，和霁恬1，金显栋1，王安奎1，胡映开2，和占星1，2，张继才1，黄必志1

（1.云南省草地动物科学研究院，昆明 650212；2.云南省肉牛工程技术研究中心，昆明 650212；3.中国科学院昆明动物研究所遗传资源与进化国家重点实验室，昆明 650223）

通过对云岭牛外周血及耳组织成纤维细胞培养制作染色体G带标本，结果显示，云岭牛染色体数目为2n=60，公牛核型为60，XY；母牛核型为60，XX。其中1～29号染色体全部为端着丝粒染色体，X染色体为亚中着丝粒染色体，Y染色体为一较小的端着丝粒染色体，Y染色体为瘤牛型的Y染色体。云岭牛染色体G带明暗相间，与其他牛品种间的带纹特征差异还需进一步研究。

云岭牛；染色体；G带

云岭牛新品种选育始于中-澳技术合作计划“云南牲畜和草场发展”项目（1983—1991），随后在“八五”期间，由云南省科技厅立项攻关研究计划，最终从11个杂交组合中筛选出BMY组合作为选育素材，其血缘构成为1/2婆罗门牛、1/4莫累灰牛、1/4云南黄牛［1-3］。随后，“九五”、“十五”持续由云南省攻关研究计划立项实施热带亚热带肉牛新品种选育，旨在通过杂交育种，结合人工授精、MOET及群选群育开放式育种等技术，经过杂交创新、横交选育、自群繁育形成云岭牛新种群，以改变云南黄牛体型较小、生长速度慢、个体产品率低，莫累灰牛耐热抗蜱、耐粗饲能力差，婆罗门牛产肉和繁殖性能低等缺陷；同时保留并融合云南黄牛适应性强、耐粗饲、肉风味好，莫累灰牛生长快、繁殖性能高、肉质好，婆罗门牛耐热抗蜱易饲养管理等优良特性，经过严格的选种选育和扩繁，最终培育出适合我国南方热带亚热带气候环境的专门化肉牛新品种［1-5］。前期作者等曾以BMY牛（即云岭牛）为研究对象进行了细胞遗传学观察，比较分析了云岭牛与婆罗门牛等品种的核型差异，补充和积累了云岭牛的遗传学基础资料［6］。本研究对云岭牛染色体G带进行研究，为其细胞遗传学研究、基因定位和疾病诊断等提供遗传学资料。

1 材料与方法

1.1 试验材料

外周血和耳组织采自于云南省草地动物科学研究院小哨示范牧场云岭牛核心群4头（2、2♀）。公牛为种用公牛，母牛随机采取。用含有肝素钠抗凝的注射器从每头牛颈静脉抽取外周血2～5mL，随冰块低温保存，送昆明动物研究所昆明野生动物细胞库进行细胞培养。

1.2 方法

按刘瑞清等［7］、Peng等［8］和宋敏艳等［9］方法，稍作修改进行外周血淋巴细胞的培养、细胞收获和染色体标本制备。对显带和分散最好的分裂相用Cyto Vision System （Applied Imaging）软件进行图像拍摄和分析，染色体G带分析依染色体长度递减排列染色体和编号。

2 结果与分析

2.1 云岭牛的染色体数目

在显微镜下拍照、计数，选取背景清晰、长短适中的中期分裂相计数，云岭牛染色体数目为2n=60。

2.2 云岭牛染色体G带观察

按前人对牛核型染色体的排列与同源配对［10-11］，依染色体大小递减排列，依次为1～29，性染色体不编号，排列于最后（图1、图2）。由图可见，云岭牛的染色体数目为2n=60，染色体臂数NF=62，有29对端着丝粒染色体，X染色体为亚中着丝粒染色体，Y染色体为一条较小的端着丝粒染色体，属于瘤牛型（indicus-type）［6，10-11］，完全符合云岭牛育种的遗传背景，与前期结果一致［6］。云岭牛染色体G带明暗相间，与其他牛品种间的带纹特征差异还需进一步研究。

图1 云岭牛公牛染色体G带

图2 云岭牛母牛染色体G带

3 讨论

云岭牛由婆罗门牛、莫累灰牛和云南黄牛三元杂交选育而来。育种过程中，先用莫累灰公牛与云南黄牛杂交，产生莫云杂，再以婆罗门牛为终端父本，最终形成含1/2婆罗门牛、1/4莫累灰牛、1/4云南黄牛血缘的专门化肉牛新品种。云岭牛是肉牛品种中对自然生态环境适应性最强的肉牛品种之一，能够适应热带亚热带气候环境，且在高温高湿条件下表现出较好的繁殖能力和生长速度；云岭牛有较强的耐粗饲能力，适宜于全放牧、放牧加补饲、全舍饲等饲养方式，对体内外寄生虫等有较强的抵抗力，适应性强［1-5］。

云岭牛继承了其终端父本婆罗门牛的Y染色体，其核型与婆罗门牛一致，并表现为瘤牛型的端着丝粒染色体［6］，与以前的报道一致［10-11］。云岭牛与普通牛、瘤牛、牦牛的染色体数目一样（2n=60），而与东南亚丛林的大额牛、云南野牛、泰国野牛相差较大，并表现为1～2个罗伯逊易位的差异［6，12］。本研究为云岭牛积累了细胞遗传学的基础数据，云岭牛染色体G带明暗相间，与其他牛品种间的带纹特征差异还需进一步研究。

［1］文际坤.云南热带亚热带肉牛品种杂交组合及选育研究总结［J］.黄牛杂志，1996，22（增刊）：1-10.

［2］文际坤，杨国荣，赵开典，等.BMY牛的扩繁和选育研究［J］.云南畜牧兽医，2003（3）：1-4.

［3］亏开兴，赵刚，杨国荣，等.BMY牛的选育进展［J］.中国牛业科学，2007，33（3）：18-21.

［4］黄必志，王安奎，金显栋，等.云岭牛新品种的选育［C］//第九届中国牛业发展大会论文集.2014：129-139.

［5］杨凯，亏开兴，杨世平，等.云岭牛的生长发育及育肥性能研究［C］//第十届中国牛业发展大会论文集.2015：441-445.

［6］亏开兴，张继才，杨国荣，等.BMY牛和婆罗门牛核型分析［J］.西北农林科技大学学报：自然科学版，2011，39（3）：8-12.

［7］刘瑞清，佴文惠，陈玉泽，等.白颊长臂猿染色体的研究［J］.动物学研究，1996，17（3）：341-346.

［8］Peng K J，Wang J H，Su W T，et al.Characterization of two human lung adenocarcinoma cell lines by reciprocal chromosome painting［J］.Zoological Research，2010，31（2）：113-121.

［9］宋敏艳，高文春，尹正发，等.德宏水牛及其杂交后代染色体多态性分析［J］.中国牛业科学，2012，38（6）：45-49.

［10］单祥年，陈宜峰，罗丽华，等.我国黄牛属（Bos）五个种的染色体比较研究［J］.动物学研究，1980，1（1）：75-81.

［11］Halnan CRE，Watson J I.Y chromosome variants in cattle Bos taurus and Bos indicus［J］.Annales De Génétique Et De Sélection Animale，1982，14（1）：1-16.

［12］Qu K X，He ZX，Nie W H，et al.Karyotype analysis of mithun（Bos frontalis）and mithun bull×Brahman cow hybrids［J］.Genetics and Molecular Research，2012，11（1）：131-140.

Analysis on the G-binding of Chromosome in Yunling Cattle

Qu Kaixing1，2，Yang Kai1，Huang Bizhi1，et al
（1.Yunnan Academy of Grassland and Animal Science，Kunming650212，China；2.Beef Cattle Engineering and Technology Research Center of Yunnan Province，Kunming650212，China）

G-banding samples were made by peripheral blood lymphocyte culture to analyze the karyotype and G-banding pattern of the chromosomes in Yunling cattle.It showed that Yunling cattle had a karyotype of2n=60，displaying bull for XY and cow for XX，of which 1～29 autosomes were telocentric chromosomes and 1 pair of sex-chromosome，and X chromosome was submetacentric chromosome，Y chromosome was a small telocentric chromosomes belonged to zebu type.The G-bindings of the chromosomes in Yunling cattle showed alternately binding patterns，which needed further comparison of the binding characters with other cattle breeds.

Yunling cattle；chromosome；G-binding

S823.2

A

2095-3887（2016）04-0008-03

10.3969/j.issn.2095-3887.2016.04.003

2016-06-06

云南省基础研究重大项目（2013FC004）；青年基金（2014FD076）；云南省草地畜牧业创新团队（2015HC001）；国家肉牛牦牛产业技术体系（CARS-38）

亏 开兴（1975-），男，副研究员，主要从事肉牛遗传育种研究。

黄必志（1964-），男，研究员，主要从事肉牛育种和草产品开发。