Versican、CTGF、TGFβ1在子宫内膜样腺癌及子宫内膜上皮内瘤变中的表达和意义

汪 锋，宋晓燕，胡玉崇，贺慧杰，武 慧，张 帆，钗丽干

(内蒙古自治区人民医院 1.病理科；2.妇产科，内蒙古 呼和浩特010017)



Versican、CTGF、TGFβ1在子宫内膜样腺癌及子宫内膜上皮内瘤变中的表达和意义

汪 锋1，宋晓燕1，胡玉崇2，贺慧杰1，武 慧1，张 帆1，钗丽干1

(内蒙古自治区人民医院 1.病理科；2.妇产科，内蒙古 呼和浩特010017)

目的 探讨多功能蛋白聚糖(Versican)、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)在子宫内膜样腺癌(EA)及子宫内膜上皮内瘤变(EIN)中的表达及三者相关性。方法 采用免疫组织化学方法对76例EA和35例EIN中Versican、CTGF、TGFβ1的表达情况进行了分析，阐述其在EA及EIN中的表达特征及相互关系。结果 在76例EA中Versican、CTGF、TGFβ1阳性表达率分别为75%，65.8%，69.7%，在35例EIN中阳性表达率分别为42.9%，37.1%，37.1%。Versican、CTGF、TGFβ1在EA阳性表达率明显高于EIN阳性表达率，差异均具有统计学意义(P<0.05)，Versican与TGFβ1在EA中表达率具有相关性(P<0.05)，CTGF与TGFβ1在EA中表达率也具有相关性(P<0.05)。结论 子宫内膜上皮内瘤变是子宫内膜样腺癌的癌前病变，Versican、CTGF、TGFβ1的异常表达可能与子宫内膜样腺癌的发生、发展相关，Versican、CTGF、TGFβ1在这一过程中具有明显的相关性。

子宫内膜样腺癌；子宫内膜上皮内瘤变；Versican；结缔组织生长因子；转化生长因子β1

(ChinJLabDiagn,2016,20:1658)

子宫内膜癌是常见的妇科恶性肿瘤，近年来其发病率逐渐增高，在部分国家已经超过子宫颈癌成为最常见的女性生殖系统恶性肿瘤，仅美国每年就有47130例新发病例，8010例死于子宫内膜癌[1]。2014年，第4版WHO将子宫内膜不典型增生(AH)与子宫内膜上皮内瘤变(EIN)并列命名为AH/EIN[2]。分子遗传学研究显示，EIN具有与子宫内膜样腺癌相类似的细胞遗传学改变，进一步证实其为子宫内膜样腺癌的前期病变。Versican是一种软骨素硫酸盐蛋白聚糖，可与多种因子结合，从而调节细胞与细胞、细胞与基质的相互作用，促进细胞增生并诱导肿瘤细胞发生上皮-间质转化(EMT)。TGFβ是EMT的重要细胞因子。TGFβ是CTGF的上游调节介质。本文重点研究Versican、CTGF、TGFβ1在子宫内膜样腺癌及其癌前病变子宫内膜上皮内瘤变中的表达及相互关系。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集内蒙古自治区人民医院病理科2012年8月至2015年12月子宫内膜样腺癌手术标本76例。患者年龄32-72岁，平均年龄54.6岁。子宫内膜上皮内瘤变诊刮标本35例，患者年龄30-69岁，平均年龄50.2岁。所有标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋后行4 μm厚切片。参照2014年，第4版《WHO女性生殖器官肿瘤分类》诊断标准对病例进行回顾性分析，由两名副主任医师以上人员对病理诊断及组织学分级进行确认。

1.2 方法

兔抗人Versican、CTGF、TGFβ1抗体均为北京博奥森生物技术有限公司产品，二抗亦购自北京博奥森生物技术有限公司。采用链霉菌素-生物素(SP)免疫组织化学染色方法检测。

1.3 结果判断

随机选择5个高倍视野，每个视野计数100个瘤细胞，计数阳性细胞百分比。评分标准使用目前已被广泛接受的免疫反应评分(IRS)系统。该评分系统包括阳性染色细胞数和染色强度两部分评价：(1)阳性染色细胞数≤5%为0分，5%-25%为1分，26%-50%为2分，51%-75%为3分，>75%为4分。(2)染色强度无色为0分，染色强度淡黄色为1分，黄色为2分，褐色为3分。将同一组织的两部分评分结果相乘即得出该组织标本的免疫反应评分，0分为无表达“﹣”，1-4分为弱阳性“+”，5-8分为中等阳性“++”，9-12分为强阳性“+++”。在本研究中，为了便于分组统计分析，将无表达和弱阳性定义为阴性表达；将中等阳性和强阳性定义为阳性表达。

1.4 统计学处理

数据统计使用SPSS V13.0统计软件进行处理，显著性检验采用χ2检验，相关性检验采用Spearman相关分析；检验水准为α=0.05.

2 结果

2.1 TGFβ1在EA及EIN中的表达

TGFβ1表达于子宫内膜腺上皮细胞胞质，在76例EA中TGFβ1阳性表达率为69.7%，在35例EIN中阳性表达率37.1%，两者比较差异具有显著性(P<0.05)。见表1。

表1 TGFβ1在子宫内膜样腺癌及子宫内膜上皮内瘤变中表达的比较

2.2 Versican在EA及EIN中的表达

Versican表达于子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞胞质，在76例EA中Versican阳性表达率为75%，在35例EIN中阳性表达率42.9%，两者比较差异具有显著性(P<0.05)。见表2。

表2 Versican在子宫内膜样腺癌及子宫内膜上皮内瘤变中表达的比较

2.3 CTGF在EA及EIN中的表达

CTGF主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞质及胞膜，间质细胞亦有表达，在76例EA中CTGF阳性表达率为65.8%，在35例EIN中阳性表达率37.1%，两者比较差异具有显著性(P<0.05)。见表3。

表3 CTGF在子宫内膜样腺癌及子宫内膜上皮内瘤变中表达的比较

2.4 TGFβ1与Versican在EA中表达的相关性

在76例EA中Versican、TGFβ1阳性表达率分别为75%，69.7%，在子宫内膜样腺癌组织中的表达有协同变化的趋势，表现为随着一种蛋白的表达增强，另一种蛋白其表达也增高，采用Spearman相关分析，r=0.546,P<0.01，表明两者的表达呈正相关。见表4。

表4 TGFβ1与Versican在子宫内膜样腺癌组织中表达的相关性

2.5 TGFβ1与CTGF在EA中表达的相关性

在76例EA中CTGF、TGFβ1阳性表达率分别为65.8%，69.7%，采用Spearman相关分析，r=0.672,P<0.01，表明两者的表达呈正相关。见表5。

表5 TGFβ1与CTGF在子宫内膜样腺癌组织中表达的相关性

3 讨论

研究发现[3，4]，上皮细胞在一些因素的作用下，失去细胞极性，丢失细胞间紧密连接和黏附连接，获得浸润和游走迁移能力，变成了具有间质细胞形态和特性的细胞，这被称为EMT。由于EMT是上皮细胞获得迁移能力的有效方式，成为占恶性肿瘤90%以上的上皮细胞癌浸润转移的一个重要途径。TGFβ[5]是一种多功能的细胞因子，在EMT中发挥重要的调节作用，TGFβ是最主要的信号通路之一。研究表明[6]TGFβ能够诱导子宫内膜癌细胞发生EMT。本研究中，在76例EA中TGFβ1阳性表达率为69.7%，在35例EIN中阳性表达率37.1%，两者比较差异具有显著性(P<0.05)。同样说明 TGFβ1在子宫内膜样腺癌发生发展及癌组织浸润中可能具有较为重要的作用。

软骨素硫酸盐蛋白聚糖Versican在多种恶性肿瘤中高表达，它在肿瘤中的作用是调节细胞的增殖、黏附、侵袭、迁移、血管生成，以及肿瘤浸润和转移[7]。本研究发现versican在子宫内膜样腺癌中表达较其癌前病变子宫内膜上皮内瘤变中明显增多，差异具有统计学意义。

本研究发现，在人的子宫内膜样腺癌中versican与TGFβ1的表达具有相关性，提示versican与TGFβ在子宫内膜样腺癌发生发展中可能存在相互作用。Gao等[8]研究发现，小鼠乳腺癌模型多功能蛋白聚糖介导的TGFβ途径阻滞可能会激发EMT，进而促进细胞增生，最终导致转移部位肿瘤迅速生长。与本研究结论相一致。

CTGF具有促血管形成、促有丝分裂等许多生理功能[9]。许多研究表明，CTGF的表达与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关。但在子宫内膜癌中有关CTGF报道很少，本研究发现CTGF主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞质及胞膜，间质细胞亦有表达，在76例EA中CTGF阳性表达率为65.8%，在35例EIN中阳性表达率37.1%，两者比较差异具有显著性(P<0.05)，说明CTGF与子宫内膜样腺癌的发生发展存在一定的关系。

TGFβ1是CTGF的上游调节介质，实验发现[10]CTGF蛋白、TGFβ1蛋白的阳性表达率在正常宫颈组织、CINII-Ⅲ组织、宫颈鳞癌组织中呈逐步递增的趋势，Spearman等级相关性分析发现二者在宫颈鳞癌中的表达呈正相关。本研究发现，TGFβ1与CTGF在子宫内膜样腺癌中蛋白表达具有相关性，说明两者在子宫内膜样腺癌中可能存在相同的关联性。

总之，EMT是上皮细胞癌浸润转移的一个重要途径。TGFβ是上皮间质转化的重要因子，与其相关的CTGF及versican两个因子，在子宫内膜样腺癌中蛋白表达存在较为明显的相关性，对子宫内膜样腺癌发生发展可能有着重要的意义。

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Expression and significance of Versican、CTGF、TGFβ1 in endometrioid adenocarcinoma and endometrial intraepithelial neoplasia

WANGFeng，SONGXiao-yan，HUYu-chong，etal.

(DepartmentofPathology,InnerMongoliaPeople’sHospital,Huhhot010017,China)

Objective To explore the expression and correlation of versican、connective tissue growth factor(CTGF)and transforming growth factor beta1(TGFβ1) in endometrioid adenocarcinoma and endometrial intraepithelial neoplasia.Methods The expression of vesican、CTGF and TGFβ1 was examined by Streptavidin-biotin peroxidase(SP) immunohistochemical method in 76 cases of endometrioid adenocarcinoma and 35 cases of endometrial intraepithelial neoplasia respectively.The results of versican、CTGF and TGFβ1 in endometrioid adenocarcinoma and endometrial intraepithelial neoplasia were analyzed with statistic package SPSS 13.0.Results Positive rate of versican、CTGF and TGFβ1 have significant difference between endometrioid adenocarcinoma and endometrial intraepithelial neoplasia.Positive rate of versican、CTGF and TGFβ1 was 75%、65.8% and 69.7% respectively significantly higber in endometrioid adenocarcinoma than in endometrial intraepithelial neoplasia respectively which was 42.9%，37.1%，37.1% respectively(P<0.05).The expression of versican was positively correlated with TGFβ1 in endometrioid adenocarcinoma(P<0.05).The expression of CTGF was positively correlated with TGFβ1 also in endometrioid adenocarcinoma(P<0.05).Conclusion The endometrial intraepithelial neoplasia was regarded as the precancerous lesion of endometrioid adenocarcinoma.The abnormal expression of versican、CTGF and TGFβ1 had obvious association with the pathogenesis of endometrioid adenocarcinoma.

endometrioid adenocarcinoma;endometrial intraepithelial neoplasia;versican;connective tissue growth factor;transforming growth factor beta1

内蒙古自治区人民医院院内基金普通项目(201419)

1007-4287(2016)10-1658-04

R737.33

A

2016-03-01)