玉夏胶囊质量标准研究

周娟娟　祁　俊　秦亚东

(1 安徽省芜湖市中医医院制剂室，芜湖，241000； 2 安徽中医药高等专科学校药学系，芜湖，241002)



玉夏胶囊质量标准研究

周娟娟1祁俊1秦亚东2

(1 安徽省芜湖市中医医院制剂室，芜湖，241000； 2 安徽中医药高等专科学校药学系，芜湖，241002)

目的：建立医疗机构制剂玉夏胶囊的质量控制标准。方法：采用薄层色谱(TLC)法对玉夏胶囊中防己、莱菔子进行定性鉴别研究；采用高效液相色谱(HPLC)法对玉夏胶囊中的粉防己碱和防己诺林碱进行定量研究。结果：薄层色谱中阴性样品均无干扰，专属性强；防己诺林碱在24～84 μg/mL范围内峰面积与浓度呈现良好的线性关系，r=0.9992，平均回收率为102.3%，RSD=2.57%；粉防己碱在34.5～207.0 μg/mL范围内峰面积与浓度呈现良好的线性关系，r=0.9999，平均回收率为102.3%，RSD=2.57%。结论：本实验建立的方法简便、快捷、准确、重现性好，可用于玉夏胶囊的质量控制。

玉夏胶囊；质量标准；薄层鉴别；防己诺林碱；粉防己碱

玉夏胶囊为2010年注册的医疗机构制剂，临床疗效确切。玉夏胶囊由莱菔子、防己、玉米须等中药组成，具有清肝泻火，化痰利湿之功，主要用于痰湿类证高血压病的治疗，症见胸闷气短、头昏眩晕、体胖倦怠等。本文作者结合处方组成并通过查阅相关文献对制剂中的防己、莱菔子进行了薄层鉴别研究，对防己中的粉防己碱和防己诺林碱进行了含量测定研究，建立了简单准确、稳定可靠的质量控制方法，从而为更好地控制玉夏胶囊的质量提供理论依据。

1　材料与方法

1.1材料Agilent 1200高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；XP-205电子分析天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)；薄层板均为青岛海洋化工厂生产的硅胶G薄层板(供TLC用)。样品由芜湖市中医医院制剂室生产(批号分别为：131113、131114、131115)；莱菔子对照药材购自中国食品药品检定研究院(批号：121074-201002)；粉防己碱对照品购自中国食品药品检定研究院(批号：110711-200708)；防己诺林碱对照品购自中国食品药品检定研究院(批号：110793-201002)。

1.2方法

1.2.1薄层鉴别

1.2.1.1防己[1]的鉴别取玉夏胶囊内容物约2 g，加入30 mL乙醇，加热回流1 h，放冷，滤过，将滤液蒸干，加入4 mL乙醇将残渣溶解，得到供试品溶液。取粉防己碱对照品适量，加入乙醇制成对照品溶液(浓度为1 mg/mL)制得粉防己碱对照溶液。另取除防己以外的其他各味药材按处方比例制得玉夏胶囊阴性样品，并称取约2 g的阴性样品，用与制备供试品溶液同一方法制得阴性对照液。分别吸取上述制得的三种溶液各5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-丙酮-甲醇(10∶6∶1∶1)为展开剂，用氨水饱和15 min，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液显色。

1.2.1.2莱菔子的鉴别取约1 g的玉夏胶囊内容物，加入30 mL乙醚，加热回流1 h，弃去乙醚液，将药渣挥干，加入20 mL甲醇，然后再加热回流1 h，放冷至室温，过滤，将滤液蒸干，所得残渣加入3 mL甲醇溶解，即得玉夏胶囊供试品溶液。取约1 g的莱菔子对照药材，加入30 mL水煎煮1 h，滤过，滤液用乙醚提取2次，20 mL/次，弃去乙醚液，将水溶液蒸干，残渣加入1 mL甲醇使其溶解，即得到莱菔子对照药材溶液。取除莱菔子以外的其他各味药材按处方比例制得的阴性样品，并称取约1 g的莱菔子阴性制剂，用与制备供试品溶液同一方法制得阴性对照液。在同一硅胶G薄层板上，分别吸取上述制得的三种溶液各5 μL进行点样，用乙酸乙酯-甲酸-水(10∶2∶3)的上层溶液进行展开，展开后取出晾干，置碘蒸气中显色。

1.2.2含量测定

1.2.2.1色谱条件色谱柱：Agilent Eclpise plus C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相：乙腈∶0.15%三乙胺水溶液=55∶45；柱温：30 ℃：流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm。

1.2.2.2对照品溶液的制备分别精密称取适量的粉防己碱和防己诺林碱对照品，然后加入甲醇制得每1 mL含粉防己碱60 μg、防己诺林碱40 μg的混合溶液。

1.2.2.3样品溶液的制备精密称取约1 g玉夏胶囊内容物，置具塞锥形瓶中，精密加入50 mL 0.5%三乙胺甲醇溶液，密塞，称定重量，超声处理(功率350 W，频率40 kHz)30 min，放冷至室温，再称定锥形瓶重量，并对其减失的重量用0.5%三乙胺甲醇溶液进行补足，然后摇匀、过滤，精密量取1 mL续滤液，放置10 mL的量瓶中，加流动相至刻度。

1.2.2.4空白对照试验取除防己以外的其他味饮片，按照玉夏胶囊相同的制备工艺制得缺味防己阴性制剂，按“1.1.2.2.3”项下方法制成空白对照样品溶液。进样体积为10 μL。

1.2.2.5线性关系考察取适量防己诺林碱和粉防己碱对照品加入甲醇分别制成各自系列浓度对照品溶液。防己诺林碱为：24、36、48、60、72、84 μg/mL；粉防己碱为：34.5、69、103.5、138、172.5、207 μg/mL。按照“1.2.2.1”项下的色谱条件进行进样，进样体积均为10 μL。记录各对应的峰面积。

1.2.2.6精密度试验取批号为131113的玉夏胶囊样品溶液，按“1.2.2.1”项下的色谱条件进行检测，连续6次自动进样，记录相应的峰面积。

1.2.2.7稳定性试验取批号为131113的玉夏胶囊样品溶液，分别于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h进行进样，记录相应的峰面积。

1.2.2.8重复性试验精密称取批号为131113的玉夏胶囊样品共5份，按“1.2.2.3”项下方法对样品进行处理，在“1.2.2.1”项色谱条件下进行含量测定，分别计算样品中防己诺林碱及粉防己碱的含量。

1.2.2.9加样回收率试验取约1 g玉夏胶囊，精密称定6份，分别精密加入适量防己诺林碱及粉防己碱对照品，置具塞锥形瓶中，其余按照“1.2.2.3”项下样品溶液的制备方法制得玉夏胶囊供试品溶液。将各份样品溶液分别在“1.2.2.1”项色谱条件下进行含量测定。

1.2.2.10样品测定精密称取三批样品内容物(批号分别为131113、131114、131115)约1 g，按“1.2.2.3”项下样品溶液的制备方法，制成玉夏胶囊样品溶液。按“1.2.2.1”项下的色谱条件对各批玉夏胶囊样品进行含量测定，分别计算各样品中防己诺林碱和粉防己碱的含量。

2　结果

2.1薄层鉴别

2.1.1防己的鉴别由薄层色谱图1可知，样品在与粉防己碱对照品色谱相应的位置上，具有相同颜色的斑点，但是阴性对照液并无此斑点。

2.1.2莱菔子的鉴别由薄层色谱图2可知，样品在与莱菔子对照药材色谱相应的位置上，具有相同颜色的斑点，但是阴性对照液并无此斑点。

图1　防己薄层色谱图　　图2　莱菔子薄层色谱图

注：1粉防己碱对照品2样品3阴性注：1莱菔子对照药材2样品3阴性

2.2含量测定

2.2.1空白对照试验由图3可知在与防己诺林碱(约9.9 min)和粉防己碱(约17.7 min)相同的色谱峰位置上没有假阳性峰出现，可见空白无干扰，选取该指标专属性强。

图3　玉夏样品色谱图

注：(A防己诺林碱B粉防己碱C样品D阴性样品)

2.2.2线性关系考察以峰面积为纵坐标(Y)，相应进样浓度为横坐标(X)，绘制标准曲线。防己诺林碱的回归方程Y=6.2191X+8.121，r=0.9992，结果表明防己诺林碱在24～84 μg/mL范围内线性关系良好；粉防己碱的回归方程Y=6.0332X+3.24，r=0.9999，结果表明粉防己碱在34.5～207 μg/mL范围内线性关系良好。

2.2.3精密度试验防己诺林碱RSD=0.88%；粉防己碱RSD=0.07%，结果表明该方法精确度高，符合要求。

2.2.4稳定性试验防己诺林碱RSD=2.57%，粉防己碱RSD=0.29%,结果表明玉夏胶囊样品溶液在10 h内稳定性保持良好。

2.2.5重复性试验防己诺林碱RSD=1.21%；粉防己碱RSD=0.2%，结果表明该方法重复性好，符合要求。

2.2.6加样回收率试验结果表明防己诺林碱和粉防己碱在本实验条件下，加样回收率良好，符合测定要求。详细结果分别见表1和表2。

表1　防己诺林碱加样回收实验结果

表2　粉防己碱加样回收实验结果

2.2.7样品测定三批玉夏胶囊样品含量测定结果见表3。

表3　防己诺林碱及粉防己碱的含量

3　讨论

玉夏胶囊组方中玉米须与防己为君药。玉米须主要成分为脂肪油、挥发油、树胶样物质等[2]，1977版中国药典[3]中收纳了玉米须，但至1985版中国药典起删除了此味药材，未查阅到对其进行含量测定的报道。防己主要成分为生物碱[4-8]，其明显的降压作用[9-13]现已得到认同。所以本方选择测定防己中的粉防己碱和防己诺林碱含量来控制玉夏胶囊的质量。

在色谱条件的选择上，药典采用的方法为乙腈-甲醇-水-冰醋酸(40∶30∶30∶1)(每100 mL含十二烷基磺酸钠0.41 g)，此条件使用盐类极易堵塞损伤色谱柱及高效液相色谱仪所以未考虑使用。通过查阅相关文献[14-19]并对色谱条件进行反复比较研究最终确定的流动相条件为乙腈-0.15%三乙胺溶液(55∶45)。此色谱条件下峰型好，分离度高，条件稳定可靠，能够满足含量测定的要求。

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(2015-03-19收稿责任编辑：张文婷)

Research of Quality Standard of Yuxia Capsule

Zhou Juanjuan1, Qi Jun1, Qin Yadong2

(1 Anhui Wuhu hospital of Traditional Chinese Medicine, Wuhu 241000, China；2AnhuiHigherInstituteofTraditionalChineseMedicine,Wuhu241002,China)

Objective:To establish the quality standard of Yuxia capsules. Methods: Radix stephaniae tetrandrae(Fang Ji)and Radish Seed(Laifuzi) were identified by TLC and the contents of Tetrandrine and Fangchinoline were detremined by HPLC. Results: The TLC chromatography was exclusive and the blank test showed no interference. The detremination of fangchinoline kept good linear relation in the content ranges of 24～84 μg/mL r =0.9992. The average recovery test of fangchinoline was 102.3%, RSD=2.57%.The detremination of tetrandrine kept good linear relation in the content ranges of 34.5～207.0 μg/mL, r =0.9999. The average recovery test of tetrandrine was 102.3%, RSD=2.57%. Conclusion:The established qualitative methods are simple, fast, accurate and with good reproducibility which can be used for the quality control of Yuxia capsules.

Yuxia capsule; Quality standards; TLC; Fangchinoline; Tetrandrine

安徽省芜湖市科技计划2009年度科技项目(编号:卫生5—1)

周娟娟(1984—)，女，江苏，芜湖市中医医院主管中药师，硕士，主要研究方向：中药新药研究，E-mail:nzyzjj@163.com

R284.1

A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2016.01.040