甲状腺乳头状癌组织中Ki-67表达及其临床病理意义

李鸿涛， 单美慧， 罗　琳， 马斌林

(新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科, 乌鲁木齐　830011)



甲状腺乳头状癌组织中Ki-67表达及其临床病理意义

李鸿涛， 单美慧， 罗琳， 马斌林

(新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科, 乌鲁木齐830011)

目的探讨甲状腺乳头状癌组织中增殖抗原-67(Ki-67)的表达水平及其与临床病理因素之间的关系。方法完整收集甲状腺临床病理资料共计545例；其中甲状腺乳头状癌275例，甲状腺良性肿瘤270例，使用免疫组织化学SP法检测甲状腺癌中Ki-67的表达情况，并对临床病理结果进行对比分析。结果甲状腺乳头状癌、甲状腺良性肿瘤Ki-67阳性表达率分别为91.27%(251/275)、44.07%(119/270)，癌灶与良性肿瘤相比，Ki-67表达明显增高(χ2=220.28，P=0.00)；多灶性甲状腺癌与单病灶Ki-67表达阳性率分别为(96.03%和71.83%)，多灶性甲状腺乳头状癌Ki-67表达水平明显增高(χ2=45.05，P=0.00)；淋巴结转移者和未转移者Ki-67表达阳性率分别为81.20%(108/133)、47.18%(67/142)，其中有淋巴结转移者Ki-67表达水平明显增高(χ2=36.90，P=0.00)，CD56阳性与阴性患者Ki-67表达阳性率分别为76.09%(70/92)、59.44%(107/180)，其中CD56阳性组Ki67表达水平明显增高(χ2=13.05，P=0.01)。结论Ki-67蛋白在甲状腺癌中表达明显增高，其阳性表达与多灶性甲状腺癌、淋巴结转移及CD56阳性表达有关，提示Ki-67阳性表达对甲状腺癌侵袭性和淋巴结转移有一定预测意义。

增殖抗原-67； 甲状腺癌； 免疫组化

自20世纪90年代以来，甲状腺癌发病率稳步上升，据统计，现已上升为女性恶性肿瘤第二位。甲状腺癌与环境、局部放射、饮食、精神心理、经济条件等均有不同程度的关系，尤其是<1 cm的甲状腺微小癌发病更是升高明显。近年来针对甲状腺癌在基因及蛋白水平深入研究更多。增殖抗原-67(Ki-67)参与多种恶性肿瘤细胞的增殖与侵袭，其蛋白表达在甲状腺癌、乳腺癌中表达明显增高，总结新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科近年来275例甲状腺癌患者的临床病理资料，就Ki-6蛋白在545例甲状腺病例中表达情况做回顾性分析，探讨Ki-67与甲癌侵袭、转移之间的关系。

1　材料与方法

1.1标本收集收集2011年6月-2016年4月就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科并均行外科手术治疗的甲状腺疾病患者石蜡切片共计545例。甲状腺癌275例，其中女性209例，男性66例；<45岁144例，≥45岁131例；汉族224例，维吾尔族36例，哈萨克族7例，回族9例；病理类型均为甲状腺乳头状癌。甲状腺良性肿瘤270例，其中女性225例，男性45例；所有病例均均未接受术前放、化疗、内分泌治疗，无其他恶性肿瘤史。所有标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋切片并经2位副高职称病理科医师确认诊断。

1.2免疫组化染色及结果判读标准使用免疫组化SP法对所有切片行Ki-67染色标记，Ki-67抗体购自中杉金桥技术有限公司，兔抗人单克隆抗体，稀释度为1∶100。Ki-67蛋白阳性表达部位均为细胞核，判读结果均经2位副高级职称病理科医师确认，均按照阳性细胞百分比计分和染色强度计分的乘积作为最后计分。

1.3统计学处理使用SPSS17.0统计软件进行统计学分析，计数资料及等级资料采用χ2检验，并计算阳性表达率，检验水准α=0.05。

2　结果

2.1甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤组织中Ki-67表达情况Ki-67阳性染色位于细胞核，甲状腺癌与良性肿瘤相比，Ki-67表达明显增高(χ2=220.28，P=0.00)，Ki-67在良性肿瘤中仅有4例为强阳性表达，在恶性肿瘤中普遍为++～+++表达，甲状腺癌与良性肿瘤组织中Ki-67阳性表达率分别为91.27%(251/275)、44.07%(119/270)，见表1。

表1　甲状腺癌与良性肿瘤中Ki-67表达情况

2.2甲状腺癌组织中Ki-67蛋白表达与临床病理因素的关系101例多灶性甲状腺癌患者中，Ki-67阳性表达率为96.03%(97/101)，单病灶甲癌Ki-67阳性表达率为71.83%(125/174)，多灶性甲癌患者较单病灶者Ki-67蛋白表达明显增高(χ2=45.05，P=0.00)；有淋巴结转移者和未转移者Ki-67阳性表达率分别为81.20%(108/133)、47.18%(67/142)，有淋巴结转移者Ki-67表达水平明显增高(χ2=36.90，P=0.00)；CD56阳性与阴性者Ki-67表达阳性率分别为76.09%(70/92)、59.44%(107/180)，CD56阳性者Ki67表达水平明显增高(χ2=13.05，P=0.01)，Ki-67表达与年龄、肿瘤大小、微小癌与否、包膜是否受侵、CK19、Galetin表达、HBME等因素无明显相关性,见表2。

3　讨论

甲状腺乳头状癌是甲状腺恶性肿瘤中最常见的病理类型，但其具有淋巴结转移率高、转移时间早的特点。Ki-67是多种恶性肿瘤细胞研究的热点抗原蛋白，参与多种恶性肿瘤的分化、浸润及转移,检测Ki-67的阳性表达，可探知恶性肿瘤细胞的增殖活性[1]。本研究显示有淋巴结转移的甲状腺肿瘤Ki-67蛋白表达率明显增高(81.20% vs 47.18%，P=0.00)；淋巴结转移的133例患者中，80例患者Ki67蛋白呈中-强阳性表达，占61.05%，仅有25例患者为阴性表达，表达率为18.80%；在142例淋巴结阴性者中，中-强阳性表达率为37.59%，阴性表达率为

表2　乳头状甲状腺癌组织中Ki-67表达与临床病理因素关系

52.82%，差异有统计学意义(P=0.00)，提示乳头状癌Ki-67表达明显增加，尤其是当中-强阳染色时，可推测淋巴结转移发生概率高。Xu等[2]指出，中央区淋巴结转移危险性增高与男性、肿瘤直径>5 mm、多灶等多种因素相关；Miyauchi等[3]对390例乳头状癌Ki-67表达指数分析：N1b较N0或N1a组相比可见，Ki-67强阳性表达分别为22例和8例(P=0.01)，说明Ki-67蛋白阳性表达潜在参与乳头状癌的淋巴结转移进展；Jeong等[4]指出，当肿瘤直径≥0.3 cm时，甲状腺癌中淋巴结转移率高达79.00%，多因素分析结果显示，Ki-67表达与肿瘤大小、是否存在远处转移等因素相关。与本研究结果类似：淋巴结转移个数越多，Ki-67中-强阳性表达率更高，而在良性肿瘤患者中尚未发现此特点，提示Ki-67表达率较高时，需考虑淋巴结转移、甚至是微转移的可能性。

甲状腺乳头状癌分化程度较好，但多灶性癌多见，局部转移发生率高，尤其对于伴有甲状腺炎的患者[5]。本研究显示101例多灶性乳头状癌Ki-67阳性表达率为96.03%，中-强阳性表达构成比为77.23%，仅4例为阴性表达(3.96%)；而174例单一病灶患者中，Ki-67阳性表达率为71.83%，Ki-67蛋白多以阴-弱阳性表达为主(59.77%)，49例为阴性表达(28.16%)，两者比较差异有统计学意义(P=0.00)；单志东等[6]对1 616例乳头状甲状腺癌进行临床病理因素分析可见：多灶性乳头状癌(MPTC)发病率呈逐年上升趋势，并且具有易出现淋巴结转移、包膜受侵、腺体外浸润的特点。本研究与其结果类似，提示多灶性乳头状癌较单一病灶者预后不良，复发危险因素多，复发及转移可能性大。Huang等[7]对686例多灶性癌患者病例分析显示多灶性癌患者具有恶性程度高、分化差异大的特点，应采取更加积极的临床治疗原则。本研究发现，多灶性甲状腺乳头状癌具有男性病例多、肿瘤直径大等特点，与Mcleod等[8]的研究结果相似。 CD56在甲状腺癌中表达缺失是鉴别良、恶性病变的重要指标之一[9]，其在良性病变中多为阳性表达。本研究结果显示，乳头状癌组织中CD56阴性表达率为76.09%，阳性表达率为59.40%，差异有统计学意义(P=0.01)，与Mozhgan等[10]的研究结果相似。

综上所述，Ki-67在甲状腺乳头状癌组织中阳性表达具有一定特异性，尤其是在淋巴结阳性、多灶性癌中。Ki-67表达水平是指导治疗、判断预后的重要指标，是恶性肿瘤细胞增殖活性强的重要标志；本研究通过对545例甲状腺病例分析尚未发现Ki-67与性别、年龄、肿瘤大小、微小癌与否、包膜受侵等因素有关，这可能与病例选择偏倚有关；增殖抗原Ki-67在某些良性病变也存在阳性表达，因此要求临床医师在临床工作中应正确、客观地应用这些指标作为参考，从而避免假阴性、假阳性的出现，提高诊断正确性。

[1]Inwald EC, Klinkhammer-Schalke M, Hofstädter F, et al. Ki-67 is a prognostic parameter in breast cancer patients: results of a large population-based cohort of a cancer registry[J]. Breast Cancer Res Treat,2013,139(2):539-552.

[2]Xu D, Lv X, Wang S, et al. Risk factors for predicting central lymph node metastasis in papillary thyroid microcarcinoma[J]. Int J Clin Exp Pathol,2014,7(9):6199-6205.

[3]Miyauchi A，Kudo T， Hirokawa M,et al. Ki-67 labeling index is a predictor of postoperative persistent disease and cancer growth and a prognostic indicator in papillary thyroid carcinoma[J]. Eur Thyroid J,2013,2(1):57-64.

[4]Jeong JJ， Lee YS， Lee SC， et al. A scoring system for prediction of lateral neck node metastasis from papillary thyroid cancer[J]. J Korean Med Sci,2011, 26(8): 996-1000.

[5]Konturek A, Barczyński M, Nowak W, et al. Risk of lymph node metastases in multifocal papillary thyroid cancer associatedwith Hashimoto′s thyroiditis[J].Langenbecks Arch Surg,2014,399(2): 229-236.

[6]单志东，巩鹏.多灶性甲状腺乳头状癌的构成比变化与临床分析[D].大连:大连医科大学,2012.

[7]Huang Gm, Tian XF, Li YH, et al.Clinical characteristics and surgical resection of multifocal papillary thyroid carcinoma: 168 cases[J]. Int J Clin Exp Med,2014,7(12):5802-5807.

[8]Mcleod DS， Cooper DS， Ladenson PW， et al. Prognosis of differentiated thyroid cancer in relation to serum thyrotropin and thyroglobulin antibody status at time of diagnosis[J].Thyroid，2014,24(1):35-42.

[9]Mcfadden DG, Diassantagata D, Sadow PM, et al. Identification of oncogenic mutations and gene fusions in the follicular variant of papillary thyroid carcinoma[J].J Clin Endocrinol Metab,2014 ,99(11):2457-2462.

[10]Mozhgan M, Mehdi E,Reza T,et al.Absent CD56 expression in papillary thyroid carcinoma: A finding of potential diagnostic value in problematic cases of thyroid pathology[J]. J Res Med Sci，2013,18(12):1046-1050.

(本文编辑周芳)

Expression of Ki-67 in papillary thyroid carcinoma and its relationship with clinical pathological factors

LI Hongtao, DAN Meihui, LUO Lin, MA Binlin

(DepartmentofBreastandNeck,AffiliatedTumorHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China)

ObjectiveTo investigate the expression of Proliferating Antigen-67 (Ki-67) in papillary thyroid carcinoma and its relationship with clinical pathological factors. MethodsClinical pathological data of 545 cases were collected, including 275 cases of thyroid carcinoma, 270 cases of benign tumors of the thyroid gland. The expression of Ki-67 in thyroid carcinoma was detected by immunohistochemical SP, and the clinical pathological results were compared and analyzed. ResultsKi-67 positive expression rates in papillary thyroid carcinoma and benign thyroid tumor were 91.27% (251/275), 44.07% (119/270), respectively. Compared with benign tumor, the expression of Ki-67 in cancer group increased significantly (χ2=220.28, P=0.00); Ki-67 expression positive rates in multifocal thyroid carcinoma group and single lesion group were 96.03% and 71.83%, respectively. And the expression level of Ki-67 in focal papillary thyroid carcinoma group increased significantly (χ2=45.05, P=0.00); The positive expression rate of Ki-67 in lymph node metastasis group and non metastasis were 81.20% (108/133), 47.18% (67/142), respectively. And the expression level of Ki-67 in lymph node metastasis group increased significantly (χ2=36.90, P=0.00). The positive expression rates of Ki-67 in CD56 positive and CD56 negative group were 76.09% (70/92), 59.44% (107/180), respectively. The expression level of Ki67 in CD56positive group was significantly higher (χ2=13.05, P=0.01). ConclusionThe expression of Ki-67 protein in thyroid cancer was significantly increased. What's more, the positive expression of Ki-67 was related to the multiple foci of thyroid cancer, lymph node metastasis and CD56 positive expression, which suggests that the positive expression of Ki-67 has certain significance in the prediction of thyroid cancer invasion and lymph node metastasis.

Antigen-67； Thyroid carcinoma； Immunohistochemistry

新疆维吾尔自治区自然科学基金(2012211A046)

李鸿涛(1976-)，男，硕士，副主任医师，研究方向：乳腺头颈肿瘤。

马斌林，男，教授，主任医师，研究方向：乳腺头颈肿瘤，E-mail：mbldoctor@126.com。

R736.1

A

1009-5551(2016)10-1291-04

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.10.019

2016-07-04]