极限浸提法分析测定微孔多聚糖中环氧氯丙烷残留

徐小慧，余妙琴

（1.杭州协合医疗用品有限公司，浙江杭州310018；2.义乌市产品质量监督研究院，浙江义乌322000）

极限浸提法分析测定微孔多聚糖中环氧氯丙烷残留

徐小慧1，余妙琴2

（1.杭州协合医疗用品有限公司，浙江杭州310018；2.义乌市产品质量监督研究院，浙江义乌322000）

建立了一种微孔多聚糖中环氧氯丙烷残留的检测方法-极限浸提法，优化了实验条件。选择浸提溶剂为二氯甲烷，浸提时间为30m in，浸提溶剂体积为3.0mL，满足方法检出限及回收率的要求，含量在0.15～0.75μg·mL-1，线性方程A=1162C+24.5，r=0.9993，检出限0.1μg·mL-1，RSD=4.7%（n=10）。对比了直接溶剂极限浸提和热极限浸提方法对微孔多聚糖中环氧氯丙烷残留测定的优缺点，结果表明直接溶剂浸提法具有方法简单、检出限低和回收率高的优点，可行性高。

极限浸提法；气相色谱法；环氧氯丙烷；微孔多聚糖

微孔多聚糖［1］（Microporouspolysaccharidehemispheres，MPH）是一种新型止血材料，具有良好的生物相容性，无毒副作用，主要用于人体的局部止血。其主要通过分子交联合成一种的交联微球，环氧氯丙烷为其中一种广泛使用的交联剂，反应最终产物中残存的环氧氯丙烷具有毒性和麻醉性，会严重影响病者的身体健康。根据美国药典（2011）对残留溶剂的限度计算方法和国内外对环氧氯丙烷的毒性试验结果，综合分析规定环氧氯丙烷残留在MPH中的安全限度为1×10-6，但国内外对环氧氯丙烷残留的测定报道甚少，张莉［2］等人采用CS2作萃取剂，再用气相色谱法测定，该方法实际分析存在检出限无法达到环氧氯丙烷的安全限度，分离度不高，且CS2为极易挥发的溶剂，不易操作。

极限浸提法是常用的残留溶剂测定方法［3］，目的是能测定样品上全部目标物的残留量，包括直接溶剂极限浸提和热极限浸提。本文优化实验条件，建立了一种新的极限浸提法用于微孔多聚糖中环氧氯丙烷残留的分析测定，方法简单，回收率高。

1　实验部分

1.1仪器及设备

气相色谱仪（岛津2010plus）；氢火焰离子化检测器（FID）；色谱柱DB-WAX（30m×0.32mm× 0.5μm）。环氧氯丙烷（色谱纯，西陇化工）、CS2（A. R.西陇化工）；二氯甲烷（G.R.TEDIA）；甲醇（G.R.阿拉丁）；丙酮（G.R.TEDIA）

1.2色谱条件

进样口温度：210℃，分流比10∶1，柱温：初始温度50℃，5℃·min-1升至90℃，保持0min，20℃· min-1升至210℃，保持0min；检测器：温度250℃；进样量：3.0μL。

2　结果及讨论

2.1直接溶剂浸提法

取可吸收止血微球若干，加入浸提溶剂若干，振摇若干次，萃取若干分钟，振摇均匀经0.45μm滤膜过滤，滤液作为供试液。气相色谱-FID法直接进样分析测定。

2.1.1浸提溶剂的选择选择浸提试剂甲醇、丙酮、CS2和二氯甲烷对样品中环氧氯丙烷残留进行萃取分析。实验结果表明：其中甲醇、丙酮和CS2浸提后，直接进样分析，供试液溶剂峰较大，目标物峰面积较小，且溶剂峰在其峰肩，分离度较小，不能满足要求；采用二氯甲烷浸提，浸提液直接进样分析，分离度好（大于1.5），回收率高（大于90%），故选择二氯甲烷作为浸提溶剂。

表1　浸提溶剂的选择Tab.1 Selection of extraction solvent

2.1.2浸提溶剂体积选择可吸收止血微球为粉末状颗粒物，容易吸收液体，浸提过程中溶剂用量过低不能完全润湿颗粒或导致浸提不彻底，用量过大则可能残留物被稀释倍数太高、浓度过低而未能被测的，因此，需要选择合适的浸提液体积。

选用二氯甲烷为浸提溶剂，以标准溶液加标法，浸提溶剂体积分别为1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0mL，计算回收率，结果如下：

图1　溶剂浸提体积选择Fig.1 Selection of extraction solvent volume

2.1.3浸提时间选用二氯甲烷为浸提溶剂，体积3.0m L，以标准溶液加标法，按方法进行操作，测试浸提时间为5，10，20，30，40，50，60min后浸提液中目标物质的回收率，结果如下：

图2　浸提时间的选择Fig.2 Selection of extraction time

综上可见，称取样品1.0g，浸提时间为30min，二氯甲烷浸提溶剂体积为3.0mL，回收率为98.2%，达到最大。

2.2热极限浸提法

参考GB/T16886.7［3］和GB/T14233.1-2008［4］均是以水为溶剂的提取环氧乙烷的热极限浸提法，取可吸收止血微球1g，加环氧氯丙烷标准品适量，再加二氯甲烷3mL。热极限浸提法在60℃±1℃浸提40min，冷却后取滤液测定。结果表明热极限浸提法和直接溶剂浸提法的平均回收率为98.5%和98.0%，两者偏差小于＜5%，因热极限浸提法操作过程繁琐且二氯甲烷沸点较低造成顶空瓶压力过大，故采用直接溶剂浸提法。

2.3线性方程和相关系数

用二氯甲烷将环氧氯丙烷标准使用液稀释成0.15、0.3、0.45、0.6、0.75μg·mL-1，以峰面积A为纵坐标，相应质量浓度C（μg·mL-1）为横坐标作工作曲线，其回归方程、相关系数、线性范围为：A=1162C +24.5，r=0.9993，RSD=4.7（n=10）。

2.4样品分析

取不同批次的样品MPH1.0g，按最佳实验条件浸提，浸提液经0.45μm有机滤膜过滤，气相色谱-FID法直接进样分析样品中残留的环氧氯丙烷量。

表2　实际样品分析结果Tab.2 Analysis results of samples

3　结论

直接溶剂浸提法最佳实验条件为：浸提溶剂为二氯甲烷，浸提体积3.0mL，浸提时间30min，最终回收率可达90%以上，检出限为0.1μg·mL-1，且RSD≤10%。对比直接溶剂浸提和热极限浸提法，两种方法回收率接近（小于5%），直接溶剂浸提-气相色谱分析法具有实验操作简便，方法回收率高，检出限低的优点，为环氧氯丙烷残留的测定提供新的可行的检测方法。

［1］孙伟庆，夏尧远.MPH止血微球的制备及其结构表征［J］.医疗器械，2015，01（b）：145-146.

［2］张莉，姜晓路，李家忠.气相色谱法分析微孔多糖止血颗粒中残存的环氧氯丙烷［J］.化学工程师，2008，148（1）：28-29.

［3］医疗器械生物学评价环氧乙烷灭菌残留量GB/T16886.7.

［4］医用输液、输血、注射器具检验方法第1部分：化学分析方法GB/T14233.1-2008.

Analysis and determ ination of residual of epichlorohydrin inm icroporous polysaccharide hem ispheres by extreme extraction method

XU Xiao-hui1，YUMiao-qin2
（1.Hangzhou Xiehe Medical Supp lies Co.，Ltd.，Hangzhou 310018，China；2.Yiwu Production Quality Supervision Institute，Yiwu 322000，China）

A method for analysis and determ ination of residual of epichlorohydrin in microporous polysaccharide hemispheres--extreme extractionmethod was established.The experimental conditionswere optimized.The extraction solventwas carrene，the extraction time is 30min，and the extraction solvent volume is 3.0mL.The conditionsmeet the demands of detection limitand recovery.The content is 0.15～0.75μg·mL-1.The linear equation is A=1162C+24.5，r=0.9993，the detection lim it 0.1μg·mL-1，and RSD=4.7%（n=10）.The twomethods of direct extreme extraction and hot extreme extraction were contrasted；the results showed that direct extreme extraction method was simple，low detection limit and high recovery and more feasible.

extreme extraction method；chromatography of gases；epichlorohydrin；microporous polysaccharide hemispheres

R318.08

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20160239

2015-10-21

徐小慧（1984-），女，硕士，工程师，主要从事分化学领域的研究。