HBsAg阳性产妇血清HBV-DNA水平与新生儿HBV感染的关系*

鲍丽雅, 朱　双, 谢　渊

(1.贵州医科大学附院 肝炎实验室， 贵州 贵阳　550004; 2.贵州省习水县中医院， 贵州 习水　564600; 3.贵州医科大学 分子生物学重点实验室， 贵州 贵阳　550001)



HBsAg阳性产妇血清HBV-DNA水平与新生儿HBV感染的关系*

鲍丽雅1, 朱双2, 谢渊3**

(1.贵州医科大学附院 肝炎实验室， 贵州 贵阳550004; 2.贵州省习水县中医院， 贵州 习水564600; 3.贵州医科大学 分子生物学重点实验室， 贵州 贵阳550001)

目的： 探讨乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性产妇血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)水平与新生儿乙型肝炎病毒(HBV)感染的关系。方法： 采集67例HBsAg阳性产妇分娩前的外周静脉血及其分娩的67例新生儿脐血，用时间分辨免疫荧光法检测乙肝5项指标，实时荧光定量PCR法检测产妇血清HBV-DNA含量，记录e抗原阳性组和e抗原阴性组HBsAg阳性的产妇例数及脐血阳性的新生儿数，计算HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率；记录HBV-DNA低水平组(拷贝数<106IU/L)、HBV-DNA中水平组(拷贝数为106～108IU/L)和HBV-DNA高水平组(拷贝数≥109IU/L)中HBsAg阳性的产妇例数和脐血阳性的新生儿数，比较HBV-DNA高、中、低水平组中的母婴HBV传播率。结果： 67例HBsAg阳性产妇的新生儿脐血中HBsAg阳性24例，母婴传播率为35.82%(24/67)， e抗原阳性组HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率(54.29%)高于e抗原阴性组产妇(15.639%)，差异有统计学意义(P<0.01，χ2=10.87)；不同水平HBV-DNA拷贝数HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率从高到低依次为高水平组、中水平组及低水平组，两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论： 产妇感染HBV可能引起母婴垂直传播，e抗原阳性及血清HBV-DNA含量高的产妇母婴HBV传播率高。

肝炎病毒，乙型； 肝炎表面抗原,乙型； 肝炎e抗原,乙型； 母婴传播； 产妇； 新生儿； 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸

我国是乙型肝炎病毒(hepatitis b virus, HBV)感染的高发区，乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)携带率高达15%，母婴传播是HBV传播的重要途径之一[1]。我国每年约有80万的乙肝患儿出生，这部分患儿可能会发展为慢性乙肝患者，最后发展为肝硬化或肝癌，严重影响患儿的身心健康，也给患儿家庭带来精神和经济负担[2]。本文通过对HBsAg阳性产妇血清及其新生儿脐血进行HBV血清标志物和乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)进行定量分析，报告如下。

1　材料与方法

1.1材料与试剂

在知情同意的原则下，采集2014年1月～12月在产科分娩的HBsAg阳性产妇分娩前24 h内的外周静脉血及分娩的新生儿脐血各67例，产妇平均(27.4±5.6)岁，平均孕周(38.7±2.1)周。HBsAg、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)以及乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)试剂盒购自广州达瑞抗体工程技术有限公司，乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)购自中山大学达安基因股份有限公司。

1.2方法

1.2.1乙肝5项指标检测采用时间分辨免疫荧光法，使用PerinElmer公司的全自动AutoDELFIA1235型时间分辨荧光检测仪检测乙型肝炎血清学5项指标：HBsAg、HBsAb、 HBeAg、HBeAb及HBcAb，按说明书进行操作并判断结果。

1.2.2HBV-DNA检测采用荧光定量PCR法，常规法提取血清DNA，在ABI Prism 7500型实时荧光定量 PCR仪进行PCR扩增和结果分析，反应条件为93 ℃ 2 min， 93 ℃ 45 s、 55 ℃ 1 min，共10次循环；然后再93 ℃ 30 s 、 55 ℃ 45 s循环30次；采用仪器自带软件计算并判断结果。

1.3观察指标

记录e抗原阳性组[血清中HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb (+)/(-)]和e抗原阴性组[(HBsAg(+)、HBeAb(+)/(-)、HBcAb (+)]的HBsAg阳性产妇例数及脐血阳性的新生儿数，计算HBsAg阳性产妇的母婴传播率，比较e抗原阳性组和e抗原阴性组的母婴HBV传播率；记录HBsAg阳性产妇HBV-DNA低水平组(拷贝数<106IU/L)、HBV-DNA中水平组(拷贝数为106～108IU/L)和HBV-DNA高水平组(拷贝数≥109IU/L)的例数及脐血阳性的新生儿数，比较3组的母婴HBV传播率。

1.4统计学方法

数据采用SPSS 17.0软件分析，计数资料用百分比或率表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2.1HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率

67例HBsAg阳性产妇的新生儿脐血HBsAg阳性24例，母婴传播率为35.82%(24/67)， e抗原阳性组HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率高于e抗原阴性组产妇，差异有统计学意义(P<0.01，χ2=10.87)；见表1。

2.2不同水平HBV-DNA拷贝数HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率

不同水平HBV-DNA拷贝数HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率从高到低依次为高水平组、中水平组及低水平组，两两比较，差异有统计学意义(P<0.05)；见表2。

表1　HBsAg (+)产妇e抗原阳性组和e抗原阴性组母婴HBV传播率比较

(1)e抗原阳性组比较，P<0.01

表2　HBV-DNA高、中、低水平组的母婴HBV传播率比较

(1)与HBV-DNA低水平组比较，P<0.05；(2)与HBV-DNA中水平组比较，P<0.05

3　讨论

HBV病毒是专一的嗜肝病毒，由其引起的乙肝是严重威胁人类健康的传染病之一，与肝硬化、肝癌的发生发展关系密切[3]。乙型肝炎主要通过血液、母婴垂直传播和性传播，其中母婴垂直传播占70%以上[4]。HBV病毒在母婴之间的传播主要有胎盘感染，分娩时胎儿接触母亲血液和羊水感染及产后通过母婴亲密接触感染。宫内感染是HBV病毒母婴之间传播的主要途径， HBV是否发生母婴传播取决于产妇感染HBV病毒的状态[5-7 ]。产妇外周血清中抗-HBc可于妊娠21周后经胎盘主动运转至胎儿， 8月龄以下的婴儿出现单抗-HBc阳性，不能认为是HBV感染[8]。自1971年KEY 等[9]首次报道脐血中检出HBsAg以来，HBsAg一直作为诊断HBV病毒垂直感染的指标。血清HBeAg阳性是HBV感染慢性化和预后不良的标志，HBeAg 作为一种小分子水溶性多肽，它比 HBsAg 更容易通过胎盘屏障[10]；此外，HBeAg 的存在代表 HBV 病毒复制增强，HBV-DNA拷贝数高、传染性强、胎儿感染几率高，并且结合状态的 HBeAg 还可通过胎盘上的IgG受体转运进入胎儿血液，干扰胎儿免疫细胞识别和杀伤病毒，影响特异性抗体的产生，从而无法清除母体的 HBV 病毒，导致胎儿的HBV慢性携带状态[11]。本文以脐血检出HBsAg为垂直感染指标，发现67例HBsAg(+)产妇所生新生儿脐血HBsAg(+)24例，母婴HBV传播率为35.82%(24/67)， e抗原阳性组的母婴HBV传播率高于e抗原阴性组(P<0.01)，验证了HBeAg 阳性是母婴垂直传播的主要危险因素。

HBV-DNA 检测主要是用来判断人体内存在HBV病毒的多少和传染程度，是衡量病毒复制和传染性的最可靠的指标[12-13]。临床上一般以HBV-DNA含量≥106IU/L作为阳性统计结果，如果检测值大于该值，提示有HBV病毒复制和有传染性，HBV-DNA越高表示病毒复制越活跃，传染性越强。有研究表明, HBV母婴传播率随产妇血清HBV-DNA测定值增高而上升[14]。本研究显示，不同水平HBV-DNA拷贝数HBsAg阳性产妇的母婴HBV传播率从高到低依次为高水平组、中水平组及低水平组，两两比较差异有统计学意义(P<0.05)；表明胎儿垂直感染率随产妇血中HBV-DNA含量增高而呈上升的趋势，产妇血中HBV-DNA含量高低是母婴传播的重要因素。

综上，HBV母婴垂直传播率极高，对育龄妇女孕前常规检查发现HBV感染者，应在妊娠期内进行HBV血清学指标两对半和HBV-DNA定量测定，监测与评估母婴传播风险。

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(2016-04-25收稿，2016-07-31修回)

中文编辑： 吴昌学； 英文编辑： 赵毅

Correlation between HBsAg Positive Mother's Body HBV-DNA Level and Newborn HBV Infection

BAO Liya1, ZHU Shuang2, XIE Yuan3

(1.LaboratoryofInfectiousDiseases,AffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China; 2.XishuiCountyHospitalofTCM,Xishui564600,Guizhou,China; 3.MolecularBiologyLaboratory,GuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

Objective: To investigate the relationship between Hepatitis B virus surface antigen positive mothers's HBV-DNA content level and HBV infection in Newborn. Methods: Maternal venous blood was collected 24 hours before delivery, and neonatal umbilical cord blood was collected under sterile condition at the time of delivery. Then, immunofluorescence method was adopted to detect five indexes of hepatitis B virus by time differences; real-time fluorescence quantitative PCR method was used to detect the content of serum HBV-DNA. Recording number of puerpera and umbilical cord blood newborn of HBeAg+ group and HBeAg- group, calculating maternal infectious rate of HBV in HBeAg+ mothers; recording number of puerpera and umbilical cord blood newborn of HBeAg+ group in HBV-DNA low-level group, HBV-DNA medium level group and HBV-DNA high level group in order to compare maternal HBV transmission rate in three groups. Results: 67 HBsAg positive mothers, 24 cases of HBsAg positive in newborns, the rate of maternal transmission is 35.82%. HBsAg positive puerpera transmission rate(54.29%)is higher than HBsAg negative puerpera(15.639%), difference is statistically significant(P<0.01，χ2=10.87); HBsAg positive puerpera transmission rate in various levels of HBV-DNA copy numbers from high to low is high level group, medium level group and low level group, comparison of any two groups are statistically significant(P<0.05). Conclusions: Maternal HBV infection can cause maternal vertical transmission, HBsAg positive and high serum HBV-DNA content maternal HBV transmission rate is high.

hepatitis B virus; hepatitis B surface antigen; hepatitis B e antigen; maternal and infant transmission; maternal; newborn; hepatitis B virus DNA

贵州省2011协同创新中心支助项目[黔教合协同创新[(2014)06]

E-mail:xieyuan1974@163.com

R512.62

A

1000-2707(2016)09-1061-03

10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.09.016

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网络出版时间：2016-09-13网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160913.2240.020.html