T细胞斑点试验在肺外结核诊断中价值

刘晓莺　樊海燕　叶绥艳

[摘 要] 目的：分析结核感染T细胞斑点试验（Tuberculosis infection T cell spot test，T-Spot.TB）在肺外结核诊断中价值。方法：选取我院2013年1—2016年1月收治的833例疑似或待排除结核患者，均應用T-Spot.TB、结核菌素皮试试验（Tuberculin skin test，TST）、结核抗体（Tuberculosis antibody，TB-Ab）快速测定，分析上述检测方法对肺外结核诊断的灵敏度、特异性。结果：T-Spot.TB诊断结核性疾病的灵敏度为76.8%（331/431），特异性为84.3%（339/402）。T-Spot.TB诊断肺外结核的阳性率为92.2%，显著高于78.1%肺结核的阳性率，差异有统计学意义（P<0.05）。T-Spot.TB诊断肺外结核的阳性率显著高于TST、TB-Ab，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：T-Spot.TB诊断肺外结核具有较高的灵敏度及特异性，可作为肺外结核金标准之外的有效辅助诊断方法，在缩短诊断时间、保证治疗时效方面具有较高的临床价值。

[关键词] T细胞斑点试验；肺外结核；诊断；灵敏度；特异性

中图分类号：R521 文献标识码：B 文章编号：2095-5200（2016）04-053-03

DOI：10.11876/mimt201604020

Value of T-Spot.TB in the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis LIU Xiaoying，FAN Haiyan，YE Suiyan. （Department of laboratory，The First Hospital of Yulin，Yulin 719000，China）

[Abstract] Objective： To analyze the value of T cell spot test of tuberculosis infection （T-Spot.TB） in the diagnosis of extrapulmonary tuberculosis. Methods： 833 cases or suspected TB patients to be excluded treated in our hospital from January 2013 January 2016 was included in the study， T-Spot.TB， tuberculin skin test （TST） and tuberculosis antibody （TB-Ab） had been applied for rapid assay in both groups， sensitivity and specificity of the detection method for the diagnosis of pulmonary tuberculosis was analyzed. Results： The sensitivity T-Spot.TB in diagnosis of tuberculous disease was 76.8% （331/431） and a specificity of 84.3% （339/402）.The positive rate of T-Spot.TB in diagnosis of extrapulmonary tuberculosis was 92.2%， which was significantly higher than 78.1% of TB， the difference was statistically significant （P<0.05）. Positive rate of T-Spot.TB in diagnosis of extrapulmonary tuberculosis was significantly higher than those of TST and TB-Ab， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusions： T-Spot.TB has a high sensitivity and specificity in diagnosis of extrapulmonary tuberculosis， can be used as an effective method of diagnosis of extrapulmonary tuberculosis except the gold standard， with high clinical value to shorten the time for diagnosis， and guarantee treatment effect.

[Key words] T cell spot test of tuberculosis infection；extrapulmonary tuberculosis；diagnosis；sensitivity；specificity

肺外结核约占结核病的25%以上，死亡率约占15%，以胸膜、腹膜、骨、脑、肠为主要受侵部位[1]。肺外结核起病隐匿、不同部位临床症状不一、特异性不明显且病灶结核分枝杆菌检出率偏低，临床误诊、漏诊率较高[2]。细菌学诊断是目前临床诊断肺外结核的金标准，但该方案检测次数多、耗时长，无法确保患者获得早期诊断。结核感染T细胞斑点试验（Tuberculosis infection T cell spot test，T-Spot.TB）是在酶联免疫斑点技术上发展而来的诊断方法，近年来在结核病诊断中受到广泛关注[3]。为验证T-Spot.TB诊断肺外结核的临床价值，本研究以我院2013年1月—2016年1月收治的833例疑似或待排除结核患者为对象进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

我院2013年1月—2016年1月收治833例疑似或待排除结核患者，参照《中华人民共和国卫生行业标准肺结核诊断标准（WS288-2008）》[4]及《临床诊疗指南：结核病分册》[5]诊断。833例患者中，肺结核323例，肺外结核113例，非结核397例，肺外结核包括肠结核3例，淋巴结结核15例，结核性脑膜炎11例，结核性胸膜炎76例，盆腔结核2例，支气管结核9例。

1.2 诊断方法

1.2.1 T-Spot.TB检测 T-Spot.TB试剂盒购自英国Oxford Immunotec公司。按照说明书操作方法严格操作。检测结果判断[6]：1）阴性对照孔点数<5个，抗原A为反应性样本，或抗原B斑点数-阴性对照孔斑点数>5个，即可判定为阳性；2）阴性对照孔点数>5个，抗原A或抗原B斑点数≥2倍阴性对照孔点数，亦可判定为阳性。

1.2.2 其他检测 结核菌素皮试试验（Tuberculin skin test，TST）、结核抗体（Tuberculosis antibody，TB-Ab）快速测定及结果判断均参照结核病实验室操作规程进

行[7]，其中，TST结果以（+++）、（++++）统计为阳性。

1.3 分析方法

比较结核性疾病与非结核性疾病患者、肺外结核与肺结核患者T-Spot.TB检测结果，计算其阳性率、灵敏度、特异性，并比较TST、TB-Ab、T-Spot.TB三种检测方法诊断肺外结核的阳性率。灵敏度计算方法：灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异性计算方法：特异性=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%。

1.4 统计学分析

采用SPSS18.0进行分析，结果以（n/%）表示，组间比较行χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

431例确诊为结核患者中T-Spot.TB结果阳性331例，阴性100例，T-Spot.TB诊断结核性疾病的灵敏度为76.8%（331/431），特异性为84.3%（339/402）。

T-Spot.TB诊断肺外结核的阳性率为92.2%，显著高于肺结核78.1%的阳性率，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

肺外结核患者中T-Spot.TB诊断阳性率显著高于TST、TB-Ab，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

世界卫生组织（WHO）21世纪初的报告显示，全球范围内结核病的诊断率仅为37%，即便欧美发达国家这一数字亦不足50%[8]。相对肺结核而言，肺外结核具有病变部位复杂、症状典型性有限等特点，诊断难度更高。TST是临床诊断结核感染的常用方案，其成本低廉、操作简便等优势已得到一致认可，但亦存在灵敏度低、特异性低等弊端，且患者免疫功能的不同会对诊断结果造成明显影响[9]。作为结核诊断的金标准，细菌学检查耗时一般接近2个月，患者确诊时往往已错过最佳治疗时机，而组织病理学检查属有创操作，在增加患者痛苦的同时，亦可导致患者感染风险上升[10]。因此，临床急需一种准确、快速、可靠的结核感染早期诊断方法。

T-Spot.TB主要借助结核分枝杆菌特异性抗原刺激PBMC，通过细胞因子γ干扰素的分泌，对抗原特异性T淋巴细胞的应答反应进行检测，从而明确机体结核感染状态[11]。已有研究证实，T淋巴细胞介导的免疫反应是抗结核感染的主要方式，故T-Spot.TB有望在结核病的诊治中发挥积极作用[12]。在本次研究中，我们发现，T-Spot.TB诊断结核性疾病的阳性率达到76.8%，且灵敏度、特异性分别达到76.8%、84.3%，说明该方案有助于结核性疾病的临床诊断。同时，Pan等[13]研究发现，T-Spot.TB可检测出1/100000～1/50000的PBMC经结核杆菌刺激后释放的细胞因子，故对肺外结核的诊断效率更高。本研究结果示，T-Spot.TB诊断肺外结核的阳性率为92.2%，显著高于诊断肺结核的阳性率为78.1%，差异有统计学意义，亦印证了上述结论。

从肺外结核的发病机制而言，该类型患者更易出现免疫功能低下，故TST和TB-Ab检测假阴性甚至无反应的可能性较高[14]。在本次研究中，TST对肺外结核的诊断阳性率仅为31.2%，而TB-Ab的阳性率更是低至16.7%，进一步表明结核患者个体之间存在的明显免疫功能差异使得传统快速检测方案准确性不够理想。王立红等[15]将T-Spot.TB应用于健康人群检测，未见假阳性患者，并发现机体免疫状态对T-Spot.TB检测结果的影响甚微，亦表明T-Spot.TB在结核感染的诊断中扮演着重要角色。需要注意的是，T-Spot.TB仅能明确是否存在结核杆菌，并不具备病灶定位功能，因此，若疑似结核患者T-Spot.TB阳性，则应结合其影像學及其他实验室检查结果，及时实施抗结核治疗，以促进患者临床症状的早期改善，使其生存质量得到保证[16]。本研究的局限性在于未能明确T-Spot.TB对不同类型肺外结核的鉴别诊断价值，将在今后的临床研究中加以完善。

综上所述，T-Spot.TB在肺外结核的诊断中具有灵敏度、特异性高，检测时间短等优势，可有效提高难以取得细菌学证据的肺外结核的早期检出率，为患者治疗方案的早期制定与实施提供参考。

参 考 文 献

[1] Lee Y M， Park K H， Kim S M， et al. Risk factors for false-negative results of T-SPOT. TB and tuberculin skin test in extrapulmonary tuberculosis[J]. Infection， 2013， 41（6）： 1089-1095.

[2] 朱孟丽. 近10年肺外结核病例分析[C]// 全国铁路胸心外科学术会议. 2002.

[3] 舒晋峰， 许小敏. 结核感染T细胞斑点试验对肺外结核诊断价值探讨[C]// 浙江省检验医学学术年会. 2014.

[4] 中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心. 中华人民共和国卫生行业标准肺结核诊断标准（WS288-2008）[S]. 人民卫生出版社，2008.

[5] 孙雯雯， 肖和平， 吴福蓉， 等. 结核感染 T 细胞斑点试验在临床诊断为肺外结核患者中的价值评价[J]. 中国防痨杂志， 2015 （7）： 784-789.

[6] Lee Y M， Kim S M， Park S J， et al. Factors Associated with a Strong Response to the T-SPOT. TB in Patients with Extrapulmonary Tuberculosis[J]. Infect Chemother.， 2014， 46（4）： 248-252.

[7] Turtle L， Kemp T， Davies G R， et al. In routine UK hospital practice T-SPOT. TB? is useful in some patients with a modest pre-test probability of active tuberculosis[J]. Eur J Intern Med.， 2012， 23（4）： 363-367.

[8] Leung C C， Yam W C， Ho P L， et al. T-Spot. TB outperforms tuberculin skin test in predicting development of active tuberculosis among household contacts[J]. Respirology， 2015， 20（3）： 496-503.

[9] YAN L， XIAO H， HAN M， et al. Diagnostic value of T-SPOT.TB interferon-γ release assays for active tuberculosis[J]. Exp Ther Med， 2015， 10（1）： 345-351.

[10] HE Y， ZHANG W， HUANG T， et al. Evaluation of a diagnostic flow chart applying medical thoracoscopy， adenosine deaminase and T-SPOT.TB in diagnosis of tuberculous pleural effusion[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci， 2015， 19（19）： 3563-3568.

[11] JEONG JC， KOO TY， JEON HJ， et al. Utility of QuantiFERON-TB assay for prediction of tuberculosis development in kidney transplant patients in an intermediate-tuberculosis-burden country： lack of evidence for enhanced prediction for short-term tuberculosis development[J]. Transplant Proc， 2014， 46（2）： 583-587.

[12] 舒晋峰， 许小敏. 结核感染 T 细胞斑点试验对肺外结核诊断价值探讨[J]. 中国微生态学杂志， 2013， 25（12）： 1444-1446.

[13] Pan L， Jia H， Liu F， et al. Risk factors for false-negative T-SPOT. TB assay results in patients with pulmonary and extra-pulmonary TB[J]. J Infect， 2015， 70（4）： 367-380.

[14] Feng Y， Diao N， Shao L， et al. Interferon-gamma release assay performance in pulmonary and extrapulmonary tuberculosis[J]. PLoS One， 2012， 7（3）： e32652.

[15] 王立紅， 付秀华， 张桂芝， 等. 结核感染 T 细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值[J]. 中国防痨杂志， 2013， 35（12）： 992-996.

[16] ZHU C， LIU Z， LI Z， et al. The performance and limitation of T-SPOT.TB for the diagnosis of TB in a high prevalence setting[J]. J Thorac Dis， 2014， 6（6）： 713-719.