顶空进样-气相色谱法测定云南白药酊中甲醇量

陈睿彦，曾波，李艳

(云南省昭通市食品药品检验所，云南 昭通 657000)

·中药工业·

顶空进样-气相色谱法测定云南白药酊中甲醇量

陈睿彦*，曾波，李艳

(云南省昭通市食品药品检验所，云南 昭通 657000)

目的：建立以顶空进样-气相色谱法测定云南白药酊中甲醇量的方法。方法：色谱柱为 SGE PEG-20M毛细管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)；柱温：采用程序升温，检测器为FID(温度为250 ℃)；载气为氮气；分流比为2∶1。结果：甲醇在0.001%～0.05%的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9)；回收率为97.22%，RSD为2.74%，最低检测限为0.000 2%。结论：本方法简便、准确，适用于云南白药酊中甲醇量的测定。

顶空进样；气相色谱法；云南白药酊；甲醇量

云南白药由云南民间名医曲焕章先生于1902年创制，问世百年来，以其神奇的疗效被世人誉之为“伤科圣药” “中华瑰宝”。云南白药酊诞生于1983年，有着“关节护理专家”的美称，对于跌打损伤、风湿麻木、筋骨及关节疼痛、肌肉酸痛及冻伤有良好的药效，内外兼顾，标本同治[1]。云南白药酊在制备过程中用到大量的乙醇，这使得产品中或多或少的会残留少量甲醇。本文根据《中华人民共和国药典》2010年版一部收载的甲醇量检查法[2]，对云南白药酊中甲醇量[3-5]进行测定。

1 仪器与试药

Agilent7890A气相色谱仪、Agilent7694E顶空进样器、Agilent OpenLAB CDS ChenStation Edition气相工作站。

云南白药酊(美国Fisher Scientific公司，批号分别为ZKB1308，ZGB1403，ZGA1502，ZAA1506)；甲醇为色谱纯；实验用水为哇哈哈纯净水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：SGE PEG-20M毛细管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)；柱温：程序升温，初始40 ℃,保持5 min，然后以10 ℃·min-1的速率升到200 ℃，保持5 min；进样口温度150 ℃；FID检测器，温度为250 ℃；分流进样，分流比为2∶1；进样量为1 μL；载气为氮气；平衡温度为85 ℃；传输管温度为110 ℃；进样环温度为105 ℃；平衡时间为15 min。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密量取甲醇1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10 mL置于100 mL容量瓶中，加水定容并摇匀，即得对照品储备液。精密量取1、5、10、25、50 mL对照品储备液，分别置100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取3mL置顶空进样瓶中，密封，作为0.001%、0.005%、0.01%、0.025%、0.05%的系列对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取3 mL供试品置10 mL顶空进样瓶中，密封，作为供试品溶液。

2.3 系统适用性试验

取空白溶剂、对照品溶液和样品溶液,按2.1色谱条件分析，色谱图见图1。

注：A.空白溶剂；B.对照品溶液；C.样品溶液。图1 空白溶剂、对照品溶液及样品溶液的GC色谱图

结果表明，甲醇峰与其他色谱峰完全分离，分离度大于1.5，甲醇峰的理论塔板数大于90 000，溶剂不干扰样品中甲醇量的测定。

2.4 线性试验

分别取系列对照品溶液，按2.1色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标(Y)，浓度为横坐标(X)，进行线性回归，结果表明：甲醇在0.001%～0.05%的浓度范围内线性关系良好。回归方程为Y=18 788X+4.353 5，r=0.999 9(n=5)。

2.5 回收率试验

精密量取供试品(批号：ZKB1308)5 mL 9份，分别置10 mL容量瓶中，分别加入不同量的对照品溶液(0.01%)，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取3 mL置顶空进样瓶中，密封，即得加样回收率测定试样，按上述色谱条件进行测定，计算回收率[6]。结果见表1。

表1回收率试验结果(n=9)

原有(%)添加量(%)测得量(%)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)00006200010000160980000006200010000156940095662180000620001000015795000000620001200018199170000620001200018510250100002210000620001200018098330000620001500020696000000620001500020897339600139000062000150002049467

2.6 精密度试验

分别取浓度为0.05%的对照品溶液3 mL置于6个不同的顶空进样瓶中，密封，按上述色谱条件进行测定，得峰面积的RSD为2.7%，符合《中华人民共和国药典》2010年版二部规定的残留溶剂外标法精密度测定要求(RSD≤10%)。

2.7 最低检出限试验

逐步稀释对照品溶液，按上述色谱条件进行测定，以信噪比为3∶1时注入仪器的量来确定检出限[7]。测得检出限为0.000 2%。

2.8 稳定性试验

取同一供试品溶液，分别在0、1、2、4、6、8、16 h时进行测定，记录峰面积。结果RSD为0.61%，说明供试品溶液在16 h内稳定[8]。

2.9 重复性性试验

取同一批号的供试品溶液6份，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定甲醇残留量。结果供试品的甲醇量为0.001 1%，RSD为1.77%。

2.10 样品含量测定

精密量取供试品3 mL，置10 mL顶空进样瓶中，密封，按上述色谱条件进样测定。每个批次取3份样品，按峰面积计算各样品甲醇量，见表2。

结果表明，供试品的甲醇量符合《中华人民共和国药典》2010年版一部要求。

表2 样品中甲醇量测定结果

3 讨论

在《中华人民共和国药典》2010版一部附录中，对于酒剂或酊剂中甲醇含量的检测有两种方法，分别为毛细管柱法、填充柱法。为了使所用的方法准确可靠，在确定使用何种方法之前，对两种方法都进行了考查。结果表明，填充柱法有诸多缺陷。而对于毛细管柱法，其分离效果较好、柱效高，故本实验采取毛细管柱法。

[1] 张立群，闫俊岭，张信岳，等.云南白药酊口服加外用的抗炎作用研究[J].云南中医学院学报，2012，04：29-33.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

[3] 陈建琴.云南白药酊甲醇量测定的不确定度评估[J].中国药师，2013，16(09)：1435-1437.

[4] 刘冬.顶空气相色谱法用于药物中残留溶剂检测的研究[D].北京：北京中医药大学，2007.

[5] 房方，伍乃英，李祥，等.顶空气相色谱法测定藿香正气水中的甲醇[J].中药新药与临床药理，2009，20(04)：351-353.

[6] 李杨，黄德友，李连杰，等.顶空气相色谱法测定苯妥英钠中有机溶剂残留量[J].中国药师，2014，17(6)：1062-1063.

[7] 中国标准化委员会.食品卫生检验方法理化部分：GB/T 5009.1-2003[S].北京：中国标准出版社，2003.

[8] 肖顺经，曾庆艳，倪兆武，等.气相色谱法测定苯酒剂及蒸馏酒中乙醇量[J].中国药业，2010，19(18)：40.

(2015-11-17)

DeterminationofMethanolinYunnanBaiyaoTincturebyHeadspaceSamplingGC

Chen Ruiyan*，Zeng Bo，Li Yan

(ZhaotongInstituteforFoodandDrugControl，Zhaotong657000,China)

Objective：To establish a Headspace Sampling GC method for the determination of methanol in Yunnan Baiyao Tincture.Methods：An SGE PEG-20M capillary column(30 m×250 μm×0.25 μm)was used for the determination with temperature programming，FID detector temperature was 250 ℃ with nitrogen as carrier gas，and the split ratio was 2∶1.Results：The linear range of the method in methanol was 0.001%～0.05% (r=0.999 9).The recovery rate was 97.22%，and RSD was 2.74%，and the detection limit was 0.000 2%.Conclusion：The method was simple，accurate，and suitable for the determination of methanol in Yunnan Baiyao Tincture.

Headspace Sampling；GC；Yunnan Baiyao Tincture；methanol

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.10.023

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陈睿彦，主管药师，研究方向：食品药品检验；Tel:(0870)3156097，E-mail：343475513@qq.com