藏药妇洁搽剂薄层鉴别方法研究

刘凯，祝清灿

[国药集团同济堂(贵州)制药有限公司，贵州 贵阳 550200]

·中药工业·

藏药妇洁搽剂薄层鉴别方法研究

刘凯，祝清灿*

[国药集团同济堂(贵州)制药有限公司，贵州 贵阳 550200]

目的：提高妇洁搽剂质量标准。方法：采用薄层色谱法对妇洁搽剂中烈香杜鹃精油、猪毛蒿精油、苦参进行鉴别。结果：薄层色谱斑点清晰，阴性对照无干扰。结论：建立的方法专属性强，重现性好，可作为妇洁搽剂中烈香杜鹃精油、猪毛蒿精油、苦参的定性鉴别方法。

妇洁搽剂；薄层色谱；烈香杜鹃精油；猪毛蒿精油；苦参

妇洁搽剂收载于《国家中成药标准汇编》外科妇科分册，由烈香杜鹃精油、猪毛蒿精油、苦参组成，具有解毒杀虫、除湿止痒的作用。在现行质量标准(WS-11184(ZD1184)-2002-2012Z)中，烈香杜鹃精油和猪毛蒿精油的鉴别方法专属性不强，未对苦参进行鉴别。为了有效地控制产品质量，本实验根据烈香杜鹃油[1-4]和猪毛蒿油[5-7]的化学成分研究结果，改进现有鉴别方法，并研究建立了苦参的薄层色谱鉴别方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

电子分析天平AB104-N型[梅特勒-托利多仪器(上海有限公司)]；暗箱式紫外分析仪ZF-2C型(上海安亭电子仪器厂)；恒温水浴锅DZKW-C型(金坛市大地自动化仪器厂)。

1.2 试药

烈香杜鹃精油对照提取物、猪毛蒿精油对照提取物、苦参碱对照品、槐定碱对照品、苦参对照药材(中国食品药品检定研究院，批号分别为610008-201501，610007-201501，110805-200508，110784-201405，121019-201407)；硅胶G预制板(青岛海洋化工厂分厂，批号：20120622；德国默克公司，批号：HX377558)；化学试剂均为分析纯；水为纯化水；妇洁搽剂样品(青海普兰特药业有限公司，批号分别为140115，140508，140709)。

2 方法与结果

2.1 烈香杜鹃精油的鉴别

2.1.1 供试品溶液的制备 取妇洁搽剂溶液20 mL，加入乙醇20 mL，摇匀，用石油醚(30～60 ℃)40 mL振摇提取，提取液温水浴挥尽石油醚，残渣加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2 对照提取物溶液的制备 取烈香杜鹃精油0.1 mL，加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为烈香杜鹃精油对照提取物溶液。

2.1.3 阴性对照溶液的制备 按照处方配比，取除烈香杜鹃油外的其他药味，按妇洁搽剂工艺制成样品，按2.1.1项下供试品溶液制备的方法制成缺烈香杜鹃精油阴性对照溶液。

2.1.4 薄层鉴别方法及结果 吸取供试品溶液、对照提取物溶液、阴性对照溶液各1～2 μL，分别点于同一用5%硝酸银乙醇溶液(取硝酸银5 g，加水20 mL使溶解，再加乙醇80 mL，摇匀，即得)润湿改性的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(20∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液。在日光下观察，供试品色谱中，在与烈香杜鹃精油色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰。见图1

注：1.样品(批号：140115)；2.样品(批号：140508)；3.样品(批号：140709)；4.烈香杜鹃精油对照提取物；5.缺烈香杜鹃精油阴性对照品。图1 烈香杜鹃精油薄层色谱图

2.2 猪毛蒿精油的鉴别

2.2.1 供试品溶液的制备 按2.1.1项下的方法制备供试品溶液。

2.2.2 对照提取物溶液的制备 取猪毛蒿精油0.1 mL，加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为猪毛蒿精油对照提取物溶液。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 按照处方配比，取除猪毛蒿油外的其他药味，按妇洁搽剂工艺制成样品，按2.1.1项下供试品溶液制备的方法制成猪毛蒿精油阴性对照溶液。

2.2.4 薄层鉴别方法及结果 吸取供试品溶液、对照提取物溶液、阴性对照溶液各1～2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(20∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硝酸银乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与猪毛蒿精油色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰，见图2。

注：1.猪毛蒿精油对照提取物；2.样品(批号：140115)；3.样品(批号：140508)；4.样品(批号：140709)；5.阴性对照样品。图2 猪毛蒿精油薄层色谱图

2.3 苦参的鉴别

2.3.1 供试品溶液的制备 取妇洁搽剂溶液20 mL，加浓氨试液1 mL，摇匀，并置分液漏斗中，用三氯甲烷30 mL振摇提取，提取液蒸干，残渣用乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.3.2 对照药材溶液的制备 取苦参对照药材粉末0.5 g，加稀乙醇40 mL，回流提取2 h，过滤，滤液加浓氨试液1 mL，用三氯甲烷30 mL振摇提取，提取液蒸干，残渣用乙醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。

2.3.3 对照品溶液的制备 取苦参碱对照品、槐定碱对照品，加乙醇制成质量浓度为0.2 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。

2.3.4 阴性对照溶液的制备 照处方配比，除去苦参，按妇洁搽剂工艺制成不含苦参的阴性样品。取阴性样品20 mL，按供试品溶液的制备方法制备苦参阴性对照品溶液。

2.3.5 薄层鉴别方法及结果 吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各2～5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-氨水(6∶8∶3)上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。在日光下观察，供试品色谱中，在苦参色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性样品无相应斑点，见图3。

注：1.苦参碱、槐定碱混合对照品；2.苦参对照药材；3.样品(批号：140115)；4.样品(批号：140508)；5.样品(批号：140709)；6.阴性对照品。图3 苦参薄层色谱图

3 讨论

由于挥发油在本品中以O/W形式存在，采用石油醚(30～60 ℃)、乙醚、三氯甲烷萃取，乳化严重，故在样品处理过程中用乙醇破乳，提高萃取效率。用石油醚(30～60 ℃)萃取的样品挥发温度低，便于保留挥发油的成分，显色明显。

烈香杜鹃精油鉴别试验中，采用传统的硅胶G薄层板以及香草醛硫酸溶液显色时干扰较严重。以硝酸银作为固定相成分，属络合薄层，用于分离含有不饱和烃的物质。根据不饱和度及其结构，有不同的Rf值[9]；在本实验中，采用硝酸银改性的薄层板，能够鉴别出桃红色主斑点，为单萜和倍半萜[10]。采用硝酸银改性G板时，不同浓度的硝酸银保留能力不同，硝酸银浓度在5%以上时，色谱分离度较高，比移值适中；活化过程中应当控制试验条件，时间过短，水分干扰色谱分离，分离度较低；活化时间过长，硝酸银分解，薄层板变为灰色，分离效果降低。制备硝酸银改性G板时，应当避光操作，活化温度为80 ℃，时间为5 min。

在猪毛蒿精油的鉴别实验中，硝酸银作为显色剂，由于不同物质的还原性不同，硝酸银被还原成银而在薄层板显示不同化学成分的斑点。

苦参鉴别中，选用苦参碱对照品、槐定碱对照品和氧化苦参碱对照品进行实验，阴性对照有干扰。进一步对处方中的原料及辅料进行考察发现，干扰物质为聚山梨酯-80，聚山梨酯-80的薄层图谱与氧化苦参碱对照品相同位置上显相同颜色斑点，对苦参碱对照品和槐定碱对照品无干扰。因此，选用苦参碱对照品和槐定碱对照品进行实验。关于方法耐用性的考察，烈香杜鹃油、猪毛蒿油和苦参的鉴别分别对不同的展开温度(8、30 ℃)、湿度(47%、92.5%)、不同厂家薄层板(青岛海洋化工厂分厂、德国默克公司)及不同展开剂比例(±10%)进行考察，结果表明，在不同的温湿度条件下，使用不同品牌的层析板对分析结果无影响。

本实验研究表明，烈香杜鹃油、猪毛蒿油和苦参的薄层色谱鉴别方法专属性强，阴性样品无干扰，得到的TLC图谱斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，方法稳定、重现性好，可用于妇洁搽剂的质量控制。

[1] 李维卫.藏药材烈香杜鹃挥发油化学成分研究[J].云南大学学报(自然科学版)，2004，26(6A)：48-51.

[2] 董钰明，唐兴文，张树江，等.烈香杜鹃叶挥发油化学成分的GC/MS研究[J].兰州医学院学报，2003，29(3)：15-16.

[3] 胡浩斌，郑尚珍，黄彬弟，等.烈香杜鹃挥发油的化学成分[J].兰州医学院学报，2004，30(3)：31-33.

[4] 梁俊玉，杨强，马小梅，等.甘肃三种杜鹃属植物挥发油含量及其抑菌活性研究[J].中国野生植物资源，2014，4(3)：31-33.

[5] 中国医学科学院药用植物资源开发研究所，等.中药志：第四册[M].北京：人民卫生出版社，1985.

[6] 《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编[M].北京：人民卫生出版社，1976.

[7] 刘洪玲，董岩.艾蒿和猪毛蒿挥发油化学成分对比研究[J].时珍国药，2007，18(4)：832-833.

[8] 付华.两种蒿属植物精油的提取及抑菌和抗氧化特性研究[D].呼和浩特：内蒙古农业大学，2007.

[9] 欧阳长庚，卢文彪.利用硝酸银处理的硅胶色谱方法分离和提纯中药有效成分的思考[J].广州中医药大学学报，2004，21(4)：319-322.

[10] 吕义长，王玉兰，白云芳.黄花杜鹃挥发油化学组分的研究[J].化学学报，1980，38(2)：140-148.

[11] 孟楣，马格非，倪晓燕.两种外用洗剂中苦参的薄层鉴别方法探讨[J].海峡药学，2009，21(7)：89-90.

[12] 国家药典委员会，中华人民共和国药典：一部[M].北京；化学工业出版社，2010.

StudiesonQualityStandardofFUJIELiniment

LIUKai，ZHUQingcan*

[SinopharmTongjitang(Guizhou)PharmaceuticalCo.Ltd.,guizhou550200,China]

Objective：To improve the quality standard of FUJIE Liniment.Methods：The TLC method was used to qualitatively identifyRhododendronanthopogonoideoil，Artemisiascopariaoil and Sophorae Flavescentis Radix.Results：The spots on the TLC plate were clear and the negative control sample didn't disturb.Conclusion：The established methods were accurate，reliable，reproducible，and can be used for the quality control of FUJIE Liniment.

FUJIE Liniment；TLC；RhododendronRhododendronanthopogonoideoil；Artemisiascopariaoil；Sophorae Flavescentis Radix.

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.11.023

2016-01-21)

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祝清灿，高级工程师，研究方向：中药成药质量标准；E-mail：657662046@qq.com