不同蛋白梯度对草鱼部分生化指标影响的试验报告

范鹏

（重庆市长寿区畜牧兽医局　重庆　长寿　401220）

不同蛋白梯度对草鱼部分生化指标影响的试验报告

范鹏

（重庆市长寿区畜牧兽医局重庆长寿401220）

本文采取投喂不同蛋白含量饲料的方法，对草鱼部分生化指标的变化情况进行研究，以期为草鱼饲料蛋白质的合理添加量提供参考。

1　材料与方法

1.1试验用鱼

选择体表无伤、体质健壮的草鱼作为试验用鱼，经2%食盐水消毒后暂养两周开始试验，周期为8周。试验用鱼体长为20.87±2.49cm，体重为118.19±16.53g。试验鱼分3组，分别投喂蛋白含量为28%、33%、38%的膨化饲料，除蛋白质外，其他饲料成分相同。

1.2试验方法

1.2.1血液生化指标测定

血糖、甘油三酯和总胆固醇含量测定在半自动生化分析仪上测定。

1.2.2血浆总氨基酸含量测定

采用铜离子络合物法。原理为铜离子能与各种氨基酸络合产生蓝绿色的络合物，在一定波长下颜色的深浅与总氨基酸的含量成正比。

1.3粗酶液的制备

取出草鱼的肠道以及肝胰脏，将肠分为前、中、后3段，用预冷蒸馏水冲洗并吸干；取心脏、肝胰脏、脾脏、中肾、鳃、肌肉、血液等做常规指标检测。相同组织剪碎后称重，加10倍体积的预冷蒸馏水，电动匀浆机匀浆，冷冻离心机12000r/min低温离心20min，取上清液。

1.4SOD酶活性测定

采用SOD试剂盒测定。测定原理是通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基（O2-），后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用紫外分光光度计测其吸光度。当被测样品中含SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可以求出被测样品中的SOD活力。

1.5MDA含量测定

采用MDA测试盒测试。测定原理是过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）可与硫代巴比妥酸（TBA）缩合，形成红色产物，在532nm处有最大吸收峰。

2　结果

2.1不同蛋白梯度饲料对草鱼生化指标的影响

不同蛋白梯度饲料对草鱼SOD、CAT、MDA活力的影响结果分别见表1、表2、表3。

表1　不同蛋白梯度饲料对草鱼SOD活力的影响（±SD）

表1　不同蛋白梯度饲料对草鱼SOD活力的影响（±SD）

SOD　28%　33%　38%心脏（U/mg）　24.84±3.58a　27.27±3.92a　26.86±1.95a肝胰脏（U/mg）　47.90±3.45a　50.59±4.14a　54.34±2.76a脾脏（U/mg）　9.42±1.50a　8.49±1.05a　9.10±0.84a头肾（U/mg）　14.26±2.12b　18.30±1.55ab　20.90±2.78a中肾（U/mg）　33.06±2.57a　35.68±2.56ab　39.53±2.47a鳃（U/mg）　13.59±2.26a　15.90±2.40a　17.04±2.15a肌肉（U/mg）　8.14±1.92a　11.34±2.78a　8.11±1.79a血液（U/ml）　14.90±4.18a　16.12±2.73a　18.62±2.59a

注：表中同一行数据右上角标有相同字母的表示差异不显著（P>0.05）；标有不同字母的表示差异显著（P<0.05）。显著水平为0.05。

表2　不同蛋白梯度饲料对草鱼CAT活力的影响（±SD）

表2　不同蛋白梯度饲料对草鱼CAT活力的影响（±SD）

注：表中同一行数据右上角标有相同字母的表示差异不显著(P>0.05)；标有不同字母的表示差异显著(P<0.05)。显著水平为0.05。

CAT　28%　33%　38%心脏（U/mg）　0.86±0.15b　1.06±0.08ab　1.18±0.08a肝胰脏（U/mg）　2.68±0.25b　2.99±0.10b　3.58±0.38a脾脏（U/mg）　1.40±0.10a　1.30±0.10a　1.61±0.32a头肾（U/mg）　1.00±.011b　1.00±.011b　1.64±0.10a中肾（U/mg）　1.80±0.15b　2.07±0.21a　2.09±0.18a鳃（U/mg）　1.10±0.13b　1.05±0.18b　1.46±0.17a肌肉（U/mg）　1.50±0.14b　1.86±0.11a　2.07±0.20a血液（U/ml）　1.28±0.14b　1.51±0.14ab　1.73±0.13a

表3　不同蛋白梯度饲料对草鱼MDA活力的影响（nmol/mg）（±SD）

表3　不同蛋白梯度饲料对草鱼MDA活力的影响（nmol/mg）（±SD）

注：表中同一行数据右上角标有相同字母的表示差异不显著（P>0.05）；标有不同字母的表示差异显著（P<0.05）。显著水平为0.05。

MDA　28%　33%　38%心脏（nmol/mg）　0.99±0.12b　1.33±0.10a　1.54±0.87a肝胰脏（nmol/mg）　1.39±0.14a　1.68±0.17a　1.49±0.16a脾脏（nmol/mg）　0.82±0.05b　0.95±0.11ab　1.05±0.09a头肾（nmol/mg）　2.64±0.15a　2.89±0.16a　2.88±0.20a中肾（nmol/mg）　1.98±0.12b　2.07±0.09b　2.44±0.18a鳃（nmol/mg）　1.53±0.11a　1.71±0.21a　1.72±0.13a肌肉（nmol/mg）　0.82±0.15b　1.09±0.13a　1.27±0.07a血液（nmol/ml）　2.87±0.25a　3.29±0.27a　3.08±0.25a

2.2生化指标的影响分析

SOD是机体重要的抗氧化酶，其活性与生物的免疫水平密切相关。草鱼心脏的SOD酶活力在33%蛋白浓度组时有较大升高，当饲料蛋白继续升高至38%时，SOD活力停止上升，甚至稍有下降。肝胰脏SOD活力最强，随着饲料蛋白浓度的增加，酶活力逐渐增强。脾脏SOD活力较小，其SOD活力没有随着饲料蛋白水平变化出现明显规律变动。头肾随着饲料蛋白梯度变化明显上升，28%-33%梯度组之间变化强于33%-38%梯度组。中肾SOD活性仅次于肝胰脏，SOD活性随着饲料蛋白梯度变化规律上升。鳃的SOD酶活力同头肾相近，SOD活性在38%梯度组低于头肾。肌肉SOD活力最弱，33%梯度组饲料对肌肉SOD活力有较好的提高。血液SOD活性随着饲料蛋白梯度变化，缓慢上升。

CAT是生物体第一道抗氧化防线，能迅速清除细胞代谢产生的毒性物质，具有一定的解毒能力。草鱼心脏的CAT活力在各组织中最低，随着饲料蛋白的变化缓慢升高。肝胰脏的CAT活力最高，随着饲料蛋白梯度的升高，CAT活力提高较快。脾脏CAT活力随着蛋白梯度变化影响不大，没有规律性的改变。头肾在28%-33%梯度组之间CAT活力有较大提高，33%-38%梯度组之间变化较慢。中肾变化趋势同头肾相近，CAT活力在28%-33%梯度之间有较快升高。鳃的CAT活力在28%-33%梯度组之间变化不大，甚至略有降低，在33%-38%梯度组之间，有一定程度的升高。肌肉CAT活力随着饲料蛋白梯度的升高，稳定上升。血液CAT活力略低于肌肉，受饲料蛋白梯度影响同肌肉相近。

MDA反映机体受氧化损伤的程度，是脂质过氧化的最终产物。心脏MDA活力随着饲料蛋白梯度上升，稳定上升。肝胰脏在28%-33%饲料梯度组之间MDA活力上升，33%-38%浓度组之间有所下降，但仍高于28%梯度组。脾脏MDA活性最弱，随饲料蛋白梯度升高，缓慢上升。头肾MDA在28%-33%梯度组之间有一定程度的上组升，33%-38%梯度组之间变化不大。中肾MDA在28%-33%梯度组之间上升较慢，在33%-38%梯度组之间有较快升高。鳃的MDA活力低于中肾，随饲料蛋白梯度变化规律同头肾相近。肌肉MDA活力略高于脾脏，随饲料蛋白梯度变化规律同脾脏相近。血液MDA活力在28%-33%梯度组之间有较大的促进作用，33%-38%梯度组之间，MDA活力略有回降。

3　分析

综合SOD、CAT、MDA数据分析，草鱼主要的抗氧化酶在肝胰脏和血液里，这两者的抗氧化能力大多随着蛋白含量的升高而升高，在饲料蛋白质33%升高至38%时，肝胰脏和血液的MDA活力有所下降。SOD活力仅次与肝胰脏的心脏，在38%饲料组的酶活力也出现回落。综合来看，33%饲料组的草鱼抗氧化能力高于28%饲料组，38%蛋白饲料使得草鱼部分器官抗氧化能力出现回落，但一部分器官的抗氧化能力依然得到较大加强。心脏和肝胰脏的溶菌酶活力均随着饲料蛋白梯度的上升而有所提高，肝胰脏在草鱼各组织中溶菌酶活力最高。脾脏在28%-33%蛋白梯度组时，溶菌酶活力有一定程度升高，在33%-38%蛋白梯度组之间，溶菌酶活力略有下降。头肾溶菌酶活力略强于心脏，在28%-33%梯度组之间的溶菌酶活力上升速度高于33%-38%梯度组。中肾溶菌酶活力在28% -33%梯度组之间有一定程度的上升，33%-38%梯度组之间上升加快。鳃的溶菌酶活力在各器官之中活力最小，溶菌酶活力受饲料蛋白梯度变化影响不大。肌肉溶菌酶活性随着饲料蛋白梯度变化有一定程度上升。血液溶菌酶活力在28%-33%梯度组之间的上升速度高于33%-38%梯度组。

加大饲料中的蛋白含量，对草鱼各组织的生化指标的含量均有一定程度的提高。反之则反，但是在33%-38%梯度组之间有较快的上升。各种含量随饲料蛋白含量变化有一定程度的上升，上升幅度较小。头肾、中肾和鳃的总蛋白含量上升较大，肌肉在33%-38%梯度组之间上升较大，血液总蛋白含量受饲料蛋白含量变化影响较少。综合来看，33%饲料组的草鱼抗氧化能力高于28%梯度组，38%梯度组使得草鱼部分器官抗氧化能力出现回落，但一部分器官的抗氧化能力依然得到较大加强。