活性炭对注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸含量及澄清度与颜色的影响

张传兰，徐全华，马伟平

(杭州澳亚生物技术有限公司，浙江 杭州　310018)



活性炭对注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸含量及澄清度与颜色的影响

张传兰，徐全华，马伟平

(杭州澳亚生物技术有限公司，浙江 杭州310018)

摘要：目的研究活性炭对注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸含量及澄清度与颜色的影响，为该制剂工艺研究中活性炭用量的选择提供科学依据。方法采用高效液相色谱法测定丁二磺酸腺苷蛋氨酸含量和紫外-可见分光光度法测定澄清度与颜色。结果随着活性炭用量的增加，药物的含量降低；当活性炭用量为0.05%时，溶液的澄清度与颜色有轻微的改善，但随着活性炭用量的增加，溶液的澄清度逐渐降低，颜色加深。结论注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸的活性炭适宜用量为0.05%，过量的活性炭加入可直接影响药品的质量。

关键词：炭;S-腺苷甲硫氨酸;分光光度法,紫外线;色谱法,高压液相

腺苷蛋氨酸(Ademetionine)是存在于人体所有组织和体液中的一种生理活性物质。它作为甲基供体(转甲基作用)和生理性巯基化合物(如半胱氨酸、谷胱甘肽和辅酶A等)参与体内重要的生化反应。在肝内，通过使质膜磷脂甲基化而调节肝脏细胞膜的流动性，而且通过转巯基反应可以促进解毒过程中硫化产物的合成。只要肝内腺苷蛋氨酸的生物利用度在正常范围内，这些反应就有助于防止肝内胆汁郁积。腺苷蛋氨酸主要用于治疗肝硬化前和肝硬化所致肝内胆汁郁积和妊娠期肝内胆汁郁积[1]。活性炭系由木炭、各种果壳和优质煤等作为原料，通过物理和化学方法对原料进行破碎、过筛、催化剂活化、漂洗、烘干和筛选等一系列工序加工制造而成具有很强吸附能力的多孔疏松物质，在医药工业中作吸附剂使用[2]。已有较多文献报导，活性炭对药物有较强的吸附作用，直接影响药物的含量，但对药物澄清度和颜色的影响报导较少。本研究采用高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法考察不同用量活性炭对注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸含量及澄清度与颜色的影响，旨在为该制剂工艺研究中活性炭用量的选择提供科学依据。

1　仪器与试药

1.1仪器Agient 1200型高效液相色谱仪，包括：G1322A真空脱气机，G1311A四元泵，G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G1314B可变波长检测器和LC Chemstation工作站(美国安捷伦科技有限公司)；BP211D型电子天平(Sartorius 公司)；UV2500型紫外可见分光光度计(岛津仪器苏州有限公司)；C.MAG.HS7型恒温磁力搅拌器(德国IKA集团)；LD4-2型离心机(北京医用离心机厂)。

1.2试药丁二磺酸腺苷蛋氨酸(浙江普洛家园药业有限公司，批号：1607-1303003)；活性炭(浙江杭木工业有限公司活性炭分公司)；甲酸铵(上海凌峰化学试剂有限公司)；辛烷磺酸钠(山东禹王实业有限公司化工分公司)；甲酸(上海凌峰化学试剂有限公司)；乙腈(美国TEDIA公司)，除乙腈为色谱纯外，其它试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1供试样品的制备按注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸的处方精密称取丁二磺酸腺苷蛋氨酸50g(以腺苷蛋氨酸计)，置1 L烧杯中，加适量注射用水，用玻棒搅拌至溶解，转移置500 mL量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得。

2.2供试样品的处理取供试样品7份，每份精密量取50 mL，置烧杯中，分别加入0、25、50、100、150、300、500 mg活性炭，置恒温磁力搅拌器上搅拌吸附30min，高速离心机离心脱炭10min，取上清液进行测定。

2.3样品含量测定色谱条件与系统适用性试验色谱柱为CAPCELL PAKC18MGⅡ(4.6 mm×250 mm，5 μm)；取甲酸铵12.612 g，辛烷磺酸钠1.0 g，加水1 000 mL溶解，用甲酸调节pH至2.80，量取900 mL，加乙腈100 mL，摇匀，作为流动相；检测波长为260 nm；流速为1.5 mL·min-1；柱温为30℃。

测定法分别精密量取经活性炭处理后的供试样品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取16 μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取未经活性炭处理的供试样品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液，同法测定。含量以供试品溶液峰面积除以对照溶液峰面积进行计算。测定结果见表1和图1。

研究结果表明：随着活性炭用量的增加，对药物的吸附率逐渐增大，表明活性炭对注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸有吸附作用。

A　吸附前样品(不加活性炭)

B　吸附后样品(0.05%活性炭) 图1　不同用量活性炭对溶液含量影响的HPLC色谱图

2.4样品溶液的澄清度与颜色测定取经活性炭处理和未经处理的供试样品，采用紫外-可见分光光度法在550 nm波长处测定透光率(T)，在450 nm波长处测定吸光度。测定结果见表2。澄清度与颜色测定的方法及参数依据见讨论。

研究结果表明：当活性炭用量为0.05%时，溶液的透光率略有提高，吸光度略有下降，表明活性炭在该浓度时对溶液的澄清度与颜色有一定的改善作用，但随着活性炭用量的增加，溶液的澄清度逐渐降低，颜色加深。

基于活性炭对药物含量及澄清度与颜色的影响研究结果，确定注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸溶液的活性炭用量为0.05%。

3　讨论

利用紫外-可见分光光度法在450 nm附近波长处测定吸光度，是原料药和制剂颜色检查中较为普遍的方法。国家药品标准(化学药品)正文各论编写细则第二部分原料药标准编写细则规定，溶液的颜色可在可见光波长范围内测定吸光度或采用仪器测色的方法；第三部分制剂标准编写细则规定，对于颜色的测定，除采用目视比色法外，也可采用仪器测色法，以解决目视比色法较难判断的实际问题[3]。据统计，中国药典2015年版二部已经收载了51个药物品种通过吸光度控制药物的颜色[4]，选择的波长在450 nm附近的可见光区域，如维生素C注射液(420 nm)，氧氟沙星氯化钠注射液(450 nm)和盐酸多巴酚丁胺(480 nm)等， 波长的选择应根据各品种吸光度的研究结果确定。据文献报导，张晓伟采用紫外-可见分光光度法测定维生素C注射液在420 nm波长处的吸光度进行不同灭菌工艺样品的质量评价[5]，颜丽等对双黄连粉针活性炭处理前后的溶液颜色采用460 nm波长处的吸光度进行比较研究[6]。因此，在目视比色法较难判定情况下，通过紫外-可见分光光度法在450 nm附近波长处测定吸光度可以作为产品工艺研究、制剂性能评价、质量标准研究和药物稳定性试验的颜色指标评价方法。

表1　不同用量活性炭对溶液含量的影响

表2　不同用量活性炭对溶液的澄清度与颜色的影响

国家药品标准(化学药品)正文各论编写细则第二部分原料药标准编写细则规定，将药物用溶剂制成一定浓度的溶液，采用紫外-可见分光光度法，在特定波长处测定透光率，用于检查溶液的澄清度与颜色，控制产品质量[1]。据统计，中国药典2015年版二部已经收载了38个药物品种通过透光率控制药物的澄清度与颜色，包括氨基酸类原料药(如门冬氨酸和甘氨酸等)及其他原料药和制剂(如羧甲司坦、注射用肌苷等)。由于注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸溶液为无色，适宜于采用中国药典澄清度检查法第一法(目视法)浊度标准原液的制备所选用的550 nm波长处进行澄清度(以透光率为指标)的研究。

活性炭是具有很强吸附能力的多孔疏松物质，供注射用的活性炭已经收载于2015年版四部药用辅料中，建立了吸着力和活性炭对细菌内毒素吸附力二项功能性指标。吴双俊研究了活性炭对盐酸格拉司琼注射液含量的影响，结果表明：活性炭浓度越大，吸附程度相对增加[7]。吴彩萍研究了不同活性炭浓度对泮托拉唑唑钠溶液的影响，表明增加活性炭用量对颜色改善影响不大，高浓度时反而使溶液颜色加深[8]。本研究结果表明，随着活性炭用量的增加，注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸溶液的含量降低，溶液的澄清度降低，颜色加深，与上述研究结论基本一致。在原料药精制过程中，活性炭的澄清与脱色作用基于药液粗品浊度大和色泽深，在使用高浓度的活性炭后能起到明显的作用。而在制剂生产中，由于原辅料已经经过精制，其澄清度和颜色已经进行了严格的质量控制，过量的活性炭加入除引起含量降低外，反而会使溶液的澄清度变差，溶液颜色加深。因此，在制剂生产中应严格控制活性炭质量和使用浓度，以保证药品符合质量标准的要求。

参考文献

[1]注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸说明书[DB/OL].http://db.yaozh.com/instruct/104448.html.

[2]国家药典委员会.中国药典(四部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015：541-542.

[3]国家药典委员会.国家药品标准技术规范 国家药品标准工作手册.4版[M].北京：中国医药科技出版社，2013：202，210，255.

[4]国家药典委员会.中药典(二部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015:288.

[5]张晓伟.维生素C注射液稳定性的相关探讨[J].中国新技术新产品，2012(11):23.

[6]颜莉.双黄连粉针活性炭处理前后的对比试验研究[J].生物技术世界，2013(9):45-46.

[7]吴双俊.活性炭对盐酸格拉斯琼注射液含量和pH的影响[J].亚太传统医药，2012，8(4):18-19.

[8]吴彩萍.泮托拉唑钠冻干粉针剂生产工艺考察[J].中国药师，2011，14(11):1600-1601.

通信作者：徐全华，男，高级工程师，研究方向：药品生产质量管理和药品研究开发，E-mail：xqh_923@163.com

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.07.011

(收稿日期：2016-02-27，修回日期：2016-05-11)

Effects of actived carbon on the content,clarity and color of Ademetionine 1,4-ButanedisulfonateforInjection

ZHANG Chuanlan， XU Quanhua，MA Weiping

(HangzhouAusiaBiologicalTechnicCo,Ltd.,Hangzhou，Zhejiang310018,China)

Abstract:ObjectiveTostudythe effect of activated carbon on the content,clarity and color of Ademetionine 1,4-ButanedisulfonateforInjectionin order toprovidescientific basis for the selection of concentration of activated carbon.MethodsHPLC was adopted to measure the content of Ademetionine 1,4-Butanedisulfonate.Ultraviolet-visible spectrophotometry was used for the examination of its clarity and color.ResultsThe content of active ingredientwas reduced with the increase inconcentration of activated carbon.The clarity and color of the solution was slightly improved when the concentration of activated carbon was 0.05%,but the clarity became turbidand the color was deepenedwith the increase inconcentration of activated carbon.ConclusionsThe suitable concentration of activated carbon for Ademetionine 1,4-Butanedisulfonate for Injection was 0.05%,and excessive use of activated carbon may affect the pharmaceutical preparation’s quality directly.

Key words：Charcoal;S-Adenosylmethionine;Spectrophotometry,Ultraviolet;Chromatography,High Pressure Liquid