正交试验法优选疏肝和胃颗粒的水提工艺

王秀梅刘光斌毛和平任远

（1嘉峪关市食品药品和医疗器械检验检测中心，甘肃 嘉峪关 735100；2酒钢医院；3甘肃中医药大学，兰州 730000）

正交试验法优选疏肝和胃颗粒的水提工艺

王秀梅1刘光斌2毛和平2任远3

（1嘉峪关市食品药品和医疗器械检验检测中心，甘肃 嘉峪关 735100；2酒钢医院；3甘肃中医药大学，兰州 730000）

目的：确定疏肝和胃颗粒最佳水提工艺参数，为疏肝和胃颗粒水提工艺的生产提供参考。方法：以水提液蒸干残渣70%浸出物为评定指标，采用正交试验设计优化疏肝和胃颗粒水提工艺参数。结果：疏肝和胃颗粒水提最佳工艺条件为：以14倍量水提取2次，每次提取1 h。结论：该提取工艺稳定、合理，对制剂生产具有指导意义。

疏肝和胃颗粒；正交试验；水提工艺

疏肝和胃颗粒是在酒钢医院经验处方基础上自行研究开发的医院制剂（制剂批准文号：甘药制字Z20140067），由高良姜、香附、白芍等7味药材组成。具有疏肝理气、温中和胃、治酸止痛之功效，临床上主要用于肝胃失和所致胃脘痛的治疗。为了保证该制剂的内在质量和临床疗效的稳定性，本文以水提液蒸干残渣70%乙醇浸出物为考察指标，采用L9（34）正交试验法对疏肝和胃颗粒水提工艺进行了考察，从而优选出最佳水提工艺。

1仪器与试药

1.1仪器

PK-S24型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱 （上海精宏实验设备有限公司）；AUW120D型电子分析天平（日本岛津）。

1.2药材来源

所用药材采购于兰州市黄河药材市场，经甘肃中医学院药学院中药鉴定教研室鉴定均为药典品种，其结果如下：

海螵蛸为乌贼科动物无针乌贼（Sepiella maindroni de Rochebrune）的干燥内壳；浙贝母为百合科植物浙贝母（Fritillaria thunbergii Miq.）的干燥鳞茎；高良姜为姜科植物高良姜（Alpinia officinarum Hance）的干燥根茎；香附为莎草科植物莎草（Cyperus rotundus L.）的干燥根茎；白芍为毛茛科植物芍药（Paeonialact flora Pall.）的干燥根；元胡为罂粟科植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T. Wang）的干燥块茎；大黄为蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatum L.）的干燥根及根茎。

2方法与结果

2.1 70%乙醇浸出物含量测定

参照《中国药典》2010版附录中热浸法测定。精密称取各试验号下浸膏细粉3 g左右（相当于原生药材20 g左右），精密称定，置150 mL锥形瓶中，精密加 70%乙醇 75 mL，密塞，称定质量，静置1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h，放冷后取下锥形瓶，密塞，再称定质量，用70%乙醇补足减失质量，摇匀，用干燥滤器过滤，全部滤液置于干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干后，置烘箱中105℃烘3 h，迅速转移至干燥器中，冷却至室温，精密称定质量。

2.2提取工艺优选

2.2.1药材吸水率测定测定药材吸水率，以确定提取用水的最低水平值。按处方比例称取药材200 g，加水8倍浸泡，每隔30 min观察一次浸透情况，直至药材浸至透心，总浸泡时间约为6 h。滤出未被吸收的水液，称量湿药材，按吸水率公式：

吸水率（%）=（浸泡后药材总质量-浸泡前药材总质量）/浸泡前药材总质量 ×100%。

计算出本处方药材吸水率为160%。

2.2.2因素及水平选择以影响水回流提取结果的主要参数提取时间（A）、加水量（B）、提取次数（C）为因素，根据吸水率结果及药材中成分性质，设定因素水平见表1。

表1　因素水平

2.2.3试验安排及结果采用L9（34）正交试验表安排试验，将需要提取的药材按处方比例每个试验称取 288 g，按安排条件提取，所得提取液浓缩、真空干燥后按“2.1”项下方法测定乙醇浸出物的量，试验安排及结果见表2。方差分析见表3。

表2　水提工艺优选正交试验安排及结果

由方差分析结果可知：B因素（总加水量）、C因素（提取次数）影响具显著性，A因素（总提取时间）影响无显著性；结合直观分析结果确定最优工艺方案为A1B2C2，即加水14倍，提取2次，每次提取60 min。

2.2.4验证试验

按处方比例称取需要提取的药材每份288 g，5份，按最优提取工艺方案A1B2C2提取，试验结果见表4。

表3　水提工艺方差分析

表4　水提工艺验证结果

从验证试验结果可知：筛选出的水提工艺可行、稳定可靠、重现性好。

3讨论

和胃止痛方由海螵蛸［1］、浙贝母［2］、高良姜［3］、香附、白芍［4］、元胡［5］、生大黄等药组成。其中海螵蛸、浙贝母敛酸止痛；高良姜温中和胃；香附、白芍、延胡索疏肝理气，活血止痛；生大黄缓和海螵蛸的收涩之性；诸药合用，共凑疏肝理气，温中和胃，治酸止痛之效；故对肝郁气滞、胃失和降引起的胃脘痛，痛时可以牵连胁背，胸脘痞闷、得温痛减、嘈杂、吐酸有显著的疗效。本方为临床应用多年之验方，一直以散剂给药（用法为每次 5 g，每日3次），疗效显著。由于原剂型口感较差，因此患者的顺应性差，严重影响本处方的临床使用。鉴于颗粒剂载药量较大、口感较好，属于固体制剂稳定性也不错，加之该剂型开水冲服的服用方法不影响原散剂速效的特点，为兼顾制剂工艺的简单性和临床用药的方便性决定将该处方的剂型选为颗粒剂。

由于处方中海螵蛸、浙贝母，高良姜、香附、白芍［6］、元胡、生大黄［7-8］等药材中的生物碱、苷类、黄酮类、蒽醌类、无机盐类成分在水中均有一定溶解度，因此选用水作为溶媒回流提取，当水的用量较大时可有效浸出处方有效成分，但由于水的溶解范围较广，水回流提取可将淀粉、蛋白、果胶等大分子杂质提出，因此用出膏率高低作为评价指标不太科学。鉴于生物碱、苷类、黄酮类、蒽醌类等成分在乙醇中均有较好的溶解性，而淀粉、蛋白、果胶等大分子杂质不溶于乙醇，用乙醇浸出物作为提取工艺评价指标，可溶解多种物质，不但有较好的代表性，又由于含有杂质较少而具有一定的科学性。

高良姜、香附等药的主要有效成分中有一大类为挥发油，海螵蛸中含有制酸成分且为君药，鉴于目前采用的蒸馏法提取挥发油工艺复杂、收油率极低的现状，因此将海螵蛸取40%、高良姜、香附各取50%粉碎以原粉入药，3味药的其余部分与其他药材共同回流提取，这样处理既可在医院制剂条件下较好地保留这3味药的有效成分、减少服用剂量，又可兼顾到制剂工艺的简洁性、降低制剂吸潮性，制剂的最终形式为混悬型颗粒剂。

［1］ 于静，顾青青，缪潇瑶，等.海螵蛸质量标准研究［J］.中成药，2015，37（3）：583-587.

［2］ 孙华娟.浙贝母不同炮制品质量的实验研究［J］.中外健康文摘，2013，10（6）：177.

［3］ 李洪福，李永辉，王勇，等.高良姜化学成分及药理活性的研究［J］.中国实验方剂学杂志，2014，20（7）：236-244.

［4］ 高小荣，田庚元.白芍化学成分的研究进展［J］.中国新药杂志，2006，15（6）：416-418.

［5］ 刘浪琪，吴庆光，刘四军，等.元胡止痛膏的抗炎镇痛作用［J］.广东药学院学报，2015，31（2）：231-234.

［6］ 刘光斌，毛和平，刘效栓，等.高效液相色谱法测定和胃散中芍药苷含量［J］.中国实用医药，2009，4（5）：50-51.

［7］ 刘光斌，李怀彪.大黄通气口服液的稳定性研究［J］.西部中医药，2013，26（11）：25-29.

［8］ 刘光斌，李怀彪，谢六生，等.大黄通气口服液的质量标准研究［J］.中国中医药信息杂志，2011，18（7）：47-49.

Optimization of Water Extraction Process of Shugan Hewei Granules by Orthogonal Experiment

Wang Xiumei1，Liu Guangbin2，Mao Heping2，Ren Yuan3（1 Jiayuguang Institute for Food and Drug and Medical Device Control，Gansu Jiayuguang 735100，China；2 Jiugang Hospital；3 Gansu Chinese Traditional Medical College，Lanzhou 730000）

Objective：To provide a reference for the industrial production of water extract of shugan hewei granules by optimization the technological parameters of water extraction process.Methods：The technological parameters of water extraction process of shugan hewei granules was optimized by orthogonal experiment using 70% ethanol extract of dry residues of water extract as an indicater.Results：The process for water extraction was optizimed as extraction with 14 times of volumes of water for 2 times，1 hour for each.Conclusion：The optimized extraction process is stable and rational，which is of a guiding signifiance in the production of the drug.

Shugan Hewei Granules；Orthogonal Experiment；Water Extraction Process

10.3969/j.issn.1672-5433.2016.06.006

甘肃省嘉峪关市科技计划项目（2014-38）

王秀梅，女，主管药师。主要从事药品检验工作。E-mail：867150917@qq.com

刘光斌，男，主任药师。研究方向：医院制剂、临床药学。通讯作者E-mail：jgyylgb@sina.com

2015-12-25）